環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù)方法之芽孢洗脫及熱激活 在生物安全柜中,取4片(支)生物指示劑打開(kāi),取出載體,分別放置于含有3-4顆玻璃珠(直徑6mm)的無(wú)菌試管中,向無(wú)菌試管中加入3mL的含0.1%聚山梨酯80的無(wú)菌純化水,置于渦旋混勻儀上充分振蕩,將試管中載體打散成纖維裝后,再中加入7mL含0.1%聚山梨酯80的無(wú)菌純化水,震蕩30s,制成均一的菌懸液,將該試管記為10-1。 將水浴鍋加熱至80℃-85℃,取上述試管,放置于水浴鍋中熱激活10min,熱激完成后,立即將芽孢懸液轉(zhuǎn)移至0-4℃的冰水浴中冷卻至室溫。5大滅菌方式全覆蓋!真正的一站式滅菌驗(yàn)證解決方案。懸液式濕熱滅菌生物指示劑耐受性
為什么要使用生物指示劑 使用生物指示劑的原因主要基于其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和在滅菌效果驗(yàn)證中的重要性 1. 直接反映微生物殺滅能力 微生物的耐受性差異:不同的微生物對(duì)滅菌因子(如高溫、化學(xué)消毒劑等)的耐受性不同。生物指示劑通常選用對(duì)滅菌因子具有較強(qiáng)抵抗力的特定微生物(如芽孢菌),這些微生物的耐受性接近甚至高于一些致病菌。因此,如果生物指示劑中的微生物被完全殺滅,可以推斷滅菌過(guò)程對(duì)其他微生物也具有足夠的殺滅能力。 模擬實(shí)際滅菌對(duì)象:在實(shí)際滅菌過(guò)程中,待滅菌物品可能攜帶各種微生物,包括一些難以培養(yǎng)或檢測(cè)的微生物。生物指示劑提供了一種標(biāo)準(zhǔn)化的微生物樣本,能夠模擬實(shí)際滅菌過(guò)程中可能存在的微生物情況,從而更準(zhǔn)確地評(píng)估滅菌效果。 2. 驗(yàn)證滅菌過(guò)程的可靠性 物理參數(shù)的局限性:只依靠物理參數(shù)(如溫度、壓力、時(shí)間等)來(lái)判斷滅菌效果是不夠的。物理參數(shù)的監(jiān)測(cè)只能反映滅菌設(shè)備的運(yùn)行狀態(tài),但無(wú)法直接證明微生物是否被完全殺滅。例如,即使溫度和壓力達(dá)到設(shè)定值,但由于設(shè)備故障、物品放置不當(dāng)或滅菌時(shí)間不足等原因,仍可能導(dǎo)致滅菌失敗。生物指示劑能夠直接檢測(cè)微生物的存活情況,從而驗(yàn)證滅菌過(guò)程的實(shí)際效果??莶菅挎邨U菌生物指示劑參數(shù)泰林生物指示劑的芽孢濃度精確,符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),提供可靠的滅菌效果驗(yàn)證。
環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù)注意事項(xiàng) 1、切勿將生物指示劑進(jìn)行紫外照射消毒,建議對(duì)初級(jí)包裝進(jìn)行擦拭。 2、環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù),建議使用含0.1%聚山梨酯80的無(wú)菌純化水進(jìn)行稀釋。 3、吸取含紙質(zhì)載體的菌液時(shí),避免纖維堵槍頭,導(dǎo)致移液不準(zhǔn)確。 4、建議以單片(支)生物指示劑的形式進(jìn)行計(jì)數(shù),確保每片(支)生物指示劑計(jì)數(shù)結(jié)果均符合要求。 5、建議使用玻璃珠(4mm-6mm)對(duì)紙質(zhì)載體進(jìn)行打散處理。 6、芽孢計(jì)數(shù)過(guò)程中必須進(jìn)行熱激活處理:溫度80℃-85℃,時(shí)間10min。
生物指示劑的技術(shù)原理與微生物學(xué)基礎(chǔ) 芽孢的抗性機(jī)制 生物指示劑的關(guān)鍵是特定微生物的芽孢(如嗜熱脂肪地芽孢桿菌、萎縮芽孢桿菌)。 芽孢具有多層保護(hù)結(jié)構(gòu)(如皮層、孢子殼),使其耐受高溫、輻射、化學(xué)滅菌劑等極端條件。 抗力驗(yàn)證:芽孢的D值(殺滅90%微生物所需時(shí)間)和Z值(溫度變化對(duì)D值的影響)是評(píng)估滅菌效力的關(guān)鍵參數(shù)。 培養(yǎng)液設(shè)計(jì) 變色培養(yǎng)基(如溴甲酚紫)通過(guò)pH變化指示微生物生長(zhǎng)(滅菌失敗時(shí)產(chǎn)酸變黃)。 自含式設(shè)計(jì)整合培養(yǎng)液與芽孢載體,避免二次污染(如泰林專(zhuān)利防蒸發(fā)結(jié)構(gòu))。從滅菌開(kāi)發(fā)到定期驗(yàn)證,泰林提供全生命周期生物監(jiān)測(cè)方案。
生物指示劑D值測(cè)定 D值是滅菌驗(yàn)證的基石,需通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法(存活曲線法)精確測(cè)定。 實(shí)際應(yīng)用中需結(jié)合Z值、F值等參數(shù),優(yōu)化滅菌工藝。 質(zhì)量控制包括菌種標(biāo)準(zhǔn)化、設(shè)備校準(zhǔn)和數(shù)據(jù)追溯,確保結(jié)果可靠性。 通過(guò)科學(xué)測(cè)定D值,可確保生物指示劑真實(shí)反映滅菌效力,為醫(yī)療、制藥等行業(yè)提供無(wú)菌保障。 D值測(cè)定方法 1. 存活曲線法(Fractional Negative Method) 適用場(chǎng)景:實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定(如ISO 11138、USP要求)。 步驟: 制備生物指示劑: 使用標(biāo)準(zhǔn)菌株(如嗜熱脂肪地芽孢桿菌ATCC 7953),確保初始芽孢量已知(如1×10? CFU/載體)。 設(shè)定滅菌條件: 固定溫度/壓力(如121℃蒸汽滅菌),分多組不同時(shí)間處理(如2、4、6、8分鐘)。 回收與培養(yǎng): 滅菌后立即用中和劑(如硫代硫酸鈉)終止反應(yīng),洗脫芽孢并接種培養(yǎng)。 計(jì)數(shù)存活菌落: 統(tǒng)計(jì)每組存活菌落數(shù)(CFU),繪制存活曲線(對(duì)數(shù)存活量 vs 時(shí)間)。氣體滅菌全能選手:泰林GP3-8032適配甲醛/臭氧.懸液式濕熱滅菌生物指示劑耐受性
泰林生物指示劑的培養(yǎng)條件優(yōu)化,減少假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果。懸液式濕熱滅菌生物指示劑耐受性
監(jiān)控液體滅菌效果時(shí),為什么要將懸液式濕熱滅菌生物指示劑放入液體中呢? 液體滅菌,自然是想了解液體內(nèi)部的滅菌情況啦。我們將溫度探頭分別放在水中、培養(yǎng)基中、和滅菌器中,得到了如下溫度趨勢(shì)信息:當(dāng)滅菌器溫度達(dá)到設(shè)定值時(shí)(以121℃為例),滅菌器開(kāi)始滅菌計(jì)時(shí),此時(shí)被滅菌的培養(yǎng)基溫度只有109℃。因此,在進(jìn)行物理驗(yàn)證時(shí)需要將溫度傳感器放置在被滅菌液體中,同理,生物指示劑也要置于液體內(nèi)部進(jìn)行監(jiān)測(cè),才能反應(yīng)液體的真實(shí)滅菌情況。懸液式濕熱滅菌生物指示劑耐受性