細(xì)胞增殖通俗點(diǎn)講，細(xì)胞增殖也就是細(xì)胞分裂，就像我們每個(gè)人的生命起點(diǎn)都是由一個(gè)受精卵不斷的分裂而來(lái)，然后形成由非常多的細(xì)胞組成的個(gè)體，當(dāng)然在增殖期間也不斷有衰老和死亡的細(xì)胞出現(xiàn)，這就是細(xì)胞增殖。增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖及遺傳的基礎(chǔ)。大家了解細(xì)胞增殖說(shuō)明了什么嗎？細(xì)胞增殖的狀態(tài)是什么樣的？上海東寰給大家講解一下。細(xì)胞增殖簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，只要有增殖就說(shuō)明細(xì)胞還活著，所以細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征。科研小伙伴研究它干什么呢？舉幾個(gè)例子，比如某小伙伴發(fā)現(xiàn)了一種可能殺死腫的小分子，那如果要驗(yàn)證這個(gè)小分子是否有效，那就要研究加入這個(gè)小分子后的腫細(xì)胞增殖情況，又比如某個(gè)科研小伙伴突發(fā)奇想，把細(xì)胞的某...

血管生成實(shí)驗(yàn)血管生成實(shí)驗(yàn)（DH0011）一、服務(wù)介紹應(yīng)用Matrigel模擬機(jī)體環(huán)境，上面接種**細(xì)胞，觀察血管生成情況。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期（工作日）DH0011-1血管生成咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?.客戶需提供生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞株及相關(guān)處理藥物2.實(shí)驗(yàn)前，客戶需告知具體的細(xì)胞處理方式及詳細(xì)要求。注：若有特殊處理的樣品，請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）。四、服務(wù)流程1：細(xì)胞培養(yǎng)2：細(xì)胞轉(zhuǎn)染或藥物處理3：鋪Matrigel膠4：接種細(xì)胞5：觀察血管生成情況五、提交給客戶結(jié)果1、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告2、細(xì)胞培養(yǎng)圖片3、血管生成圖片六、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明1.實(shí)驗(yàn)周期...

ng）=×片段堿基對(duì)數(shù)（單片段）；適片段用量（ng）=×片段堿基對(duì)數(shù)（多片段）。注1：?jiǎn)纹沃亟M反應(yīng)，若單個(gè)插入片段的長(zhǎng)度大于載體，則應(yīng)將載體與插入片段的計(jì)算公式互換；注2：?jiǎn)纹沃亟M反應(yīng)，若單個(gè)插入片段的長(zhǎng)度小于200bp，則插入片段應(yīng)使用5倍的用量；注3：多片段重組反應(yīng)，各個(gè)插入片段的用量應(yīng)不少于10ng，使用上述公式計(jì)算適使用量低于此值時(shí)，直接使用10ng；注4：若按上述公式計(jì)算出的線性化載體用量低于50ng或高于200ng，建議按50ng或200ng用量使用；注5：線性化載體過(guò)長(zhǎng)，插入片段過(guò)長(zhǎng)或片段數(shù)過(guò)多，克隆陽(yáng)性率均會(huì)降低。2、體系反應(yīng)；1、配制完成后，用移液器輕輕吸打混勻各...

這期上海東寰主要給大家講解一下幾種常見(jiàn)的流式檢測(cè)。歡迎大家的查閱！1、免疫細(xì)胞分型:隨著基因表達(dá)技術(shù)的誕生，新的單抗以及熒光素的獲得，同一樣本檢測(cè)多個(gè)marker（很常見(jiàn)的人外周血免疫細(xì)胞分型），或者多個(gè)參數(shù)確定目的細(xì)胞（如Treg細(xì)胞）通過(guò)多色流式得以實(shí)現(xiàn)?；诹魇郊?xì)胞術(shù)的多指標(biāo)高通量檢測(cè)特點(diǎn)，同樣也能實(shí)現(xiàn)對(duì)多種胞內(nèi)或胞外細(xì)胞因子的檢測(cè)，很大程度的節(jié)省樣本量，縮短人工操作時(shí)間，做到準(zhǔn)確定量分析。2、免疫功能檢測(cè)(胞內(nèi)細(xì)胞因子/胞外多因子檢測(cè))：細(xì)胞因子作為細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)的分子，主要介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)，通過(guò)調(diào)節(jié)免疫促進(jìn)與免疫壓制的動(dòng)態(tài)平衡，維持機(jī)體免疫系統(tǒng)的穩(wěn)定。檢測(cè)細(xì)胞因子...

3、培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度微生物生長(zhǎng)需要一定的濕度條件。濕度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響是通過(guò)影響微生物細(xì)胞內(nèi)水分活度進(jìn)而影響其新陳代謝來(lái)實(shí)現(xiàn)的。不同微生物的生長(zhǎng)對(duì)濕度有一定的要求，一般來(lái)說(shuō)，細(xì)菌為敏感，酵母和霉菌次之。降低濕度會(huì)使微生物的水分活度降低，從而減慢其生長(zhǎng)速度。因此，在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中，需要保持適宜的溫度和濕度，以有利于微生物的生長(zhǎng)。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度的來(lái)源主要有培養(yǎng)基的水分散失、濕度自動(dòng)調(diào)控系統(tǒng)以及培養(yǎng)箱所在的環(huán)境。因此，在使用培養(yǎng)箱的過(guò)程中，需要控制濕度，保持適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。4、培養(yǎng)物溢灑培養(yǎng)物溢灑是指含有生物危險(xiǎn)物質(zhì)的液體或固體物質(zhì)意外與包裝材料分離的過(guò)程。一旦發(fā)生生物危害物品的溢出，尤其...

使每條染色體的著絲點(diǎn)排列在細(xì)胞中間的一個(gè)平面上。這個(gè)平面與紡錘體的中軸相垂直，類似于地球上赤道的位置，所以叫做赤道板。分裂中期的細(xì)胞，染色體的形態(tài)比較固定，數(shù)目比較清晰，便于觀察清楚。后期細(xì)胞分裂的后期，每一個(gè)著絲點(diǎn)分裂成兩個(gè)，原來(lái)連接在同一個(gè)著絲點(diǎn)上的兩條姐妹染色單體也隨著分離開(kāi)來(lái)，成為兩條子染色體。紡錘絲牽引著子染色體分別向細(xì)胞的兩極，使細(xì)胞的兩極各有一套染色體。這兩套染色體的形態(tài)和數(shù)目是完全相同的，每一套染色體與分裂以前的親代細(xì)胞中的染色體的形態(tài)和數(shù)目是相同的。末期當(dāng)這兩套染色體別到達(dá)細(xì)胞的兩極以后，每條染色體的形態(tài)發(fā)生變化，又逐漸變成細(xì)長(zhǎng)而盤曲的絲。同時(shí)，紡錘絲逐漸消失，出現(xiàn)新...

如發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)、組織愈合等。此外，外泌體與疾病的研究表明：外泌體可能在代謝性疾病的出現(xiàn)以及心血管健康中發(fā)揮作用。外泌體生物發(fā)生和神經(jīng)元細(xì)胞中分泌小泡的調(diào)節(jié)之間的交集為外泌體和神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制之間假定的聯(lián)系提供了新的見(jiàn)解。與研究外泌體在其他疾病中的作用相比，外泌體在中的研究進(jìn)展迅速，而且外泌體與的幾個(gè)主要特征有關(guān)。外泌體影響生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移、綜合征和耐藥性。外泌體在進(jìn)展中的作用可能是動(dòng)態(tài)的，并且與的類型、遺傳學(xué)和分期有關(guān)。外泌體的應(yīng)用外泌體用于免疫基于免疫細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠介導(dǎo)和調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)的免疫反應(yīng)，外泌體在免疫方面的潛力受到關(guān)注。其中樹枝狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體包含大量...

整體課題實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)服務(wù)（DH0029）一、服務(wù)介紹東寰生物不*擁有經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，為您提供專業(yè)技術(shù)咨詢，根據(jù)您的“實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、“研究方向”，結(jié)合分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、蛋白免疫學(xué)，免疫學(xué)，微生物學(xué)為您量身設(shè)計(jì)切實(shí)可行的實(shí)驗(yàn)方案。而且東寰售后團(tuán)隊(duì)為您及時(shí)解決對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)過(guò)程、結(jié)果分析的各種疑問(wèn)，為您書寫SCI文章提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。歡迎您來(lái)電咨詢。二、服務(wù)內(nèi)容1.科研課題整體設(shè)計(jì)2.預(yù)實(shí)驗(yàn)3.實(shí)驗(yàn)正式開(kāi)展4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析處理5.提交客戶三、客戶提供1.客戶提供課題思路四、我們提供1.預(yù)實(shí)驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)和結(jié)果2.正式實(shí)驗(yàn)報(bào)告及相關(guān)數(shù)據(jù)3.數(shù)據(jù)分析及結(jié)果處理數(shù)據(jù)五、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明1.實(shí)驗(yàn)周期：具...

免疫熒光技術(shù)服務(wù)免疫熒光技術(shù)服務(wù)（DH0014）一、服務(wù)介紹免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記，標(biāo)記的抗原或標(biāo)記的抗體與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后，測(cè)定復(fù)合物中的熒光素，這種免疫技術(shù)稱為免疫熒光素技術(shù)。免疫熒光細(xì)胞化學(xué)分直接法、夾心法、間接法和補(bǔ)體法。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期（工作日）DH0014-01免疫熒光單標(biāo)記檢測(cè)咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標(biāo)記檢測(cè)咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?、細(xì)胞株或細(xì)胞爬片。注：細(xì)胞爬片不宜太密；2、熒光檢測(cè)所用的抗體3、...

一、實(shí)驗(yàn)原理將Transwell小室放入配套培養(yǎng)板中，形成由細(xì)胞可穿透性膜分隔開(kāi)的兩室系統(tǒng)，并將高營(yíng)養(yǎng)液與低營(yíng)養(yǎng)液分隔開(kāi)，為進(jìn)行侵襲實(shí)驗(yàn)，在膜上室鋪基質(zhì)膠（用由細(xì)胞外基質(zhì)組成的凝膠堵塞膜中的孔，該凝膠旨在模擬細(xì)胞在體內(nèi)侵襲過(guò)程中遇到的典型基質(zhì)），通過(guò)將細(xì)胞放置在凝膠的一側(cè)，將趨化劑放置在凝膠的另一側(cè)，侵襲細(xì)胞將降解鄰近基質(zhì)并遷移通過(guò)ECM凝膠（基質(zhì)降解與定向運(yùn)動(dòng)相結(jié)合，即侵襲），從而通過(guò)計(jì)數(shù)穿過(guò)細(xì)胞以檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力。由于Matrigel膠內(nèi)含有層黏連蛋白、Ⅳ型膠原、纖連蛋白、硫酸肝素糖蛋白、觸角蛋白、TGF2β及生長(zhǎng)因子等人體ECM的大多數(shù)成分，類似動(dòng)物的基底膜。因此，可模擬真實(shí)的體...

細(xì)胞周期和凋亡技術(shù)服務(wù)（DH0003）一、服務(wù)介紹細(xì)胞周期（CellCycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開(kāi)始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過(guò)程，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時(shí)離開(kāi)細(xì)胞周期，停止細(xì)胞分裂，執(zhí)行一定生物學(xué)功能（G0期）。細(xì)胞凋亡（Cellapoptosis）是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過(guò)程，而是主動(dòng)過(guò)程，它涉及一系列基因的**、表達(dá)以及調(diào)控等的作...

防止有Matrigel流經(jīng)上孔而留下殘留膠；3、需要按照細(xì)胞的生長(zhǎng)速度定時(shí)采集圖像，并且對(duì)其成管長(zhǎng)度、覆蓋面積、成環(huán)數(shù)和結(jié)點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量和記錄，并且對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；4、分上下孔的ibidi血管生成載玻片能去除凹液面，使成像效果更好。（Matrigel鋪在下孔，細(xì)胞鋪在Matrigel上，上孔充滿培養(yǎng)基）2、數(shù)據(jù)分析（在特定的時(shí)間點(diǎn)采集圖片，并且進(jìn)行圖像分析（Wimasis全自動(dòng)分析）測(cè)量小管長(zhǎng)度，成環(huán)數(shù)，細(xì)胞覆蓋面積和結(jié)點(diǎn)。之后在對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析以說(shuō)明實(shí)驗(yàn)結(jié)果。）三、實(shí)驗(yàn)具體步驟1、準(zhǔn)備基質(zhì)膠1）實(shí)驗(yàn)前一天將Matrigel置于冰盒中，放入4度冰箱，使膠能過(guò)夜緩慢融化。（注意：同樣...

也可以挑去單克隆細(xì)胞株進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)，以得到滿意的穩(wěn)定表達(dá)目的基因的細(xì)胞株。6)使用qRT-PCR和Westernblot的方法檢測(cè)目的基因的表達(dá)量和蛋白水平是否顯著提高。7)由此可得三組細(xì)胞株：a.正常細(xì)胞株；b.空載病毒載體的細(xì)胞株；c.過(guò)表達(dá)目的基因的病毒載體的細(xì)胞。8)在后續(xù)培養(yǎng)傳代該穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株時(shí)，培養(yǎng)基中需添加低濃度Puromycin做壓力篩選條件。注意事項(xiàng)1.為避免慢病毒后細(xì)胞死亡，務(wù)必保證原始細(xì)胞無(wú)支原體污染。2.查閱壓力篩選條件在目標(biāo)細(xì)胞系中穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選的致死用量信息。3.查閱文獻(xiàn)確定慢病毒在目標(biāo)細(xì)胞系中的滴度。4.轉(zhuǎn)染后可以進(jìn)一步進(jìn)行單克隆穩(wěn)轉(zhuǎn)株培養(yǎng)，可采用稀釋法和培養(yǎng)...

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，深入探討和研究人類各種疾病的發(fā)病機(jī)制及康復(fù)機(jī)制，單純以人本身作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象是困難的，而且時(shí)間和空間上也存在著局限性，而動(dòng)物模型克服了這些缺點(diǎn)和不足，可以作為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和臨床設(shè)計(jì)的試驗(yàn)基礎(chǔ)。動(dòng)物疾病模型主要用于實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)學(xué)（包括新藥篩選）研究。有以下三種不同的分類方式。按產(chǎn)生原因分類：自發(fā)性動(dòng)物模型，是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處置，在自然情況下所發(fā)生的疾病。包括突變系的遺傳疾病和近交系的疾病模型。誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型，實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物模型是指研究者通過(guò)使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動(dòng)物，造成動(dòng)物組織或全身一定的損害，出現(xiàn)某些類似人類疾病時(shí)...

細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一，是生物體的重要生命特征。細(xì)胞增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。真核生物的分裂依據(jù)過(guò)程不同有三種方式，有有絲分裂，無(wú)絲分裂，減數(shù)分裂。上海東寰為您分享有絲分裂的周期變化。有絲分裂的周期變化細(xì)胞分裂期在細(xì)胞分裂期，很明顯變化是細(xì)胞核中染色體的變化。人們?yōu)榱搜芯糠奖悖逊至哑诜譃樗膫€(gè)時(shí)期：前期，中期，后期，末期。其實(shí)，分裂期的各個(gè)時(shí)期的變化是連續(xù)的，并沒(méi)有嚴(yán)格的時(shí)期界限。前期細(xì)胞分裂的前期，很明顯的變化是細(xì)胞核中出現(xiàn)染色體。分裂間期復(fù)制的染色體，由于螺旋纏繞在一起，逐漸縮短變粗，形態(tài)越來(lái)越清楚。在光學(xué)顯微鏡下觀察這個(gè)時(shí)期的細(xì)胞,可以看到每一條染...

細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)服務(wù)（DH0013）一、服務(wù)介紹1)無(wú)菌條件下，將DiI-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至25-50μg/ml。2)加入活細(xì)胞內(nèi)，37℃培養(yǎng)4-5小時(shí)。3)孵育結(jié)束，吸去含有HumanDiI-LDL的培養(yǎng)基，并用無(wú)探針的培養(yǎng)基洗幾次。4)細(xì)胞固定5)熒光顯微鏡拍照二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期（工作日）DH0013細(xì)胞內(nèi)吞檢測(cè)服務(wù)（DIL-Ac-LDL）咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?.符合實(shí)驗(yàn)要求的細(xì)胞藥品（包括說(shuō)明書）（可代為購(gòu)買）,若無(wú)任何說(shuō)明，默認(rèn)由本公司提供。四、提交給客戶結(jié)果1、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告一份，包括實(shí)驗(yàn)流程、數(shù)據(jù)和圖片等2、結(jié)果分析報(bào)告五、服務(wù)項(xiàng)...

使每條染色體的著絲點(diǎn)排列在細(xì)胞中間的一個(gè)平面上。這個(gè)平面與紡錘體的中軸相垂直，類似于地球上赤道的位置，所以叫做赤道板。分裂中期的細(xì)胞，染色體的形態(tài)比較固定，數(shù)目比較清晰，便于觀察清楚。后期細(xì)胞分裂的后期，每一個(gè)著絲點(diǎn)分裂成兩個(gè)，原來(lái)連接在同一個(gè)著絲點(diǎn)上的兩條姐妹染色單體也隨著分離開(kāi)來(lái)，成為兩條子染色體。紡錘絲牽引著子染色體分別向細(xì)胞的兩極，使細(xì)胞的兩極各有一套染色體。這兩套染色體的形態(tài)和數(shù)目是完全相同的，每一套染色體與分裂以前的親代細(xì)胞中的染色體的形態(tài)和數(shù)目是相同的。末期當(dāng)這兩套染色體別到達(dá)細(xì)胞的兩極以后，每條染色體的形態(tài)發(fā)生變化，又逐漸變成細(xì)長(zhǎng)而盤曲的絲。同時(shí)，紡錘絲逐漸消失，出現(xiàn)新...

具體選用何種培養(yǎng)器皿取決于細(xì)胞生長(zhǎng)密度需求（啟動(dòng)正常生長(zhǎng)所需的密度）。二.細(xì)胞換液培養(yǎng)1、全量換液：把所有的舊培養(yǎng)液移除，加入新的培養(yǎng)液（加入培養(yǎng)基的量根據(jù)細(xì)胞的密度和生長(zhǎng)速度）；2、半量換液：把舊培養(yǎng)液移至15ml離心管中，然后在培養(yǎng)器皿中加入適量新培養(yǎng)基（避免細(xì)胞離開(kāi)培養(yǎng)液太久），把裝有舊培養(yǎng)液的離心管進(jìn)行離心（1000RPM,10min），離心后取適量舊培養(yǎng)上清至培養(yǎng)器皿中。注意事項(xiàng)1.全量換液適合于生長(zhǎng)較快的腫瘤細(xì)胞，因?yàn)檫@些細(xì)胞可在短期內(nèi)分泌足夠的因子來(lái)支撐其生長(zhǎng)；2.半量換液主要適合于生長(zhǎng)較慢的原代細(xì)胞和干細(xì)胞，這些細(xì)胞很難在短期內(nèi)分泌足夠的因子來(lái)支撐其生長(zhǎng)，舊培養(yǎng)液中恰好...

EdU細(xì)胞増殖檢測(cè)試劑盒(紅色熒光)使用說(shuō)明產(chǎn)品簡(jiǎn)介細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物，其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn)，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中，通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣...

免疫沉淀（IP/ChIP）免疫沉淀（IP/ChIP）技術(shù)服務(wù)(DH1005)一.服務(wù)內(nèi)容1、蛋白提取及沉淀處理：從人或動(dòng)物細(xì)胞、組織，細(xì)胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量：對(duì)樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析。3、WesternBlot檢測(cè)（1）電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品。（2）濕法轉(zhuǎn)印。（3）雜交：用抗體鑒定膜上的特定蛋白。（4）顯色：ECL熒光顯色，黑條帶白背景照片4、進(jìn)行蛋白內(nèi)參檢測(cè)（所有內(nèi)參抗體均不收取費(fèi)用）。5、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)。二.樣品要求1、細(xì)胞＞1×10^7；組織＞30mg；細(xì)菌濕重＞1mg等。2、樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣...

所以可以用于研究藥物對(duì)急性胰腺炎的影響。大鼠卵巢切除（OVX模型）大鼠卵巢切除術(shù)是對(duì)人類絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的模擬。為了構(gòu)建大鼠的動(dòng)物中老年骨質(zhì)疏松模型，亦是使用很普遍且研究很多的實(shí)驗(yàn)用骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型。大鼠進(jìn)入動(dòng)物房后飼養(yǎng)一周讓其適應(yīng)環(huán)境后再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，麻醉，備皮，從大鼠側(cè)背部開(kāi)口找到卵巢，結(jié)扎子宮，切除卵巢層層縫合即可。大鼠前交叉韌帶切除造骨關(guān)節(jié)炎模型（OA模型）骨關(guān)節(jié)炎是一種慢性，漸進(jìn)性，退行性關(guān)節(jié)病變，是臨床上很常見(jiàn)的關(guān)節(jié)疾病。而切除前交叉韌帶的方式可以為進(jìn)行骨關(guān)節(jié)炎防治提供理論依據(jù)。大鼠進(jìn)入動(dòng)物房后飼養(yǎng)一周讓其適應(yīng)環(huán)境再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。麻醉，備皮，沿著膝蓋側(cè)部開(kāi)口，打開(kāi)關(guān)節(jié)腔，剪斷前交叉...

為了減少擴(kuò)增突變的引入，推薦使用高保真PCRMix進(jìn)行擴(kuò)增，推薦使用預(yù)線性化的質(zhì)粒作為模板，以減少環(huán)狀質(zhì)粒模板殘留對(duì)克隆陽(yáng)性率的影響。注意：以環(huán)狀質(zhì)粒為模板時(shí)，PCR產(chǎn)物需要使用DpnI等甲基化敏感型限制性內(nèi)切酶對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行處理，或?qū)Ξa(chǎn)物進(jìn)行膠回收純化。2.插入片段制備引物設(shè)計(jì)原則：通常使用PCR擴(kuò)增的方法來(lái)獲得目的片段，PCR引物的5'端必須包含與其相鄰片段（插入片段或載體）末端同源的15~25nt（推薦18nt）序列,以保證擴(kuò)增產(chǎn)物的5'端和3'端分別與相鄰片段形成重疊序列。目的片段PCR引物包括：載體與插入片段連接處引物、插入片段與片段連接處引物。插入片段正向擴(kuò)增引物：5'—上...

隨著社會(huì)的發(fā)展，身體健康成為民生重點(diǎn)關(guān)注熱點(diǎn)，從人體上看疾病遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能確定病情的癥狀及疾病的醫(yī)療。所以我們可以通過(guò)動(dòng)物疾病模型，去實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)的理念。一些手術(shù)動(dòng)物模型可以讓我們更好地去觀察以及防治某些疾??；例如：大鼠1/2切腎，可模擬臨床單邊腎功能缺失疾病模型大鼠1/2切腎，可模擬臨床單邊腎功能缺失疾病模型。大鼠在進(jìn)入動(dòng)物房一周后，等其適應(yīng)環(huán)境再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。麻醉，備皮，側(cè)背部開(kāi)口，結(jié)扎腎蒂，剪除腎臟，若無(wú)出血即為手術(shù)成功；層層縫合等其蘇醒即可。1/2切除大鼠腎臟會(huì)在病程初期呈現(xiàn)出較強(qiáng)代償性作用，但代償性并不能滿足機(jī)體需要，后期腎臟依然會(huì)持續(xù)惡化，在防御與醫(yī)療過(guò)程中可采取相關(guān)措施，從而達(dá)到有效的...

基因克隆及載體構(gòu)建服務(wù)基因克隆及載體構(gòu)建服務(wù)（DH1001）一.服務(wù)內(nèi)容1、引物設(shè)計(jì)：客戶提供目的基因及相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）2、質(zhì)粒制備：由客戶提供或由我公司代為購(gòu)買。3、克隆載體：由客戶提供或由我公司代為購(gòu)買。4、基因亞克?。?)DNA定向克隆到新的載體，準(zhǔn)確度高。2)可完成5kb以上DNA長(zhǎng)片段的克隆.3)較個(gè)工作日即可完成二.樣品要求1、客戶需提供克隆基因信息及經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證的質(zhì)粒模板>5ul（）2、客戶需提供克隆載體2ug/個(gè)。3、非常用的限制性內(nèi)切酶5ul/個(gè)注：若有特殊處理的樣品，請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）。三.收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)...

流水線作業(yè)，這樣能節(jié)省時(shí)間，并且能保證樣品的質(zhì)量。如果請(qǐng)人，每個(gè)人需要負(fù)責(zé)哪一板塊的工作，比如誰(shuí)負(fù)責(zé)麻醉，誰(shuí)負(fù)責(zé)取血液，誰(shuí)負(fù)責(zé)取，誰(shuí)負(fù)責(zé)拍照、誰(shuí)負(fù)責(zé)儲(chǔ)存，都需要提前規(guī)劃交代清楚。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)如果是需要自己做的檢測(cè)，比如常見(jiàn)的WesternBlot、PCR，建議提前可以看看教程（無(wú)論是視頻還是貼吧，都要自己多方參考）。有了一定的理論基礎(chǔ)后，再向老師、師兄師姐學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)，如果實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的儀器需要提前預(yù)約，建議提前規(guī)劃好使用的時(shí)間。反復(fù)總結(jié)尋找答案在整個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)很多問(wèn)題。比如造模效果欠佳、灌胃操作不當(dāng)、腹腔注射操作失誤、物使用不當(dāng)?shù)纫饎?dòng)物死亡。每遇到問(wèn)題都需要自己想辦法解...

然后立即把細(xì)胞轉(zhuǎn)移至提前準(zhǔn)備的裝有5-10ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基的15ml離心管中；4、離心，小心移除上清；5、加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基，吹打重懸細(xì)胞，然后把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶中，并放入二氧化碳培養(yǎng)箱（5%CO2,37℃）中培養(yǎng)；6、第二天觀察細(xì)胞的貼壁情況，并進(jìn)行換液。注意事項(xiàng)細(xì)胞復(fù)蘇操作要求快速，否則細(xì)胞容易在凍融過(guò)程中產(chǎn)生冰晶，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡，所以必須提前準(zhǔn)備好所需的培養(yǎng)基、培養(yǎng)耗材和其他所需物品，不允許臨時(shí)準(zhǔn)備；2.在解凍細(xì)胞前，必須把超凈工作臺(tái)準(zhǔn)備至工作狀態(tài)，提前準(zhǔn)備裝有5-10ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基的15ml離心管；3.為了降低復(fù)溫對(duì)其它細(xì)胞的影響，可把該存儲(chǔ)架子放置...

原代細(xì)胞是指在機(jī)體或組織中直接從生物體分離出來(lái)的、未經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。這種細(xì)胞保持著其原始的生物學(xué)特性，具有高度的活性和分裂能力。原代細(xì)胞在許多生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位，包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發(fā)等。原代細(xì)胞的獲得通常是通過(guò)組織剪切、消化或酶解等方式從機(jī)體或組織中分離出來(lái)。這些細(xì)胞脫離了它們?cè)谏矬w中的環(huán)境，但是仍然保持著其基本的生物學(xué)特性，包括細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞器以及其他重要的生物分子。原代細(xì)胞在未經(jīng)過(guò)傳代培養(yǎng)的情況下，保持著其原始的生物學(xué)特性，因此，它們常常被用于藥物篩選、毒理學(xué)研究等。同時(shí)，由于原代細(xì)胞具有高度活性和分裂能力，它們也被用于組織工程和再生醫(yī)學(xué)中，如...

原理過(guò)表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系（OverexpressionStableCellLines）的構(gòu)建利用慢病毒轉(zhuǎn)染、電轉(zhuǎn)等技術(shù)手段將特定的基因序列整合到宿主細(xì)胞的染色體上，使得目的基因能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期且穩(wěn)定的表達(dá)。用途基因功能研究、免疫/殺傷/增殖等、抗體藥物的活性篩選（細(xì)胞水平的結(jié)合和阻斷）、CAR分子的殺傷活性評(píng)價(jià)。材料與儀器（以慢病毒pMSCV載體為例）包含目的基因和eGFP-Tag的pMSCV質(zhì)粒、帶有eGFP-Tag的pMSCV空載質(zhì)粒、GAG質(zhì)粒、VSV質(zhì)粒、Puromycin、Polybrene、Lipo3000、HEK293T細(xì)胞、opti-MEM、DMEM、FBS、雙抗、μm...

ELISA檢測(cè)技術(shù)服務(wù)ELISA檢測(cè)技術(shù)服務(wù)（DH1006）一、服務(wù)介紹ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗原分子共價(jià)結(jié)合，此種結(jié)合不會(huì)改變抗體的免疫學(xué)特性，也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無(wú)色的還原型變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因此，可通過(guò)底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過(guò)ELISA檢測(cè)儀進(jìn)行定量測(cè)定，這樣將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來(lái)，使ELISA方法成為一種既特異又敏感的檢測(cè)方...

用一次定量放血法可擺分之?dāng)[造成出血性休克，擺分之?dāng)[死亡，這就符合可重復(fù)性和達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)化要求。(三)可靠性復(fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)該力求可靠地反映人類疾病，即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種功能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，經(jīng)化驗(yàn)或X線照片、心電圖、病理切片等證實(shí)。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動(dòng)物，就不應(yīng)加以選用，易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。(四)適用性和可控性供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究用的動(dòng)物模型，在復(fù)制時(shí)，應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究的開(kāi)展。(五)易行性和經(jīng)濟(jì)性在復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)，所采用的方法應(yīng)盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)條件原則。以上就是上...