共聚焦主要的觀察對(duì)象是熒光。通俗來講,是指用波長(zhǎng)短的光照射某物質(zhì),該物質(zhì)被照射時(shí),由于光激發(fā)原理,能發(fā)射出比照射光波長(zhǎng)較長(zhǎng)的光,后者即為熒光。我們觀察的熒光物質(zhì)主要為熒光蛋白或熒光染料,可能樣本本身也會(huì)有一些自發(fā)熒光。具體到共聚焦顯微鏡上,就是用不同的激光器去激發(fā)樣本中的熒光染料,使之發(fā)射不同的熒光,就可以得到多色熒光圖像了。不管是熒光染料還是熒光蛋白,或是其它熒光材料,都有其熒光特性,主要指激發(fā)光(Ex)-Excitation與發(fā)射光(Em)-Emission。我們常說的488,543,633就是指相關(guān)熒光材料的激發(fā)光,但要注意,無論激發(fā)光還是發(fā)射光,都不是一個(gè)數(shù)值,而是一段波譜,只是為了日常使用方便才使用488nm這樣的波譜峰值(Ex-Max)。共聚焦顯微鏡主要的觀察對(duì)象是熒光。重慶三豐顯微鏡
顯微鏡透射照明的方式有兩種:(2)柯勒照明柯勒照明光學(xué)系統(tǒng)如圖2所示。光源經(jīng)聚光鏡前組成像在照明系統(tǒng)的視場(chǎng)光闌上;聚光鏡前組經(jīng)過聚光鏡后組成像于標(biāo)本處,同時(shí)也把照明系統(tǒng)視場(chǎng)光闌成像在無限遠(yuǎn)處,使之與遠(yuǎn)心物鏡的入射光瞳重合??吕照彰髦械那敖M聚光鏡稱為柯勒鏡,它得到了光源的均勻照明,經(jīng)過聚光鏡后組成像在標(biāo)本上。故標(biāo)本上得到均勻的照明,這是柯勒照明的重要特點(diǎn)。聚光鏡中的孔徑光闌緊貼聚光鏡前組,通過聚光鏡后組所成的像,即聚光鏡的出射光瞳也與顯微鏡的物平面(標(biāo)本)貼近,故光闌起到了限制顯微鏡視場(chǎng)的作用??吕照彰骶酃庀到y(tǒng)的出射光瞳和像方視場(chǎng)分別與顯微鏡的物方視場(chǎng)和入射光瞳重合,從而形成“視場(chǎng)對(duì)瞳、瞳對(duì)視場(chǎng)”的光管。浙江顯微鏡大概價(jià)格多少顯微鏡的規(guī)范操作教程;
掃描探針顯微鏡是在掃描隧道顯微鏡的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的各種新型探針顯微鏡(原子力顯微鏡,靜電力顯微鏡,磁力顯微鏡,掃描離子電導(dǎo)顯微鏡,掃描電化學(xué)顯微鏡等)的統(tǒng)稱,是國(guó)際上近年發(fā)展起來的表面分析儀器。
掃描探針顯微鏡的基本工作原理是利用探針與樣品表面原子分子的相互作用,即當(dāng)探針與樣品表面接近至納米尺度時(shí)形成的各種相互作用的物理場(chǎng),通過檢測(cè)相應(yīng)的物理量而獲得樣品表面形貌。掃描探針顯微鏡主要由探針、掃描器、位移傳感器、控制器、檢測(cè)系統(tǒng)和圖像系統(tǒng)5部分組成。
透射電鏡的工作過程與光學(xué)顯微鏡類似。在光學(xué)顯微鏡中聚焦后的可見光射向樣品,穿過樣品的光經(jīng)過物鏡、目鏡等光學(xué)系統(tǒng)聚焦后被眼睛接收。在電子顯微鏡中,可見光由電子槍發(fā)射出來的電子束所代替,在陽(yáng)極加速電壓的作用下,電子經(jīng)過2、3個(gè)電磁透鏡會(huì)聚為電子束,用來照明樣品薄片 (電子的穿透能力很弱,因此樣品必須很薄),穿過樣品薄片的電子攜帶了樣品本身的結(jié)構(gòu)信息,經(jīng)物鏡、中間鏡和投影鏡所組成的成像系統(tǒng)的接力聚焦放大以圖像或衍射譜的形式顯示于熒光屏或感光材料上。探針臺(tái)顯微鏡選用的是長(zhǎng)工作距離物鏡;
掃描探針顯微鏡的特點(diǎn):
掃描探針顯微鏡是除了場(chǎng)離子顯微鏡和高分辨率透射電子顯微鏡之后的第三種以原子尺度觀察物質(zhì)結(jié)構(gòu)的顯微鏡。以掃描隧道顯微鏡(STM)為例,其橫向分辨率為0.1~0.2nm,縱向深度分辨率則為0.01nm,這樣的分辨率可以清楚地觀測(cè)到分布在樣品表面的單個(gè)原子或分子。同時(shí),掃描探針顯微鏡還可以在空氣,其他氣體或液體環(huán)境下進(jìn)行觀察研究。掃描探針顯微鏡擁有原子分辨、原子搬運(yùn)、納米微加工等特點(diǎn),但是由于細(xì)部各種掃描顯微鏡的工作原理不同,它們得到的結(jié)果所反映的樣品表面信息是很不同的。掃描隧道顯微鏡測(cè)量的是樣品表面的電子臺(tái)分布信息,具有原子級(jí)別的分辨率但仍得不到樣品的真結(jié)構(gòu)。而原子顯微鏡探測(cè)的是原子之間的相互作用信息,因此可以得到樣品表面原子分布的排列信息即樣品的真實(shí)結(jié)構(gòu)。但另一方面,原子力顯微鏡測(cè)不到可以和理論比較的電子態(tài)信息,因此二者各有短長(zhǎng)。 體視顯微鏡的性能特點(diǎn);湖南顯微鏡
透射電鏡主要應(yīng)用于半導(dǎo)體、材料科學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域。重慶三豐顯微鏡
顯微鏡透射照明的方式有兩種:(1)臨界照明這種照明要求聚光鏡所成的光源像與被觀察物體的物平面重合,如圖1所示,相當(dāng)于物面上放置一個(gè)光源,燈絲的形狀同時(shí)出現(xiàn)在像面上,而造成不理想的觀察效果。臨界照明透射照明中,為使物鏡的孔徑角得以充分利用,聚光鏡應(yīng)有與物鏡相同或稍大的數(shù)值孔徑。臨界照明聚光鏡的孔徑光闌常設(shè)在聚光鏡的物方焦平面上,如果顯微鏡用的是遠(yuǎn)心物鏡,聚光鏡的出射光瞳與物鏡的入射光瞳重合。聚光鏡的光闌做成可變光闌,可任意改變射入聚光鏡的孔徑角,使之與物鏡的數(shù)值孔徑匹配。由于臨界照明聚光鏡的出射光瞳和像方視場(chǎng)分別與物鏡的入射光瞳和物方視場(chǎng)重合,所以形成“瞳對(duì)瞳,視場(chǎng)對(duì)視場(chǎng)”的光管。臨界照明的缺點(diǎn)在于當(dāng)光源亮度不均勻或者呈現(xiàn)明顯的燈絲結(jié)構(gòu)時(shí),將會(huì)反映在物面上,使物面照度不均勻,從而影響觀察效果。為了達(dá)到比較均勻的照明,這種照明方式對(duì)發(fā)光體本身的均勻性要求較高,同時(shí)要求被照明物體表面和光源像之間有足夠的離焦量。后續(xù)物鏡的孔徑角應(yīng)該取大一些,如果物鏡的孔徑角過小,焦深會(huì)很大,容易反映出發(fā)光體本身的不均勻性。 重慶三豐顯微鏡
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