熒光壽命成像是什么？如果分子環(huán)境刺激激發(fā)態(tài)衰變而不發(fā)射光子，則熒光強度會降低（淬滅）。熒光淬滅是一條單獨的發(fā)射路徑，因此在動力學上與熒光過程形成競爭關系。激發(fā)態(tài)存儲現(xiàn)在可以通過一個以上的過程衰變，從而縮短熒光壽命。這種壽命的改變可用于收集分子環(huán)境的信息。一種特殊類型的淬滅是將激發(fā)能量以非輻射的方式傳遞到相鄰的不同熒光染料中：“熒光共振能量轉移”，F(xiàn)RET。此時，不只第1個熒光染料（供體）變暗，壽命變短，而且第二個熒光染料（受體）在“錯誤的”激發(fā)顏色下開始發(fā)光。由于這種效果的產(chǎn)生需要兩種熒光染料（小于10 nm）的密切接觸，因此將其用作研究分子相互作用的“分子標尺”。它也是許多現(xiàn)代FRET生物傳感器的基礎。由于熒光壽命成像不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術無法代替的優(yōu)異性能。深圳單分子熒光壽命成像哪家靠譜
市場上熒光壽命的測量方式可分為時域法和頻域法，兩者在本質上是相通的，測量精度相近，頻域技術是時域法的傅里葉變換的延伸。時域和頻域技術在各種顯微壽命成像平臺中都有應用，時間相關單光子計數(shù)方法（TCSPC )是常見的時域技術，而新興的數(shù)字頻域技術（FastFLIM? )則取代了傳統(tǒng)的模擬頻域技術，憑借其獨恃的優(yōu)勢成為應用廣的頻域技術。熒光壽命成像主要通過TCSPC技術（Time-Correlated Single Photon Counting）實現(xiàn)。由于TCSPC系統(tǒng)，一個激光脈沖只采集一個光子信號，所以激光器的重復頻率決定了系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集速度。重頻越高，采集速度越快，數(shù)據(jù)信噪比越好。浙江生物熒光壽命成像價格表熒光壽命顯微成像是熒光壽命測量和熒光顯微技術的結合。
熒光壽命是熒光分子在激發(fā)態(tài)停留的時間，這個時間可以反映熒光分子的內(nèi)在屬性和所處的微環(huán)境，是一個很有用的工具。以往，熒光壽命的測量和計算是件非常復雜和耗時的工作，只有少數(shù)專業(yè)的科學家關注和使用該工具。傳統(tǒng)的多色成像實驗根據(jù)光譜差異來設計，會有串色等限制，而且需要多次采集圖像，會造成樣品的光損傷。通過熒光壽命來進行成像，只需要拍攝一次就完成圖像采集，不但減少了成像時間，而且降低了激光對樣品的損傷。熒光壽命成像使用簡單，方便快捷，不需要進行參數(shù)調節(jié)。
時域法熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關單光子計數(shù)法（time correlated single photon counting, TCSPC）、門控探測法（time-gated detection）、條紋相機測量法（streak-FLIM）、頻閃技術等四種常見的方法。TCSPC是目前測量熒光壽命的主要技術，同軸脈沖光源發(fā)出的脈沖光引起起始光電倍增管產(chǎn)生電信號，該信號通過恒分信號甄別器1啟動時幅轉換器（time-amplitude converter，TAC），時幅轉換器產(chǎn)生一個隨時間線性增長的電壓信號。此外，同軸脈沖光源發(fā)出的脈沖光通過激發(fā)單色器后到達樣品池，樣品產(chǎn)生的熒光信號再經(jīng)過發(fā)射單色器到達終止光電倍增管，由此產(chǎn)生的電信號經(jīng)由恒分信號甄別器2到達時幅轉換器并使其停止工作。此時，時幅轉換器根據(jù)累積電壓輸出一個數(shù)字信號并在多通道分析儀（multi-channel analyzer）的相應時間通道計入一個信號，表明檢測到壽命為該時間的一個光子。經(jīng)過幾十萬次的重復后，不同的時間通道累積下來的光子數(shù)目不相同。熒光壽命成像不受光漂白的影響。
與熒光光譜一樣，熒光壽命也是熒光物質的一種內(nèi)在特有性質，不受熒光物質濃度、激發(fā)光強度等因素的影響。熒光壽命成像能在不受熒光強度影響因素影響的條件下，在納米分辨率水平對蛋白互作進行研究，或者通過 FRET 探針研究分子環(huán)境變化，更重要的是其測量數(shù)據(jù)準確性高、易重復。通過熒光壽命成像還可以對樣本所處的微環(huán)境進行檢測、對樣品組份進行分離等等。在傳統(tǒng)的熒光強度和熒光光譜兩個維度的基礎上，又增加了熒光壽命這一新的成像維度，大幅度拓展了該系統(tǒng)的應用范圍。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。浙江生物熒光壽命成像價格表
隨著技術的發(fā)展，在顯微鏡視野內(nèi)進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。深圳單分子熒光壽命成像哪家靠譜
作為熒光成像中除光譜和強度之外的新維度，當前，熒光壽命成像主要應用領域包括：用于樣品分離，如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光壽命成像可以提供熒光強度（光子數(shù)）和光子壽命的空間分布，具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。通過雙光子激發(fā)可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。這種無損檢測技術，無需解剖或專門制造分層樣品，不但可在樣品表面，還可在樣品表面以下實現(xiàn)深度解析測量。特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復合材料以及其相關的原理探究和設計優(yōu)化。深圳單分子熒光壽命成像哪家靠譜
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