在種類(lèi)繁多的顯微技術(shù)中，熒光壽命顯微成像技術(shù)（FLIM）具有對(duì)生物大分子結(jié)構(gòu)、動(dòng)力學(xué)信息和分子環(huán)境等進(jìn)行高分辨高精度測(cè)量的能力，因此其重要性日漸提升，被普遍地應(yīng)用于生物學(xué)研究及臨床診斷等領(lǐng)域。熒光的特性包含有：熒光激發(fā)和發(fā)射光譜、熒光強(qiáng)度、量子效率、熒光壽命等,其中，熒光壽命是指熒光分子在激發(fā)態(tài)上存在的平均時(shí)間（納秒量級(jí)）。分子的熒光壽命在幾納秒至幾百納秒之間，因此，測(cè)量熒光壽命需要極快響應(yīng)時(shí)間的探測(cè)器。熒光壽命成像的發(fā)展很好地彌補(bǔ)了基于強(qiáng)度成像的問(wèn)題，對(duì)生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)有著重要的意義。影響熒光壽命成像測(cè)量的因素有哪些？杭州生物熒光壽命成像哪里買(mǎi)
熒光壽命成像顯微術(shù)(FLIM)是一種利用熒光染料固有特性的成像技術(shù)。除了具有特有的發(fā)射光譜外，每個(gè)熒光分子還有特有的壽命，它反映了熒光基團(tuán)在發(fā)射光子之前處于激發(fā)態(tài)的時(shí)間。除了標(biāo)準(zhǔn)的熒光強(qiáng)度測(cè)量外，壽命分析還可以提供其他信息。過(guò)去，壽命成像一直是一種緩慢、復(fù)雜的專(zhuān)業(yè)化技術(shù)。只有經(jīng)驗(yàn)豐富的顯微鏡**或物理學(xué)家才會(huì)使用這種技術(shù)。熒光壽命成像提供了額外的信息，有助提高共聚焦成像的質(zhì)量。它非常適合用于區(qū)分熒光發(fā)射光譜重疊的熒光探針，或消除不需要的背景熒光信號(hào)。熒光壽命成像生產(chǎn)熒光壽命成像可以提供熒光強(qiáng)度（光子數(shù)）和光子壽命的空間分布。
熒光壽命成像有幾點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：1.不需要考慮跳色的影響，從而免去了計(jì)算和去除跳色雜質(zhì)信號(hào)的麻煩；去除跳色雜質(zhì)的準(zhǔn)確性很大程度上依賴(lài)于信噪比、成像流程的設(shè)計(jì)和控制、以及跳色信號(hào)估算的算法，這些因素使得通過(guò)穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度測(cè)量熒光壽命成像的精確度在很多時(shí)候受到質(zhì)疑。2.穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度的熒光壽命成像測(cè)量很容易受熒光標(biāo)記光漂白或是激發(fā)光散射背景的影響,而這些因素對(duì)FLIM-FRET的測(cè)量影響相對(duì)較低。3.熒光壽命成像可以定量的區(qū)分參與FRET和沒(méi)有參與FRET的分子數(shù)量，這樣深入的定量分析是穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度方法做不到的。
顯微熒光壽命成像應(yīng)用：材料科學(xué)領(lǐng)域：寬禁帶半導(dǎo)體等體系的少子壽命mapping 測(cè)量；量子點(diǎn)等用作熒光壽命成像顯微鏡探針；鈣鈦礦電池/LED 薄膜的組分分析、缺陷檢測(cè)；銅銦鎵硒CIGS，銅鋅錫硫CZTS 薄膜太陽(yáng)能電池的組分、缺陷檢測(cè)；鑭系上轉(zhuǎn)換納米顆粒；GaAs 或GaAsP 量子阱的載流子擴(kuò)散研究；生命科學(xué)領(lǐng)域：細(xì)胞體自身熒光壽命分析；自身熒光相對(duì)熒光標(biāo)記的有效區(qū)分；活細(xì)胞內(nèi)水介質(zhì)的PH 值測(cè)量；局部氧氣濃度測(cè)量；具有相同頻譜性質(zhì)的不同熒光標(biāo)記的區(qū)分；活細(xì)胞內(nèi)鈣濃度測(cè)量；時(shí)間分辨共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：納米級(jí)尺度上的遠(yuǎn)差測(cè)量，環(huán)境敏感的FRET 探針定量測(cè)量；代謝成像：NAD(P)H 和FAD 胞質(zhì)體的熒光壽命成像。熒光壽命成像通常用于研究生物分子間相互作用、細(xì)胞中的信號(hào)事件或區(qū)分光譜重疊的熒光團(tuán)。
熒光顯微技術(shù)具有無(wú)損、非接觸、高特異性、高靈敏、高體友好以及能夠提供功能信息等突出優(yōu)點(diǎn)，一直是生命科學(xué)，尤其是細(xì)胞生物學(xué)研究的重要工具。近年來(lái)，隨著生命科學(xué)的發(fā)展，對(duì)熒光顯微技術(shù)也提出了越來(lái)越高的要求，激光技術(shù)、熒光探針標(biāo)記技術(shù)、新型熒光探測(cè)技術(shù)和成像手段的不斷發(fā)展，極大地促進(jìn)了熒光顯微技術(shù)的發(fā)展，成為推動(dòng)生命科學(xué)發(fā)展的重要?jiǎng)恿?。此外，熒光顯微技術(shù)也在成像的對(duì)比機(jī)制方面獲得了很大的進(jìn)展。超分辨(SR)成像技術(shù)的發(fā)展，也為熒光壽命成像(FLIM)的新發(fā)展提供了巨大的機(jī)遇。熒光壽命顯微成像，可以定位不同的分子及濃度分布，在生物，材料，半導(dǎo)體領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價(jià)值。江門(mén)熒光壽命成像哪個(gè)牌子好
熒光壽命取決于熒光分子所處的微環(huán)境，通過(guò)對(duì)樣品熒光壽命的測(cè)量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。杭州生物熒光壽命成像哪里買(mǎi)
熒光壽命成像在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷應(yīng)用中的許多場(chǎng)合都對(duì)多光譜分辨提出特殊要求，如在FRET測(cè)量中，要求能同時(shí)測(cè)量供體和受體的熒光強(qiáng)度隨時(shí)間的衰減，多光譜分辨的熒光壽命成像提供了一種新的定量研究手段．目前，基于門(mén)控像增強(qiáng)器的多光譜寬場(chǎng)FLIM 技術(shù)一次只能獲得至多兩個(gè)譜段的熒光壽命圖像，而基于TCSPC的多光譜分辨FLIM的成像速度又很低，這些都限制了其應(yīng)用范圍．目前的一個(gè)研究方向是，發(fā)展光譜分辨率高、成像速度快、價(jià)格低廉的多光譜分辨熒光壽命成像顯微技術(shù)。杭州生物熒光壽命成像哪里買(mǎi)
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