MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養(yǎng)基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養(yǎng)添加劑,可直接替代細胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會自發(fā)的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養(yǎng)時,細胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似,連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應。 M199含有獨特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶、以及其他的維生素。遼寧iclean細胞培養(yǎng)基廠家
基礎細胞生物學研究離不開 DMEM 培養(yǎng)基的支持??蒲腥藛T借助 DMEM 培養(yǎng)基,能夠在體外成功培養(yǎng)和長期維持多種細胞系,深入探究細胞的各項功能。例如,通過觀察細胞在 DMEM 培養(yǎng)基中的生長、增殖過程,研究細胞周期調(diào)控機制;分析細胞的分化現(xiàn)象,探索細胞命運決定的分子機理;監(jiān)測細胞的死亡過程,了解細胞凋亡、壞死等不同死亡方式的信號通路。DMEM 培養(yǎng)基為解開細胞生命奧秘提供了關鍵的研究工具,助力基礎細胞生物學研究不斷取得新突破。貴州DMEM細胞培養(yǎng)基廠家直銷Ham’s F-10適合用于人二倍體細胞的培養(yǎng),低血清條件下細胞的克隆化培養(yǎng),及動物的原代細胞培養(yǎng)。
MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質(zhì)的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染。
含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡鹽溶液溶解)與合成培養(yǎng)基(如MEM細胞培養(yǎng)基)以1:1的比例混合使用。目前用于細胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。此外,血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。目前,血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5~20%,常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復雜,批間差異大及存在病毒等外源污染風險,對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響,在生物制藥行業(yè)的使用也越來越少。因此,基于對血漿成份的分析,合成細胞培養(yǎng)基應運而生。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學物質(zhì)模擬合成、人工設計、配制的培養(yǎng)基。開發(fā)的基礎培養(yǎng)基(minimalessentialmedium,MEM)。即用型DMEM/F12,確保細胞活力與實驗結果可靠性。
Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設計用于培養(yǎng)原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對較廣的細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細胞培養(yǎng)時細胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。 針對細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的 McCoy’s 5A改良培養(yǎng)基。云南樣本細胞培養(yǎng)基源頭直供
HeLa 細胞、Jurkat 細胞、 MCF-7 細胞、PC12 細胞、PBMC 細胞、星形膠質(zhì)細胞和ai細胞,是使用的培養(yǎng)基之一。遼寧iclean細胞培養(yǎng)基廠家
細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方。遼寧iclean細胞培養(yǎng)基廠家
深圳市華晨陽科技有限公司是一家致力于核酸檢測、分子診斷、醫(yī)學檢驗、病毒檢測等產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的國家高新技術企業(yè)。公司擁有二十多項專利,部分專利已經(jīng)轉化應用于市場。產(chǎn)品主要應用于基因檢測、醫(yī)療機構、生物制藥、大型甲等醫(yī)院、出入境檢驗檢疫、診斷試劑、疾控機構、刑偵法醫(yī)鑒定等。近年來,公司不斷加大自主研發(fā)投入,積極引進人才和技術,并與國內(nèi)外多家科研機構、醫(yī)學檢驗所以及三甲醫(yī)院、基因檢測公司、疾病預防控制中心等科研機構有著緊密合作,促進人類健康產(chǎn)業(yè)大發(fā)展。