重慶熒光壽命成像怎么樣

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-27

熒光壽命成像分析是什么?熒光壽命是用于幾種生物測(cè)定的穩(wěn)健參數(shù)。它有可能替代傳統(tǒng)的測(cè)量技術(shù),如吸收法、冷光法或熒光強(qiáng)度法。熒光團(tuán)物理化學(xué)環(huán)境的任何變化都會(huì)導(dǎo)致熒光壽命的改變??赏ㄟ^各種機(jī)制來研發(fā)基于壽命的分析,例如簡(jiǎn)單的結(jié)合測(cè)定,涉及到兩個(gè)組分的結(jié)合(一個(gè)被熒光標(biāo)記)而引起FLT的變化。另一種機(jī)制是猝滅釋放型測(cè)定,涉及大量過量存在的猝滅物質(zhì),其具有低而有限的熒光。一旦熒光化合物被釋放(通過酶促反應(yīng)或與互補(bǔ)DNA結(jié)合),系統(tǒng)的壽命就會(huì)改變。FLT可與FRET(熒光共振能量轉(zhuǎn)移)分析結(jié)合用于能量轉(zhuǎn)移效率測(cè)量。熒光壽命成像的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些?重慶熒光壽命成像怎么樣

熒光壽命顯微成像技術(shù)具有對(duì)生物大分子結(jié)構(gòu)、動(dòng)力學(xué)信息和分子環(huán)境等進(jìn)行高分辨高精度測(cè)量的能力,因此其重要性日漸提升,被普遍地應(yīng)用于生物學(xué)研究及臨床診斷等領(lǐng)域。熒光壽命,分子包含多個(gè)能態(tài)S0、S1、S2和三重態(tài)T1,每個(gè)能態(tài)都包含多個(gè)精細(xì)的能級(jí)。正常情況下,大部分電子處在較低能態(tài)即基態(tài)S0的較低能級(jí)上,當(dāng)分子被光束照射,會(huì)吸收光子能量,電子被激發(fā)到更高的能態(tài)S1或S2上,在S2能態(tài)上的電子只能存在很短暫的時(shí)間,便會(huì)通過內(nèi)轉(zhuǎn)換過程躍遷到S1上,而S1能態(tài)上的電子亦會(huì)在極短時(shí)間內(nèi)躍遷到S1的較低能級(jí)上,而這些電子會(huì)存在一段時(shí)間后通過震蕩弛豫輻射躍遷到基態(tài),這個(gè)過程會(huì)釋放一個(gè)光子,即熒光。重慶動(dòng)物熒光壽命成像研發(fā)生物發(fā)光與熒光成像相同點(diǎn)是都需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記。

熒光壽命成像的優(yōu)勢(shì)是什么?熒光壽命成像具有不同于熒光強(qiáng)度成像的眾多優(yōu)點(diǎn);不需要考慮跳色的影響,從而免去了計(jì)算和去除跳色雜質(zhì)信號(hào)的麻煩;去除跳色雜質(zhì)的準(zhǔn)確性很大程度上依賴于信噪比、成像流程的設(shè)計(jì)和控制、以及跳色信號(hào)估算的算法,這些因素使得通過穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度測(cè)量熒光壽命成像的精確度在很多時(shí)候受到質(zhì)疑。穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度的熒光壽命成像測(cè)量很容易受熒光標(biāo)記光漂白或是激發(fā)光散射背景的影響,而這些因素對(duì)FLIM-FRET的測(cè)量影響相對(duì)較低。熒光壽命成像可以定量的區(qū)分參與FRET和沒有參與FRET的分子數(shù)量,這樣深入的定量分析是穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度方法做不到的。

生物發(fā)光與熒光壽命成像不同點(diǎn):產(chǎn)生光子的原理不同,類似于我們都是通過肉眼去觀察螢火蟲和發(fā)光水母一樣,生物發(fā)光與熒光成像在本質(zhì)上,都是機(jī)體中特定的細(xì)胞或材料發(fā)出光子,被高靈敏度的CCD檢測(cè)到形成圖像,但是生物發(fā)光與熒光壽命成像產(chǎn)生光子的過程和機(jī)制是完全不同的。生物發(fā)光與熒光成像相同點(diǎn):都需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記。生物發(fā)光產(chǎn)生的光子和熒光壽命成像產(chǎn)生的光子都可以被高靈敏的CCD檢測(cè)并形成圖像,就像一個(gè)人的眼睛就可以既看到螢火蟲又可以看到發(fā)光水母一樣。除此之外,生物發(fā)光和熒光壽命成像都需要對(duì)目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,讓細(xì)胞產(chǎn)生熒光素酶或者熒光蛋白。熒光壽命成像和生物發(fā)光的不同之處是什么?

用于流場(chǎng)診斷的快速熒光壽命成像系統(tǒng)及方法:熒光壽命成像具有不受染料濃度、不受光漂白、不受樣本厚度和光源噪聲的影響等諸多優(yōu)點(diǎn),通過這一技術(shù)手段可以深入地進(jìn)行功能性測(cè)量,獲取分子構(gòu)象、分子微環(huán)境變化等信息,研究分子間的相互作用。熒光共振能量轉(zhuǎn)移是一種非輻射的,距離依賴的由供體熒光基團(tuán)傳遞能量至受體熒光基團(tuán)的過程,普遍用于蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象變化,蛋白質(zhì)分子間的相互作用,分子間距離的測(cè)量等研究。熒光壽命是熒光分子停留在激發(fā)態(tài)的時(shí)間,是熒光分子的固有性質(zhì),同熒光強(qiáng)度成像相比。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強(qiáng)度擾動(dòng)、染料的光漂白以及其他有礙熒光強(qiáng)度的因素的影響。湖北分子熒光壽命成像好不好

熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度的優(yōu)點(diǎn)。重慶熒光壽命成像怎么樣

為什么說熒光壽命成像技術(shù)是先進(jìn)的?熒光壽命成像可以提供熒光強(qiáng)度(光子數(shù))和光子壽命的空間分布,具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級(jí)的時(shí)間分辨率。通過雙光子激發(fā)(結(jié)合飛秒脈沖和共焦顯微鏡)可以直接檢測(cè)熒光和時(shí)間分辨的熒光壽命。這種無損檢測(cè)技術(shù),無需解剖或?qū)iT制造分層樣品,不但可在樣品表面,還可在樣品表面以下實(shí)現(xiàn)深度解析測(cè)量。特別適用于新材料、光子學(xué)、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復(fù)合材料以及其相關(guān)的原理探究和設(shè)計(jì)優(yōu)化。重慶熒光壽命成像怎么樣

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