③末端標(biāo)記法（又叫尾標(biāo)）。利用末端轉(zhuǎn)移酶可進(jìn)行“尾標(biāo)”，尾標(biāo)適用于寡核苷酸探針標(biāo)記，寡核苷酸探針多用于核酸“點(diǎn)”突變的檢測(cè)，該探針可用核酸合成儀人工合成，克隆出的探針一般較長(zhǎng)，特異性好，標(biāo)記量大，雜交的檢出信號(hào)強(qiáng)。探針合成的注意事項(xiàng)①合成探針的長(zhǎng)短，一般在20~50個(gè)核苷酸之間。合成過(guò)長(zhǎng)成本高，且易出現(xiàn)聚合酶合成錯(cuò)誤，雜交時(shí)間長(zhǎng)，合成太短則特異性下降。②堿基組成G-C應(yīng)含40%~60%，一種堿基連續(xù)重復(fù)不超過(guò)4個(gè)，以免非特異性雜交產(chǎn)生。③探針自身序列內(nèi)應(yīng)無(wú)互補(bǔ)區(qū)域，以免產(chǎn)生“發(fā)夾”結(jié)構(gòu)，影響雜交?？傊?，一個(gè)好的探針**終要在實(shí)踐中才能加以確認(rèn)。電子探針和掃描電鏡在電子光學(xué)系統(tǒng)的構(gòu)造基本相同，它...

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對(duì)探針加以標(biāo)記，以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核...

電子探針儀（圖1）主要包括：探針形成系統(tǒng) (電子槍、加速和聚焦部件等)、X射線(xiàn)信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)和顯示、記錄系統(tǒng)、樣品室、高壓電源和掃描系統(tǒng)以及真空系統(tǒng)。電子探針的**早應(yīng)用領(lǐng)域是金屬學(xué)。對(duì)合金中各組成相、夾雜物等可作定性和定量分析，直觀而方便，還能較準(zhǔn)確地測(cè)定元素的擴(kuò)散和偏析情況。此外，它還可用于研究金屬材料的氧化和腐蝕問(wèn)題，測(cè)定薄膜、滲層或鍍層的厚度和成分等，是機(jī)械構(gòu)件失效分析、生產(chǎn)工藝的選擇、特殊用材的剖析等的重要手段。圖2為鎂合金中稀土氧化物在晶界析出的電子探針?lè)治稣掌呙桦娮犹结槂x是美國(guó)于1960年制成，不僅能對(duì)試樣作點(diǎn)或微區(qū)分析，而且能對(duì)樣品表面微區(qū)進(jìn)行掃描。松江區(qū)質(zhì)量探針現(xiàn)價(jià)X射線(xiàn)譜...

探針的標(biāo)記也可以采用隨機(jī)引物法，即向變性的探針溶液加入6個(gè)核苷酸的隨機(jī)DNA小片段，作為引物，當(dāng)后者與單鏈DNA互補(bǔ)結(jié)合后，按堿基互補(bǔ)原則不斷在其3’OH端添加同位素標(biāo)記的單核苷酸，這樣也可以獲得比放射性很高的DNA探針。DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板，人工合成的帶有放射性或生物素標(biāo)記的單鏈DNA片段，可用來(lái)快速檢測(cè)病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記后制成的探針?？膳c固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合，經(jīng)放射自顯影或其他檢測(cè)手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ有一個(gè)確定的波長(zhǎng)λ滿(mǎn)足...

基因探針，即核酸探針，是一段帶有檢測(cè)標(biāo)記，且順序已知的，與目的基因互補(bǔ)的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過(guò)分子雜交與目的基因結(jié)合，產(chǎn)生雜交信號(hào)，能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來(lái)。根據(jù)雜交原理，作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個(gè)條件：①應(yīng)是單鏈，若為雙鏈，必須先行變性處理。②應(yīng)帶有容易被檢測(cè)的標(biāo)記。它可以包括整個(gè)基因，也可以**是基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之轉(zhuǎn)錄而來(lái)的RNA。DNA探針根據(jù)其來(lái)源有3種：一種來(lái)自基因組中有關(guān)的基因本身，稱(chēng)為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄獲得了mRNA，再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到的探針，稱(chēng)為cDNA探針（cDN...

X射線(xiàn)譜儀能譜儀電子束轟擊樣品表面將產(chǎn)生特征X射線(xiàn)，不同的元素有不同的X射線(xiàn)特征波長(zhǎng)和能量。通過(guò)鑒別其特征波長(zhǎng)或特征能量就可以確定所分析的元素。利用特征波長(zhǎng)來(lái)確定元素的儀器叫做波長(zhǎng)色散譜儀（波譜儀），利用特征能量的就稱(chēng)為能量色散譜儀（能譜儀）。1、波譜儀波譜儀的關(guān)鍵在于怎樣實(shí)現(xiàn)將未知的特征譜線(xiàn)與已知元素Z聯(lián)系起來(lái)？為此設(shè)想有一種晶面間距為d的特定晶體（我們稱(chēng)為分光晶體），當(dāng)不同特征波長(zhǎng)λ的X射線(xiàn)照射其上時(shí)，如果滿(mǎn)足布拉格條件（2dsinθ=λ）將產(chǎn)生衍射。顯然，對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ*有一個(gè)確定的波長(zhǎng)λ滿(mǎn)足衍射條件。電子探針是運(yùn)用電子所形成的探測(cè)針（細(xì)電子束）作為X射線(xiàn)的激發(fā)源來(lái)進(jìn)行顯微X...

電子探針（Electron Probe Microanalysis）是一種利用電子束作用樣品后產(chǎn)生的特征X射線(xiàn)進(jìn)行微區(qū)成分分析的儀器， [1]可以用來(lái)分析薄片中礦物微區(qū)的化學(xué)組成。除H、He、Li、Be等幾個(gè)較輕元素外，還有U元素以后的元素以外都可進(jìn)行定性和定量分析。電子探針的大批量是利用經(jīng)過(guò)加速和聚焦的極窄的電子束為探針，激發(fā)試樣中某一微小區(qū)域，使其發(fā)出特征X射線(xiàn)，測(cè)定該X射線(xiàn)的波長(zhǎng)和強(qiáng)度，即可對(duì)該微區(qū)的元素作定性或定量分析。電子探針顯微分析原理及其發(fā)展的初期是建立在X射線(xiàn)光譜分析和電子顯微鏡這兩種技術(shù)基礎(chǔ)上的，該儀器實(shí)質(zhì)上就是這兩種儀器的科學(xué)組合。X射線(xiàn)譜儀。測(cè)量各種元素產(chǎn)生的X射線(xiàn)波長(zhǎng)和...

特異性探針有三種形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針。RNA探針用途很廣，也容易獲得，但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是，將特定的基因片段裝載到質(zhì)?；蚴删w中，經(jīng)過(guò)擴(kuò)增、酶切、純化等復(fù)雜的步驟，才能得到一定長(zhǎng)度的cDNA探針。這一過(guò)程比較復(fù)雜，有相應(yīng)條件的實(shí)驗(yàn)室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下，由核酸合成儀來(lái)完成，可廉價(jià)獲得大量的此類(lèi)探針。質(zhì)量也相對(duì)來(lái)說(shuō)更為穩(wěn)定。由于cDNA探針長(zhǎng)度通常為數(shù)百至數(shù)千個(gè)堿基，所以有良好的信號(hào)放大作用，但其滲透性比較差。寡核苷酸探針一般為十?dāng)?shù)個(gè)至數(shù)十個(gè)堿基，滲透性強(qiáng)，但信號(hào)放大作用則較差，合成的多相...

該系統(tǒng)為電子探針?lè)治鎏峁┚哂凶銐蚋叩娜肷淠芰浚銐虼蟮氖骱驮跇悠繁砻孓Z擊殿處束斑直徑近可能小的電子束，作為X射線(xiàn)的激發(fā)源。為此，一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個(gè)聚光鏡的結(jié)構(gòu)。 為了提高X射線(xiàn)的信號(hào)強(qiáng)度，電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流（在10-9-10-7A范圍），常用的加速電壓為10-30 KV，束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學(xué)顯微鏡。它的作用是選擇和確定分析點(diǎn)。其方法是，先利用能發(fā)出熒光的材料（如ZrO2）置于電子束轟擊下，這是就能觀察到電子束轟擊點(diǎn)的位置，通過(guò)樣品移動(dòng)裝置把它調(diào)到光學(xué)顯微鏡目鏡十字線(xiàn)交叉點(diǎn)上，這樣就能保證電子束正好...

探針是用于測(cè)試PCBA的一種測(cè)試針，表面鍍金，內(nèi)部有平均壽命3萬(wàn)~10萬(wàn)次的高性能彈簧。國(guó)外比較有名的生產(chǎn)廠家有： QA ,IDI、UC、Semiprobe、ECT，INGUN，BT探針的材質(zhì)：W，ReW,CU、 A+1.主要采用的材質(zhì)為W，ReW, 彈性一般，容易偏移，粘金屑，需要多次的清洗，磨損損針長(zhǎng)，壽命一般。2. A+材質(zhì)的免清針，這種材質(zhì)彈性較好，測(cè)試中不容易偏移，并且不粘金屑，免清洗，因此壽命較長(zhǎng)。探針?lè)诸?lèi)探針根據(jù)電子測(cè)試用途可分為：A、光電路板測(cè)試探針：未安裝元器件前的電路板測(cè)試和只開(kāi)路、短路檢測(cè)探針，國(guó)內(nèi)大部分的探針產(chǎn)品均可替代進(jìn)口產(chǎn)品；由分光晶體所分散的單一波長(zhǎng)X射線(xiàn)被X射線(xiàn)...

是將探針卡上的探針直接與芯片上的焊墊或凸塊直接接觸，引出芯片訊號(hào)，再配合周邊測(cè)試儀器與軟件控制達(dá)到自動(dòng)化量測(cè)的目的。探針卡應(yīng)用在IC尚未封裝前，針對(duì)裸晶系以探針做功能測(cè)試，篩選出不良品、再進(jìn)行之后的封裝工程。因此，探針卡是IC制造中對(duì)制造成本影響相當(dāng)大的重要制程之一。用戶(hù)危害2019年央視3·15晚會(huì)曝光了一種WiFi探針盒子，這種盒子能在用戶(hù)毫不知情的情況下，獲取用戶(hù)手機(jī)MAC地址，并將其轉(zhuǎn)換成用戶(hù)手機(jī)號(hào)。將近半年過(guò)去了，北京青年報(bào)記者調(diào)查發(fā)現(xiàn)，仍有一些商家在網(wǎng)絡(luò)商城中售賣(mài)此類(lèi)WiFi探針盒子，并均表示此類(lèi)盒子可以采集周邊用戶(hù)的手機(jī)號(hào)碼，用于“精細(xì)營(yíng)銷(xiāo)”。 [2]（1）電子光學(xué)系統(tǒng)。電子束直...

3 面分析用于測(cè)定某種元素的面分布情況。方法是將X射線(xiàn)譜儀固定在所要測(cè)量的某元素特征X射線(xiàn)信號(hào)的位置上，電子束在樣品表面做光柵掃描，此時(shí)在熒光屏上便可看到該元素的面分布圖像。顯像管的亮度由試樣給出的X射線(xiàn)強(qiáng)度調(diào)制。圖像中的亮區(qū)表示這種元素的含量較高。定量分析定量分析時(shí)，先測(cè)得試樣中Y元素的特征X射線(xiàn)強(qiáng)度IY，再在同一條件下測(cè)出已知純?cè)豗的標(biāo)準(zhǔn)試樣特征X射線(xiàn)強(qiáng)度IO。然后兩者分別扣除背底和計(jì)數(shù)器死時(shí)間對(duì)所測(cè)值的影響，得到相應(yīng)的強(qiáng)度值IY和IO，兩者相除得到X射線(xiàn)強(qiáng)度之比KY= IY / IO。 直接將測(cè)得的強(qiáng)度比KY當(dāng)作試樣中元素Y的重量濃度，其結(jié)果還有很大誤差，通常還需進(jìn)行三種效應(yīng)的修正。即...

為了制備cDNA 探針，首先需分離純化相應(yīng)mRNA，這從含有大量mRNA的組織、細(xì)胞中比較容易做到，如從造血細(xì)胞中制備α或β珠蛋白mRNA。有了mRNA作模板后，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，就可以合成與之互補(bǔ)的DNA(即cDNA)，cDNA與待測(cè)基因的編碼區(qū)有完全相同的堿基順序，但內(nèi)含子已在加工過(guò)程中切除。寡核苷酸探針是人工合成的，與已知基因DNA互補(bǔ)的，長(zhǎng)度可從十幾到幾十個(gè)核苷酸的片段。如*知蛋白質(zhì)的氨基酸順序量，也可以按氨基酸的密碼推導(dǎo)出核苷酸序列，并用化學(xué)方法合成。還能全自動(dòng)進(jìn)行批量（預(yù)置9999測(cè)試點(diǎn)）定量分析。崇明區(qū)品牌探針商家（1）電子光學(xué)系統(tǒng)。電子束直徑0.1～1μm，電子束穿透深度1～...

缺口平移法是**常用的探針標(biāo)記法，反應(yīng)體系的主要成分有DNA酶I（DNase I）、大腸桿菌DNA聚合酶I（DNA polymerase I）、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標(biāo)記的核苷酸（如dATP、dTTP、dCTP，”P(pán)—dGTP），其原理如圖1。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶I在探針DNA雙鏈分子上隨機(jī)切開(kāi)若干個(gè)缺口（不是切斷DNA或?qū)⑵浣到猓?，然后再借助于DNA聚合酶I的5 '→3'的外切酶活性，切去5’末端的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚合酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口．DNA聚合酶I的這兩種活性的交替作用，使缺口不斷向3’的方向移動(dòng)，DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)...

電子探針可以對(duì)試樣中微小區(qū)域（微米級(jí)）的化學(xué)組成進(jìn)行定性或定量分析。可以進(jìn)行點(diǎn)、線(xiàn)掃描（得到層成分分布信息）、面掃描分析（得到成分面分布圖像）。還能全自動(dòng)進(jìn)行批量（預(yù)置9999測(cè)試點(diǎn)）定量分析。由于電子探針技術(shù)具有操作迅速簡(jiǎn)便（相對(duì)復(fù)雜的化學(xué)分析方法而言）、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋直截了當(dāng)、分析過(guò)程不損壞樣品、測(cè)量準(zhǔn)確度較高等優(yōu)點(diǎn)，故在冶金、地質(zhì)、電子材料、生物、醫(yī)學(xué)、考古以及其它領(lǐng)域中得到日益***地應(yīng)用，是礦物測(cè)試分析和樣品成分分析的重要工具。分析對(duì)象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆粒或微小區(qū)域，小范圍直徑為1μm。楊浦區(qū)挑選探針五星服務(wù)早期采用的RNA探針是細(xì)胞mRNA探針和病毒RNA探針，這些RNA是在細(xì)胞...

利用電子探針?lè)治龇椒梢蕴街牧蠘悠返幕瘜W(xué)組成以及各元素的重量百分?jǐn)?shù)。分析前要根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康闹苽錁悠?，樣品表面要清潔。用波譜儀分析樣品時(shí)要求樣品平整，否則會(huì)降低測(cè)得的X射線(xiàn)強(qiáng)度。定性分析1 點(diǎn)分析用于測(cè)定樣品上某個(gè)指定點(diǎn)的化學(xué)成分。下圖是用能譜儀得到的某鋼定點(diǎn)分析結(jié)果。能譜儀中的多道分析器可使樣品中所有元素的特征X射線(xiàn)信號(hào)同時(shí)檢測(cè)和顯示。不像波譜儀那樣要做全部譜掃描，甚至還要更換分光晶體。2 線(xiàn)分析用于測(cè)定某種元素沿給定直線(xiàn)分布的情況。方法是將X射線(xiàn)譜儀（波譜儀或能譜儀）固定在所要測(cè)量的某元素特征X射線(xiàn)信號(hào)（波長(zhǎng)或能量）的位置上，把電子束沿著指定的方向做直線(xiàn)軌跡掃描，便可得到該元素沿直線(xiàn)特征X射...

（3）X射線(xiàn)強(qiáng)度測(cè)量系統(tǒng)。特征X射線(xiàn)，由B系統(tǒng)中的計(jì)數(shù)管接收，并轉(zhuǎn)換成電脈沖，通過(guò)脈沖高度分析儀、計(jì)數(shù)率計(jì)、定標(biāo)器、電子電位計(jì)將其強(qiáng)度測(cè)量出來(lái)。（4）光學(xué)顯微鏡目測(cè)系統(tǒng)。用以準(zhǔn)確選擇需要分析的區(qū)域，并作光學(xué)觀察。（5）背散射電子圖像系統(tǒng)。（6）吸收電子圖像系統(tǒng)。（7）特征X射線(xiàn)圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線(xiàn)晶體光學(xué)，主要應(yīng)用兩種方法：1）晶體衍射法（X射線(xiàn)光譜法）。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度，來(lái)衍射某種波長(zhǎng)的X射線(xiàn)，通過(guò)讀出晶體不同的衍射角，求出X射線(xiàn)的波長(zhǎng)，從而定出樣品所含的元素。對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ有一個(gè)確定的波長(zhǎng)λ滿(mǎn)足衍射條件。青浦區(qū)品牌探針商家安全**介紹，WiFi探針盒子確...

DNA探針可以用來(lái)診斷寄生蟲(chóng)病，現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查及蟲(chóng)種鑒定，可用于病毒性肝炎的診斷，遺傳性疾病的診斷，可用于檢測(cè)飲用水病毒含量。具體方法：用一個(gè)特定的DNA片段制成探針，與被測(cè)的病毒DNA雜交，從而把病毒檢測(cè)出來(lái)。與傳統(tǒng)方法相比具有快速、靈敏的特點(diǎn)。傳統(tǒng)的檢測(cè)一次，需幾天或幾個(gè)星期的時(shí)間，精確度不高，而用DNA探針只需一天。據(jù)報(bào)道，能從1t水中檢測(cè)出10個(gè)病毒來(lái)，精確度**提高。RNA探針是一類(lèi)很有前途的核酸探針，由于RNA是單鏈分子，所以它與靶序列的雜交反應(yīng)效率極高。探針卡是一種測(cè)試接口，主要對(duì)裸芯進(jìn)行測(cè)試，通過(guò)連接測(cè)試機(jī)和芯片，通過(guò)傳輸信號(hào)對(duì)芯片參數(shù)進(jìn)行測(cè)試.。長(zhǎng)寧區(qū)品牌探針按需定制探針DNA克隆...

探針卡是一種測(cè)試接口，主要對(duì)裸芯進(jìn)行測(cè)試，通過(guò)連接測(cè)試機(jī)和芯片，通過(guò)傳輸信號(hào)對(duì)芯片參數(shù)進(jìn)行測(cè)試.。2019年曝光的WiFi探針技術(shù),甚至無(wú)需用戶(hù)主動(dòng)連接WiFi即可捕獲個(gè)人信息。 [1]近年來(lái)半導(dǎo)體制程技術(shù)突飛猛進(jìn)，超前摩爾定律預(yù)估法則好幾年，現(xiàn)階段已向7奈米以下挺進(jìn)。產(chǎn)品講求輕薄短小，IC體積越來(lái)越小、功能越來(lái)越強(qiáng)、腳數(shù)越來(lái)越多，為了降低芯片封裝所占的面積與改善IC效能，現(xiàn)階段覆晶(Flip Chip)方式封裝普遍被應(yīng)用于繪圖芯片、芯片組、存儲(chǔ)器及CPU等。上述高階封裝方式單價(jià)高昂，如果能在封裝前進(jìn)行芯片測(cè)試，發(fā)現(xiàn)有不良品存在晶圓當(dāng)中，即進(jìn)行標(biāo)記，直到后段封裝制程前將這些標(biāo)記的不良品舍棄，可...

在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄，有時(shí)還存在反向轉(zhuǎn)錄（即生成反義RNA），這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因。另外，在真核系統(tǒng)，某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生反義RNA，參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下，要準(zhǔn)確測(cè)定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針，而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測(cè)的合適標(biāo)記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補(bǔ)的原理，用特異的基因探針即識(shí)別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA（或RNA）分子，與被測(cè)定的靶序列互補(bǔ)，以檢測(cè)被測(cè)靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù)。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。通過(guò)鑒別其特征波長(zhǎng)或特征能量就可以確...

DNA探針根據(jù)其來(lái)源分為3種：一種來(lái)源于基因組中的基因本身，稱(chēng)為基因組探針（genomic probe），可以是基因的全序列，或者基因上的一段序列；另一種是從相應(yīng)的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA，再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到的探針，稱(chēng)為cDNA探針（cDNA probe）；此外，還可在體外人工合成20～50個(gè)堿基的與基因序列互補(bǔ)的DNA片段，稱(chēng)為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴(lài)于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。要得到一種特異性DNA探針，常常是比較煩瑣的。以細(xì)菌為例，細(xì)菌的基因組大小約為5×106堿基，約含3000個(gè)基因。要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針，通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫(kù)的辦法，即將細(xì)菌DN...

DNA探針是**常用的核酸探針，指長(zhǎng)度在幾百堿基對(duì)以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針?，F(xiàn)已獲得DNA探針數(shù)量很多，有細(xì)菌、病毒、原蟲(chóng)、***、動(dòng)物和人類(lèi)細(xì)胞DNA探針。這類(lèi)探針多為某一基因的全部或部分序列，或某一非編碼序列。這些DNA片段須是特異的，如細(xì)菌的毒力因子基因探針和人類(lèi)Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴(lài)于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。以細(xì)菌為例，分子雜交技術(shù)用于細(xì)菌的分類(lèi)和菌種鑒定比之G+C百分比值要準(zhǔn)確的多，是細(xì)菌分類(lèi)學(xué)的一個(gè)發(fā)展方向。加之分子雜交技術(shù)的高敏感性，分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景。對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ有一個(gè)確定的波長(zhǎng)λ滿(mǎn)足衍射條件。靜安區(qū)優(yōu)勢(shì)探針現(xiàn)價(jià)電子探...

早期采用的RNA探針是細(xì)胞mRNA探針和病毒RNA探針，這些RNA是在細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄或病毒復(fù)制過(guò)程中得到標(biāo)記的，標(biāo)記效率往往不高，且受到多種因素的制約。這類(lèi)RNA探針主要用于研究目的，而不是用于檢測(cè)。例如，在篩選逆轉(zhuǎn)錄病毒人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）的基因組DNA克隆時(shí)，因無(wú)DNA探針可利用，就利用HIV的全套標(biāo)記mRNA作為探針，成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進(jìn)行中的轉(zhuǎn)錄分析（nuclearrunontranscrip－tionassay）時(shí)，在體外將細(xì)胞核分離出來(lái)，然后在α-32P-ATP的存在下進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，所合成mR－NA均摻入同位素而得到標(biāo)記，此混合mRNA與固定于硝酸纖維素濾...

2、能譜儀來(lái)自樣品的X光子通過(guò)鈹窗口進(jìn)入鋰漂移硅固態(tài)檢測(cè)器。每個(gè)X光子能量被硅晶體吸收將在晶體內(nèi)產(chǎn)生電子空穴對(duì)。不同能量的X光子將產(chǎn)生不同的電子空穴對(duì)數(shù)。例如，F(xiàn)e的Kα輻射可產(chǎn)生1685個(gè)電子空穴對(duì)，而Cu為2110。知道了電子空穴對(duì)數(shù)就可以求出相應(yīng)的電荷量以及在固定電容（1μμF）上的電壓脈沖。多道脈沖高度分析器中的數(shù)模轉(zhuǎn)換器首先把脈沖信號(hào)轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)，建立起電壓脈沖幅值與道址的對(duì)應(yīng)關(guān)系（道址號(hào)與X光子能量間存在對(duì)應(yīng)關(guān)系）。電子探針又稱(chēng)微區(qū)X射線(xiàn)光譜分析儀、X射線(xiàn)顯微分析儀。嘉定區(qū)挑選探針生產(chǎn)廠家2）X射線(xiàn)能譜分析法。無(wú)須分析晶體，而直接將探測(cè)器接收的訊號(hào)加以放大，進(jìn)行脈沖幅度分析，通過(guò)...

禽流感基因探針制備探針濃度鑒定將禽流感病毒H9N2亞型毒株**白(NP)基因3′端較為保守的、約350bp的編碼序列通過(guò)限制性?xún)?nèi)切酶Hae¸切割、分離后,用隨機(jī)引物法制備Digoxigenin2112dUTP標(biāo)記探針。測(cè)定該探針的濃度為100Lgöml。特異性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該探針只能與實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的、含有NP基因的重組載體pGEM2TE2NP和pBacPAK2NP以及A型流感病毒H9N2亞型、H3N2亞型以及H9N3亞型毒株基因組RNA結(jié)合出現(xiàn)特異性的顏色反應(yīng),而與實(shí)驗(yàn)室常用的載體pGEM2Teasy、pBacPAK2His3、pTARGET和pGEMEX22以及新城疫病毒、傳染...

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對(duì)探針加以標(biāo)記，以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核...

在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄，有時(shí)還存在反向轉(zhuǎn)錄（即生成反義RNA），這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因。另外，在真核系統(tǒng)，某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生反義RNA，參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下，要準(zhǔn)確測(cè)定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針，而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測(cè)的合適標(biāo)記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補(bǔ)的原理，用特異的基因探針即識(shí)別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA（或RNA）分子，與被測(cè)定的靶序列互補(bǔ)，以檢測(cè)被測(cè)靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù)。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。近年形成了掃描電鏡-顯微分析儀的聯(lián)合...

用此探針在DNA文庫(kù)中篩選，陽(yáng)性克隆即是目標(biāo)蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細(xì)胞和原核細(xì)胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內(nèi)含子序列，而原核則沒(méi)有。因此，真核基因組DNA探針用于檢測(cè)基因表達(dá)時(shí)雜交效率要明顯低于cDNA探針。DNA探針（包括cDNA探針）的主要優(yōu)點(diǎn)有下面三點(diǎn)：①這類(lèi)探針多克隆在質(zhì)粒載體中，可以無(wú)限繁殖，取之不盡，制備方法簡(jiǎn)便。②DNA探針不易降解（相對(duì)RNA而言），一般能有效抑制DNA酶活性。③DNA探針的標(biāo)記方法較成熟，有多種方法可供選擇，如缺口平移，隨機(jī)引物法，PCR標(biāo)記法等，能用于同位素和非同位素標(biāo)記。為此，一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個(gè)聚光鏡的結(jié)構(gòu)。黃浦...

探針的標(biāo)記也可以采用隨機(jī)引物法，即向變性的探針溶液加入6個(gè)核苷酸的隨機(jī)DNA小片段，作為引物，當(dāng)后者與單鏈DNA互補(bǔ)結(jié)合后，按堿基互補(bǔ)原則不斷在其3’OH端添加同位素標(biāo)記的單核苷酸，這樣也可以獲得比放射性很高的DNA探針。DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板，人工合成的帶有放射性或生物素標(biāo)記的單鏈DNA片段，可用來(lái)快速檢測(cè)病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合，經(jīng)放射自顯影或其他檢測(cè)手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。電子探針是法國(guó)制成的，是在1949年用電子顯微鏡...

細(xì)菌的基因組大小約5×106bp，約含3000個(gè)基因。各種細(xì)菌之間絕大部分DNA是相同的，要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針，通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫(kù)的辦法，即將細(xì)菌DNA切成小片段后分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫(kù)。然后用多種其它菌種的DNA作探針來(lái)篩選，產(chǎn)生雜交信號(hào)的克隆被剔除，***剩下的不與任何其它細(xì)菌雜交的克隆則可能含有該細(xì)菌特異性DNA片段。將此重組質(zhì)粒標(biāo)記后作探針進(jìn)一步鑒定，亦可經(jīng)DNA序列分析鑒定其基因來(lái)源和功能。因此要得到一種特異性DNA探針，常常是比較繁瑣的。應(yīng)用于地質(zhì)、冶金材料、水泥熟料研究等部門(mén)。寶山區(qū)挑選探針售價(jià)（3）X射線(xiàn)強(qiáng)度測(cè)量系統(tǒng)。特征X射線(xiàn)，由B系統(tǒng)中...