Cy5.5 熒光定量 PCR 儀通過優(yōu)化光學(xué)系統(tǒng)和反應(yīng)體系,將檢測限降至 10 拷貝 /μL,其重要技術(shù)包括高數(shù)值孔徑(NA=0.8)的物鏡設(shè)計、低噪聲的制冷 CCD 檢測器(-20℃)以及高特異性的熱啟動 Taq 酶(酶活性抑制率 > 99% at 4℃)。在臨床體液樣本(如腦脊液、胸腹水)中微量病原體核酸檢測中,該儀器可有效檢測出低濃度的病毒或細(xì)菌核酸,例如在結(jié)核分枝桿菌(MTB)檢測中,傳統(tǒng) PCR 儀需靶標(biāo)濃度 > 100 拷貝 /μL 才能檢出,而該儀器可檢測到 10 拷貝 /μL 的 MTB 核酸,顯著提高了結(jié)核病的早期診斷率。此外,該儀器搭配的 Cy5.5 標(biāo)記探針具有莖環(huán)結(jié)構(gòu),...
VIC 熒光定量 PCR 儀通過兼容 VIC/FAM 雙熒光通道,構(gòu)建了高效的單核苷酸多態(tài)性(SNP)分型系統(tǒng),可同步檢測同一靶基因的兩個等位基因位點。該儀器的雙通道光學(xué)系統(tǒng)采用的激發(fā)光源(VIC:538nm,F(xiàn)AM:494nm)和檢測通道,熒光信號采集互不干擾,可在同一反應(yīng)體系中加入兩種探針(VIC 標(biāo)記野生型位點、FAM 標(biāo)記突變型位點),通過兩種熒光信號的強(qiáng)度對比實現(xiàn) SNP 分型。在臨床藥物基因組學(xué)檢測中,例如華法林用藥劑量指導(dǎo)的 VKORC1 基因 SNP 分型,該儀器可快速區(qū)分 VKORC1 基因的 G/A 等位基因,根據(jù)分型結(jié)果確定患者的比較好用藥劑量,避免因基因型差異導(dǎo)致的出血...
多重?zé)晒舛?PCR:在同一反應(yīng)體系中同時檢測多個目標(biāo)基因時,VIC 熒光染料可與其他不同發(fā)射波長的熒光染料(如 FAM、ROX 等)組合使用。由于 VIC 的光譜特性與其他染料有較好的區(qū)分度,能避免熒光信號之間的相互干擾,從而實現(xiàn)對多個不同目標(biāo)基因的同時定量分析。例如,在疾病診斷中,可同時檢測多個與疾病相關(guān)的基因標(biāo)志物,提高診斷的準(zhǔn)確性和全面性。SNP 基因分型:在單核苷酸多態(tài)性(SNP)檢測中,通過設(shè)計特定的引物和探針,利用 VIC 熒光染料標(biāo)記不同等位基因的探針。在 PCR 反應(yīng)過程中,根據(jù)不同等位基因與探針的特異性結(jié)合,產(chǎn)生不同的熒光信號,從而實現(xiàn)對 SNP 位點的分型。這種方法具有較...
HEX 熒光定量 PCR 儀在信號采集效率上具備明顯優(yōu)勢,其光學(xué)檢測模塊采用高速信號采集芯片,可實現(xiàn)每循環(huán) 0.1 秒內(nèi)完成 HEX 熒光信號的捕獲與轉(zhuǎn)換,同時同步輸出擴(kuò)增曲線與實時熒光強(qiáng)度數(shù)據(jù)。這種快速采集設(shè)計的重要價值在于:一是縮短整體檢測時間,例如在 96 孔板檢測中,單輪擴(kuò)增(40 個循環(huán))的信號采集總耗時可減少 5-8 分鐘,提升實驗室 throughput;二是捕捉瞬時熒光變化,在擴(kuò)增早期( 個循環(huán)),靶標(biāo)濃度低、熒光信號弱,快速采集可避免信號遺漏,提升低豐度靶標(biāo)的檢出率;三是數(shù)據(jù)實時同步,擴(kuò)增曲線與熒光數(shù)據(jù)同步傳輸至軟件,用戶可實時觀察擴(kuò)增趨勢,及時發(fā)現(xiàn)異常(如擴(kuò)增停滯、信號驟降...
TET 熒光定量 PCR 儀針對基因組 DNA 甲基化檢測的特殊性,開發(fā)了支持 TET 標(biāo)記甲基化特異性探針的檢測系統(tǒng),其重要原理是通過亞硫酸氫鹽處理將未甲基化的胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)化為尿嘧啶(U),而甲基化的 C 保持不變,再利用 TET 標(biāo)記的特異性探針(結(jié)合甲基化 C 位點)檢測靶標(biāo)區(qū)域。該儀器通過熒光信號差值分析(處理后樣本與未處理樣本的熒光信號差),可精細(xì)量化甲基化水平(0-100%),解決了傳統(tǒng)甲基化檢測中定性或半定量的局限性。在表觀遺傳學(xué)研究中,例如乳腺中 BRCA1 基因啟動子區(qū)甲基化檢測,該儀器可檢測到低至 5% 的甲基化水平變化,為發(fā)生機(jī)制研究提供精細(xì)數(shù)據(jù)。此外,該儀器配套的甲基...
熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點,被廣泛應(yīng)用于多個行業(yè),以下是一些主要的應(yīng)用行業(yè):醫(yī)療診斷行業(yè)傳染病檢測:可對多種傳染病病原體進(jìn)行檢測和定量分析,如、乙肝病毒、丙肝病毒、病毒等,幫助醫(yī)生及時準(zhǔn)確地診斷疾病,監(jiān)測病情發(fā)展,以及評估效果。遺傳病診斷:通過檢測特定基因的突變或拷貝數(shù)變化,診斷遺傳性疾病,如囊性纖維化、血友病、地中海貧血等,為遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷提供依據(jù)。診斷與監(jiān)測:一方面,可檢測相關(guān)基因的突變、甲基化狀態(tài)或基因表達(dá)水平的變化,輔助的早期診斷和預(yù)后評估;另一方面,在過程中,通過監(jiān)測腫瘤細(xì)胞中特定基因的變化,評估效果,及時發(fā)現(xiàn)的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。TET 熒光定量 PCR 儀...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測模塊通過光學(xué)系統(tǒng)的精細(xì)設(shè)計,明顯降低非特異性干擾,保障微量樣本檢測的準(zhǔn)確性。該模塊的重要優(yōu)化包括三方面:一是采用激光聚焦技術(shù),將激發(fā)光精細(xì)聚焦于微量反應(yīng)體系(1-10μL),減少激發(fā)光散射導(dǎo)致的背景噪音;二是配備高特異性濾光片組,允許目標(biāo)熒光波長通過,屏蔽環(huán)境光與非特異性熒光(如引物二聚體熒光);三是采用光子計數(shù)技術(shù),對微弱熒光信號進(jìn)行精細(xì)計數(shù),提升信號檢測的信噪比。此外,模塊還整合了溫度補償功能,避免微量反應(yīng)體系因溫度波動導(dǎo)致的熒光強(qiáng)度漂移。這些設(shè)計使設(shè)備在檢測納升級樣本時,仍能保持優(yōu)異的特異性與重復(fù)性 —— 例如在檢測腦脊液中的病毒核酸時,可有效排除體液中蛋白...
ROX通常并不指代一種特定的熒光定量PCR儀,而是一種熒光染料,在熒光定量PCR中常被用作被動參考染料。其作用是用于校正熒光信號,減少孔與孔之間由于加樣誤差、反應(yīng)體積差異、光學(xué)系統(tǒng)的微小變化以及蒸發(fā)等因素導(dǎo)致的熒光信號波動,提高實驗的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。在實時熒光定量PCR儀的使用中,很多儀器都可以兼容ROX染料進(jìn)行信號校正。例如,賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABI的7500、7900等型號的熒光定量PCR儀都支持ROX染料。不同的熒光定量PCR儀在檢測通道、光學(xué)系統(tǒng)、熱循環(huán)性能等方面存在差異,但只要其具備相應(yīng)的熒光檢測通道,能夠檢測ROX染料的熒光信號,并在軟件中支持以ROX信號作為...
熒光定量 PCR 儀的自動化功能是實驗室高效運轉(zhuǎn)的關(guān)鍵支撐,其重要在于整合全流程自動化模塊,覆蓋從樣本加載到結(jié)果輸出的全環(huán)節(jié)。硬件上,設(shè)備配備自動進(jìn)樣器(可兼容 96 孔 / 384 孔反應(yīng)板),支持批量樣本自動裝載,無需人工逐孔添加;樣本條碼識別系統(tǒng)可關(guān)聯(lián)樣本信息與檢測數(shù)據(jù),避免樣本混淆;反應(yīng)結(jié)束后,嵌入式軟件自動完成數(shù)據(jù)分析、結(jié)果判讀,并生成標(biāo)準(zhǔn)化報告,可直接導(dǎo)出至實驗室信息系統(tǒng)(LIS)。自動化設(shè)計的優(yōu)勢明顯:一是減少人為操作誤差(如加樣偏差、數(shù)據(jù)記錄錯誤),提升結(jié)果重復(fù)性;二是解放人力,單臺設(shè)備可同時處理多批次樣本,在大規(guī)模核酸篩查、臨床批量檢測場景中,能將日均檢測量提升 3-5 倍;...
JOE 熒光定量 PCR 儀以 548nm 為特征發(fā)射波長,該波長可避開植物樣本中葉綠素(主要吸收 400-500nm 藍(lán)光)和類胡蘿卜素(吸收 450-550nm 綠光)的熒光干擾峰,解決了傳統(tǒng) PCR 儀在植物樣本檢測中背景信號過高的問題。其適配的植物病毒檢測 JOE 探針,針對植物病毒基因組的保守區(qū)域設(shè)計,具有高特異性,可有效區(qū)分同源性高達(dá) 95% 的不同病毒株系。例如在番茄黃化曲葉病毒(TYLCV)檢測中,該儀器可通過檢測番茄葉片提取的核酸樣本,在含有大量葉綠素的情況下,仍能精細(xì)捕捉到 JOE 探針的熒光信號,檢測靈敏度可達(dá) 100 拷貝 /μL,且無假陽性結(jié)果。此外,該儀器針對植物樣...
熒光定量 PCR 儀的自動化功能是實驗室高效運轉(zhuǎn)的關(guān)鍵支撐,其重要在于整合全流程自動化模塊,覆蓋從樣本加載到結(jié)果輸出的全環(huán)節(jié)。硬件上,設(shè)備配備自動進(jìn)樣器(可兼容 96 孔 / 384 孔反應(yīng)板),支持批量樣本自動裝載,無需人工逐孔添加;樣本條碼識別系統(tǒng)可關(guān)聯(lián)樣本信息與檢測數(shù)據(jù),避免樣本混淆;反應(yīng)結(jié)束后,嵌入式軟件自動完成數(shù)據(jù)分析、結(jié)果判讀,并生成標(biāo)準(zhǔn)化報告,可直接導(dǎo)出至實驗室信息系統(tǒng)(LIS)。自動化設(shè)計的優(yōu)勢明顯:一是減少人為操作誤差(如加樣偏差、數(shù)據(jù)記錄錯誤),提升結(jié)果重復(fù)性;二是解放人力,單臺設(shè)備可同時處理多批次樣本,在大規(guī)模核酸篩查、臨床批量檢測場景中,能將日均檢測量提升 3-5 倍;...
熒光定量 PCR 儀的檢測結(jié)果會受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實驗操作等方面,。加樣準(zhǔn)確性:在配制反應(yīng)體系和加樣過程中,移液器的使用不準(zhǔn)確會導(dǎo)致試劑和樣本的加入量出現(xiàn)偏差。例如,加樣量過多或過少都會影響反應(yīng)體系中各成分的濃度,進(jìn)而影響擴(kuò)增效率和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。反應(yīng)體系配制:反應(yīng)體系中各成分的比例要準(zhǔn)確配制。如果引物、探針、酶、dNTP 等成分的濃度過高或過低,都會影響 PCR 反應(yīng)的特異性和效率,導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。此外,反應(yīng)體系中若存在氣泡,可能會影響熱傳遞和熒光信號的檢測。實驗環(huán)境:實驗環(huán)境的溫度、濕度等條件也會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響。例如,環(huán)境溫度過高或過低可能影...
熒光標(biāo)記探針法原理:使用一種特異性的熒光標(biāo)記探針,它能與目標(biāo) DNA 序列雜交。探針的 5' 端標(biāo)記有熒光報告基團(tuán),3' 端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)。在游離狀態(tài)下,報告基團(tuán)發(fā)出的熒光會被淬滅基團(tuán)吸收,無法檢測到熒光信號。當(dāng) PCR 反應(yīng)進(jìn)行時,DNA 聚合酶在延伸引物的過程中,會將探針?biāo)?,使報告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,報告基團(tuán)發(fā)出的熒光信號就可以被儀器檢測到。每擴(kuò)增一條 DNA 鏈,就會有一個探針被水解,釋放出一個熒光信號,熒光信號的強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量成正比。過程:在 PCR 反應(yīng)的退火階段,熒光標(biāo)記探針會與目標(biāo) DNA 序列特異性結(jié)合。在延伸階段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性...
FAM 熒光定量 PCR 儀以 FAM(羧基熒光素,發(fā)射波長 520nm)為重要熒光報告染料,常與 TaqMan 探針技術(shù)結(jié)合實現(xiàn)特異性檢測。其原理為:TaqMan 探針兩端分別標(biāo)記 FAM 報告染料與淬滅劑(如 TAMRA),未擴(kuò)增時淬滅劑抑制 FAM 熒光;PCR 擴(kuò)增中,Taq 酶的 5'-3' 外切酶活性切割與靶基因互補結(jié)合的探針,使 FAM 與淬滅劑分離并釋放熒光,熒光強(qiáng)度隨靶基因擴(kuò)增呈指數(shù)增長。該技術(shù)的重要優(yōu)勢是 “高特異性”—— 當(dāng)探針與靶基因序列完全互補時才會產(chǎn)生熒光,可有效避免引物二聚體等非特異性信號干擾。在病原體檢測領(lǐng)域應(yīng)用較廣,例如檢測中,針對 ORF1ab 基因設(shè)計 F...
實時熒光定量 PCR 儀在多個領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用,以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域:疾病診斷:可對病毒、細(xì)菌等病原體的核酸進(jìn)行檢測,如、病毒、結(jié)核桿菌等,實現(xiàn)疾病的早期診斷。例如,在期間,實時熒光定量 PCR 儀是檢測核酸的重要工具,通過檢測患者樣本中病毒的核酸量,判斷是否以及的程度。疾病監(jiān)測:對于一些慢性疾病,如、心血管疾病等,實時熒光定量 PCR 儀可監(jiān)測相關(guān)基因的變化,輔助醫(yī)生了解疾病的發(fā)展進(jìn)程、效果以及預(yù)測疾病的復(fù)發(fā)風(fēng)險。例如,通過檢測患者體內(nèi)特定基因突變的頻率和拷貝數(shù),評估的惡性程度和后的殘留情況。藥物研發(fā):在藥物研發(fā)過程中,可用于研究藥物對基因表達(dá)的影響,篩選具有潛在作用的藥物靶點。同時,...
熒光定量 PCR 儀的質(zhì)控模塊是確保檢測結(jié)果可靠的 “安全閥”,其功能是實時監(jiān)測擴(kuò)增過程中的關(guān)鍵參數(shù),及時識別異常并預(yù)警。該模塊通過三重質(zhì)控機(jī)制實現(xiàn):一是內(nèi)控基因監(jiān)測,在反應(yīng)體系中加入內(nèi)控基因(如人源 RNase P 基因),若內(nèi)控基因未出現(xiàn)正常擴(kuò)增曲線,提示樣本處理或反應(yīng)體系異常;二是擴(kuò)增效率分析,軟件自動計算每個樣本的擴(kuò)增效率(理想范圍 1.8-2.2),效率偏離閾值時觸發(fā)警報,避免因酶活性下降、引物失效導(dǎo)致的定量偏差;三是基線穩(wěn)定性監(jiān)測,實時分析擴(kuò)增-15 個循環(huán)的背景熒光,若基線波動超過閾值,提示環(huán)境光干擾或反應(yīng)管污染。在臨床檢測中,質(zhì)控模塊可有效避免假陰性 / 假陽性結(jié)果:例如乙肝病...
以下是一些判斷熒光定量 PCR 儀光路系統(tǒng)是否需要校準(zhǔn)的方法:熔解曲線異常峰形改變:熔解曲線的峰形變得不規(guī)則、寬化或出現(xiàn)多個峰,而樣品和實驗條件均無變化時,可能是光路系統(tǒng)對熒光信號的檢測精度下降,導(dǎo)致熔解曲線的分析結(jié)果不準(zhǔn)確,此時需要考慮對光路系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。Tm 值偏移:熔解曲線的 Tm 值(解鏈溫度)與預(yù)期值相比出現(xiàn)明顯偏移,且排除了引物設(shè)計、反應(yīng)條件等因素的影響,可能是光路系統(tǒng)的熒光檢測存在誤差,影響了對 DNA 雙鏈解鏈過程的準(zhǔn)確監(jiān)測,需要對光路進(jìn)行檢查和校準(zhǔn)。能夠準(zhǔn)確檢測食品中的轉(zhuǎn)基因成分,通過對轉(zhuǎn)基因作物中特定的基因序列進(jìn)行定量分析;南京VIC熒光定量PCR儀一般多少錢熒光定量 PC...
Cy5.5 熒光定量 PCR 儀通過優(yōu)化光學(xué)系統(tǒng)和反應(yīng)體系,將檢測限降至 10 拷貝 /μL,其重要技術(shù)包括高數(shù)值孔徑(NA=0.8)的物鏡設(shè)計、低噪聲的制冷 CCD 檢測器(-20℃)以及高特異性的熱啟動 Taq 酶(酶活性抑制率 > 99% at 4℃)。在臨床體液樣本(如腦脊液、胸腹水)中微量病原體核酸檢測中,該儀器可有效檢測出低濃度的病毒或細(xì)菌核酸,例如在結(jié)核分枝桿菌(MTB)檢測中,傳統(tǒng) PCR 儀需靶標(biāo)濃度 > 100 拷貝 /μL 才能檢出,而該儀器可檢測到 10 拷貝 /μL 的 MTB 核酸,顯著提高了結(jié)核病的早期診斷率。此外,該儀器搭配的 Cy5.5 標(biāo)記探針具有莖環(huán)結(jié)構(gòu),...
試劑兼容性:選擇與常用試劑品牌兼容性好的儀器,避免因試劑與儀器不匹配而導(dǎo)致實驗結(jié)果不穩(wěn)定或無法進(jìn)行。一些儀器廠家會提供配套的試劑,以保證實驗的比較好效果,如羅氏的熒光定量 PCR 儀與羅氏的 TaqMan 試劑配合使用,能發(fā)揮良好的性能。軟件功能:功能強(qiáng)大的軟件應(yīng)具備實時監(jiān)測、數(shù)據(jù)分析、結(jié)果可視化等功能,并且操作界面友好,易于上手。例如,儀器軟件能夠自動進(jìn)行基線校正、閾值設(shè)定,還能進(jìn)行基因表達(dá)差異分析、SNP 分型結(jié)果分析等。售后服務(wù):考慮儀器制造商的售后服務(wù)質(zhì)量,包括技術(shù)支持、維修保養(yǎng)、培訓(xùn)服務(wù)等。良好的售后服務(wù)可以幫助用戶解決在使用過程中遇到的問題,確保儀器的正常運行。熒光熒光定量 PCR...
定量熒光定量 PCR 儀的數(shù)據(jù)分析軟件是保障檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的 “重要大腦”,具備三大關(guān)鍵功能:一是 Ct 值自動計算,軟件通過算法識別熒光信號的基線期與指數(shù)增長期,自動設(shè)定閾值(通常為基線信號標(biāo)準(zhǔn)差的 10 倍),計算熒光信號達(dá)閾值時的循環(huán)數(shù)(Ct 值),避免手動設(shè)定閾值導(dǎo)致的主觀誤差;二是熔解曲線分析,PCR 擴(kuò)增結(jié)束后,儀器通過 0.1-1℃/s 的速率緩慢升溫,軟件實時記錄熒光信號變化,特異性擴(kuò)增產(chǎn)物會出現(xiàn)單一熔解峰(如 Tm 值 85℃左右),若出現(xiàn)多個峰則提示非特異性擴(kuò)增或污染,軟件可自動標(biāo)記可疑樣本;三是質(zhì)控管理,軟件可自動監(jiān)測陰性對照、陽性對照、內(nèi)參基因的 Ct 值,若對照樣本異...
VIC 熒光定量 PCR 儀內(nèi)置的 VIC 通道內(nèi)參校正系統(tǒng),通過在每個反應(yīng)體系中加入 VIC 標(biāo)記的內(nèi)參核酸(如管家基因或外源對照),可實時監(jiān)測 PCR 擴(kuò)增過程中的抑制因素(如樣本中的抑制劑、核酸提取效率差異),避免因擴(kuò)增效率不一致導(dǎo)致的定量誤差。在病原體耐藥基因檢測中,例如肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶耐藥基因(KPC)檢測,該儀器可同時檢測 VIC 標(biāo)記的內(nèi)參基因和 FAM 標(biāo)記的 KPC 基因,通過內(nèi)參信號校正 KPC 基因的熒光信號,實現(xiàn)耐藥基因的精細(xì)定量。臨床應(yīng)用中,該儀器可根據(jù) KPC 基因的拷貝數(shù)判斷細(xì)菌的耐藥程度,為臨床選擇提供依據(jù)。此外,該儀器支持內(nèi)參信號的自動校正算法,無需人工...
熒光定量 PCR 儀的檢測結(jié)果會受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實驗操作等方面,以下是具體介紹:樣本處理因素樣本采集:樣本采集的部位、時間和方法不當(dāng)都可能影響檢測結(jié)果。例如,采集的樣本量不足、未采集到病變部位的細(xì)胞,或者樣本被污染,都可能導(dǎo)致檢測到的目標(biāo)核酸含量不準(zhǔn)確,出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。核酸提取:核酸提取的質(zhì)量和效率直接關(guān)系到后續(xù)檢測。提取過程中若核酸被降解,會使模板量減少,導(dǎo)致定量結(jié)果偏低。此外,提取的核酸中若含有蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì),也會抑制 PCR 反應(yīng),影響擴(kuò)增效果和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。能夠準(zhǔn)確檢測食品中的轉(zhuǎn)基因成分,通過對轉(zhuǎn)基因作物中特定的基因序列進(jìn)行定量分...
熒光染料法原理:一些熒光染料(如 SYBR Green I)能特異性地結(jié)合到雙鏈 DNA 上。在 PCR 反應(yīng)體系中,隨著 DNA 擴(kuò)增產(chǎn)物的不斷增加,與雙鏈 DNA 結(jié)合的熒光染料也越來越多,熒光信號強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量呈正相關(guān)。通過檢測熒光信號的強(qiáng)度變化,就可以實時監(jiān)測 PCR 反應(yīng)的進(jìn)程。過程:在 PCR 反應(yīng)的每一個循環(huán)中,當(dāng)溫度降低到退火溫度時,引物與模板結(jié)合,DNA 聚合酶開始延伸引物,合成新的 DNA 鏈。此時,熒光染料會結(jié)合到新合成的雙鏈 DNA 上,儀器會在特定的時間點檢測熒光信號的強(qiáng)度。隨著循環(huán)次數(shù)的增加,熒光信號逐漸增強(qiáng),當(dāng)信號強(qiáng)度達(dá)到設(shè)定的閾值時,對應(yīng)的循環(huán)數(shù)被稱...
TET 熒光定量 PCR 儀針對基因組 DNA 甲基化檢測的特殊性,開發(fā)了支持 TET 標(biāo)記甲基化特異性探針的檢測系統(tǒng),其重要原理是通過亞硫酸氫鹽處理將未甲基化的胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)化為尿嘧啶(U),而甲基化的 C 保持不變,再利用 TET 標(biāo)記的特異性探針(結(jié)合甲基化 C 位點)檢測靶標(biāo)區(qū)域。該儀器通過熒光信號差值分析(處理后樣本與未處理樣本的熒光信號差),可精細(xì)量化甲基化水平(0-100%),解決了傳統(tǒng)甲基化檢測中定性或半定量的局限性。在表觀遺傳學(xué)研究中,例如乳腺中 BRCA1 基因啟動子區(qū)甲基化檢測,該儀器可檢測到低至 5% 的甲基化水平變化,為發(fā)生機(jī)制研究提供精細(xì)數(shù)據(jù)。此外,該儀器配套的甲基...
杭州柏恒熒光定量PCR儀Q9600Pro作為一款**PCR儀器,其配備了一塊,這一設(shè)計在實驗過程中起著至關(guān)重要的作用。通過實時監(jiān)控運行狀態(tài),用戶可以直觀地了解PCR實驗的進(jìn)展情況,保證實驗操作的準(zhǔn)確性和實驗數(shù)據(jù)的可靠性。,為用戶提供了更為清晰、直觀的實驗信息展示界面。在進(jìn)行PCR實驗的過程中,用戶可以通過顯示屏實時監(jiān)控儀器的運行狀態(tài)、反應(yīng)曲線、溫度曲線等關(guān)鍵數(shù)據(jù),了解實驗進(jìn)展情況,及時發(fā)現(xiàn)異常情況并采取相應(yīng)措施。這種即時的反饋和監(jiān)控功能,有助于用戶提前發(fā)現(xiàn)實驗中可能存在的問題,減少實驗失敗的可能性,保證實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。另外,,使得操作更加便捷、直觀。用戶可以通過觸摸屏或按...
Cy5.5 熒光定量 PCR 儀通過優(yōu)化光學(xué)系統(tǒng)和反應(yīng)體系,將檢測限降至 10 拷貝 /μL,其重要技術(shù)包括高數(shù)值孔徑(NA=0.8)的物鏡設(shè)計、低噪聲的制冷 CCD 檢測器(-20℃)以及高特異性的熱啟動 Taq 酶(酶活性抑制率 > 99% at 4℃)。在臨床體液樣本(如腦脊液、胸腹水)中微量病原體核酸檢測中,該儀器可有效檢測出低濃度的病毒或細(xì)菌核酸,例如在結(jié)核分枝桿菌(MTB)檢測中,傳統(tǒng) PCR 儀需靶標(biāo)濃度 > 100 拷貝 /μL 才能檢出,而該儀器可檢測到 10 拷貝 /μL 的 MTB 核酸,顯著提高了結(jié)核病的早期診斷率。此外,該儀器搭配的 Cy5.5 標(biāo)記探針具有莖環(huán)結(jié)構(gòu),...
杭州柏恒熒光定量PCR儀Q9600Pro作為一款先進(jìn)的PCR儀器,具備了溫度梯度功能,這為用戶提供了更為靈活和高效的實驗操作體驗。該PCR儀器一次可實現(xiàn)12列梯度溫度設(shè)置,為用戶提供了更多的實驗參數(shù)選擇和優(yōu)化方案,有助于提高PCR實驗的成功率和效率。溫度梯度功能是PCR實驗中常用的功能之一,通過在不同反應(yīng)管中設(shè)置不同的溫度梯度,可以同時進(jìn)行多組溫度優(yōu)化實驗,尋找**適合的反應(yīng)條件。杭州柏恒Q9600Pro提供了12列梯度溫度設(shè)置,用戶可以針對不同實驗需求選擇不同的溫度范圍和梯度配置,從而快速篩選出**佳的PCR反應(yīng)條件。這種高通量的梯度設(shè)置功能,顯著提高了實驗的效率和成功率,減少了...
熒光定量 PCR 儀憑借 “快速檢測” 特性,成為臨床病原體診斷的重要設(shè)備。其速度優(yōu)勢源于兩方面:一是快速溫控系統(tǒng),通過 Peltier 元件實現(xiàn)快速升降溫,將傳統(tǒng) PCR 的 2-3 小時擴(kuò)增時間縮短至 1 小時內(nèi);二是自動化樣本處理,配套的核酸提取儀可實現(xiàn) “樣本裂解 - 核酸純化” 自動化,與 PCR 儀聯(lián)動形成 “樣本進(jìn) - 結(jié)果出” 的一體化流程。在臨床場景中,該儀器可 1-2 小時內(nèi)完成從樣本處理到結(jié)果輸出的全流程,例如檢測:咽拭子樣本經(jīng) 30 分鐘核酸提取后,PCR 儀通過 40 個循環(huán)擴(kuò)增(約 1 小時),即可通過熒光信號判斷是否陽性,相比傳統(tǒng)病毒培養(yǎng)法(需 3-5 天)大幅縮...
熒光檢測靈敏度:靈敏度高的儀器能夠檢測到低拷貝數(shù)的核酸模板,對于微量樣本的檢測至關(guān)重要。例如,一些儀器的熒光檢測下限可達(dá)到幾個拷貝數(shù),適合于檢測罕見病原體或低表達(dá)基因。準(zhǔn)確性和重復(fù)性:儀器的熱循環(huán)精度和熒光信號檢測的準(zhǔn)確性直接影響實驗結(jié)果的可靠性。的儀器熱循環(huán)誤差應(yīng)控制在較小范圍內(nèi),熒光信號檢測的變異系數(shù)(CV)較低,確保每次實驗結(jié)果的一致性。動態(tài)范圍:寬動態(tài)范圍的儀器能夠準(zhǔn)確檢測不同濃度梯度的樣本,從低拷貝數(shù)到高拷貝數(shù)都能得到準(zhǔn)確的定量結(jié)果,避免因樣本濃度過高或過低而出現(xiàn)檢測誤差。熒光定量 PCR 儀檢測在臨床診斷中可快速鑒定病原體,從樣本處理到結(jié)果輸出通常可在 1-2 小時內(nèi)完成。南京JO...
熒光定量PCR儀的價格會受到市場供需關(guān)系的影響,具體如下:需求增加推動價格上漲:在期間,大量的核酸檢測需求使得熒光定量PCR儀的需求急劇增加。而生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)能提升需要一定時間,短期內(nèi)無法滿足市場的大量需求,導(dǎo)致市場上該儀器供不應(yīng)求,價格出現(xiàn)明顯上漲。需求減少導(dǎo)致價格下降:在某些地區(qū)或特定時期,如果科研項目減少、疾病檢測需求降低等,對熒光定量PCR儀的需求也會相應(yīng)減少。當(dāng)市場上的儀器供應(yīng)量相對過剩時,為了促進(jìn)銷售,廠商可能會通過降價等方式來吸引客戶,從而導(dǎo)致價格下降。供給變化影響價格:如果多家儀器制造商同時加大生產(chǎn)規(guī)模,市場上熒光定量PCR儀的供給量大幅增加,而需求沒有相應(yīng)增長,就會出現(xiàn)供大于求...