分光光度計在食品行業(yè)的亞硝酸鹽檢測中應用較多,亞硝酸鹽作為一種潛在的劇毒物質(zhì),其在食品中的含量受到嚴格限制。國家標準規(guī)定,腌臘肉制品中亞硝酸鹽的殘留量不得超過30mg/kg,醬鹵肉制品不得超過20mg/kg。目前常用的檢測方法為鹽酸萘乙二胺分光光度法,該方法是將樣品中的亞硝酸鹽用飽和硼砂溶液提取,再經(jīng)過沉淀蛋白質(zhì)、去除脂肪等前處理步驟后,在酸性條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應,生成重氮鹽,隨后與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色染料。分光光度計在540nm波長處測量該紅色染料的吸光度,根據(jù)吸光度與亞硝酸鹽濃度的線性關(guān)系,通過標準曲線計算出樣品中亞硝酸鹽的含量。在樣品前處理過程中,...
分光光度計在實驗中的酶活性測定中有較多的應用,以過氧化氫酶活性測定為例,過氧化氫酶可催化過氧化氫分解為水和氧氣,在反應過程中,過氧化氫的濃度會逐漸降低,其吸光度也會隨之下降。分光光度計可在240nm波長處實時監(jiān)測過氧化氫溶液吸光度的變化,根據(jù)吸光度的下降速率計算過氧化氫酶的活性。通常以每分鐘內(nèi)吸光度下降為一個酶活性單位(U),酶活性(U/mL)=(ΔA×V總)/(ε×b×V樣×t),其中ΔA為反應時間t內(nèi)的吸光度變化值,V總為反應體系總體積(mL),ε為過氧化氫在240nm波長處的摩爾吸光系數(shù)(?mol?1?cm?1),b為比色皿光程(cm),V樣為加入的酶液體積(mL),t為反應時間...
分光光度計在化妝品領(lǐng)域的防曬劑二苯酮-3檢測中應用嚴格,二苯酮-3作為常用紫外線吸收劑,其含量過高可能引發(fā)皮膚過敏,國家標準(GB)規(guī)定其在化妝品中的上限使用量為6%。分光光度計可通過液相色譜聯(lián)用紫外檢測(HPLC-UV)實現(xiàn)準確測定,也可通過直接紫外分光光度法進行篩查。篩查流程:將化妝品樣品(如防曬霜)用乙醇超聲提取30分鐘,離心后取上清液,用乙醇稀釋至適宜濃度,在二苯酮-3的上限吸收波長(288nm)處測量吸光度,結(jié)合二苯酮-3標準曲線計算含量。檢測中需注意,超聲提取功率需把控在300W,功率過高會導致乙醇揮發(fā),濃度升高;若樣品為乳液或膏霜類,需加入少量吐溫-80乳化劑,防止提...
掃描型可見分光光度計是可見分光光度計的重要類別,優(yōu)勢在于可在可見光區(qū)(400-760nm)內(nèi)連續(xù)掃描特定波長范圍,自動記錄吸光度隨波長的變化曲線,進而實現(xiàn)物質(zhì)定性分析與光譜特征研究,原理仍遵循朗伯-比爾定律。與固定波長可見分光光度計相比,其關(guān)鍵差異在于配備可精確把控波長連續(xù)變化的驅(qū)動系統(tǒng)(如步進電機驅(qū)動光柵)與數(shù)據(jù)采集系統(tǒng),能在設(shè)定掃描速度(如100-1000nm/min)、波長間隔(如)下,獲取完整光譜曲線,直觀呈現(xiàn)物質(zhì)的上限值吸收波長、吸收峰數(shù)量及峰形特征。儀器組件包括鎢燈(可見光區(qū)光源,發(fā)光穩(wěn)定,使用壽命約2000小時)、高分辨率光柵單色器(波長分辨率可達,確保光譜峰分離清晰...
分光光度計的波長校準是保證測量精度的重要環(huán)節(jié),需結(jié)合標準物質(zhì)與流程定期開展。除常見的重鉻酸鉀標準溶液外,不同波長范圍還需搭配特定校準物質(zhì):紫外區(qū)(190-400nm)可采用苯蒸氣(在254nm、268nm處有特征吸收峰)或鈥玻璃(在、等波長有尖銳吸收峰),可見光區(qū)(400-760nm)常用硫酸銅溶液(750nm處有穩(wěn)定吸收)或鉻酸鉀溶液(375nm、440nm處吸收峰明顯)。校準時需先將儀器預熱30分鐘以上,確保光源與檢測器處于穩(wěn)定工作狀態(tài),隨后將標準物質(zhì)裝入匹配比色皿(紫外區(qū)用石英比色皿,可見光區(qū)可用玻璃比色皿),放入樣品室并啟動校準程序。儀器會自動掃描標準物質(zhì)的吸收光譜,對比實...
單火焰原子吸收分光光度計在教學領(lǐng)域的分析化學實驗課程中應用基礎(chǔ),通過“火焰原子吸收法測水中鈣含量”實驗,幫助學生理解原子吸收光譜分析原理與儀器操作流程。實驗原理為:學生學習火焰原子化的過程(霧化、干燥、熔融、原子化),理解釋放劑(如氧化鑭)清理干擾的機制,掌握外標法定量的基本步驟。實驗流程:學生分組處理水樣(加入鹽酸酸化、氧化鑭釋放劑),優(yōu)化儀器參數(shù)(燈電流、狹縫寬度、燒器高度);配制系列鈣標準溶液(1-10μg/mL),繪制標準曲線并計算線性相關(guān)系數(shù);測量水樣吸光度,計算鈣含量,并分析實驗誤差(如霧化效率低導致結(jié)果偏低、背景干擾導致結(jié)果偏高)。實驗中需指導學生:正確點燃與熄滅火焰(先...
紫外可見分光光度計在環(huán)境保護領(lǐng)域的水質(zhì)總有機碳(TOC)檢測中有jiao應用,TOC是反映水體有機物污染程度的重要指標,國家標準(GB11914-89)推薦采用紫外氧化-分光光度法。檢測原理為:水樣中的有機碳在紫外光(波長185nm)照射下被氧化為二氧化碳,二氧化碳與水中的氫氧化鈉反應生成碳酸氫鈉,再加入酚酞指示劑,碳酸氫鈉與酚酞形成紅色絡合物,該絡合物在550nm波長處有特征吸收,吸光度與TOC濃度呈線性關(guān)系。操作流程:取水樣10mL,加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至10-11,置于紫外氧化裝置中照射30min,冷卻后加入酚酞指示劑,用紫外可見分光光度計測量吸光度。通過TOC標準曲線(...
分光光度計在痕量物質(zhì)分析中的應用需結(jié)合富集技術(shù),以突破儀器自身檢測下限的限制。痕量分析中,目標物質(zhì)濃度常低于分光光度計的直接檢測范圍(如μg/L級別),需通過萃取、吸附、沉淀等富集手段提高濃度。以水中痕量鉛的檢測為例,采用雙硫腙萃取分光光度法時,先調(diào)節(jié)水樣pH至,加入雙硫腙-四氯化碳溶液振蕩萃取,鉛離子與雙硫腙形成紅色絡合物并溶于有機相,經(jīng)多次萃取后將有機相合并,通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至適宜體積(如10mL,原水樣體積可能為1000mL,富集倍數(shù)達100倍),再用分光光度計在510nm波長處測量吸光度。此時儀器檢測下限可從原本的降至,滿足地表水痕量鉛檢測需求。在大氣痕量污染物檢測中,如甲...
在分光光度計的日常操作流程中,樣品前處理環(huán)節(jié)直接影響測量結(jié)果的準確性,需嚴格遵循規(guī)范。首先,要根據(jù)樣品的物理狀態(tài)(液態(tài)、固態(tài)、氣態(tài))和化學性質(zhì)選擇合適的前處理方法。對于液態(tài)樣品,若存在懸浮雜質(zhì),需通過離心(轉(zhuǎn)速通常為3000-5000r/min,離心時間5-10min)或過濾(使用μm或μm孔徑的濾膜)去除雜質(zhì),避免雜質(zhì)對光的散射作用干擾吸光度測量。若樣品濃度過高,超出分光光度計的檢測線性范圍(通常吸光度在之間測量誤差?。?,需采用合適的溶劑(如蒸餾水、乙醇、緩沖溶液等,需確保溶劑在測量波長下無吸收)進行梯度稀釋,稀釋過程中要使用移液管(精度需達到)和容量瓶(誤差≤),確保稀釋倍數(shù)準...
分光光度計在地質(zhì)勘探領(lǐng)域的巖石礦物鐵含量檢測中具有實用價值,尤其在鐵礦石品位分析中應用較多。以赤鐵礦(Fe?O?,主要含鐵礦物)檢測為例,分光光度計可通過重鉻酸鉀滴定輔助分光光度法測定總鐵含量。流程為:將鐵礦石樣品用鹽酸-硝酸混合液溶解,加入SnCl?將Fe3?還原為Fe2?,過量的SnCl?用HgCl?去除,再加入H2SO4-磷酸混合酸調(diào)節(jié)體系酸度后,加入二苯胺磺酸鈉指示劑,用重鉻酸鉀標準溶液滴定Fe2?,同時用分光光度計在520nm波長處監(jiān)測滴定過程中指示劑顏色變化(由無色變?yōu)樽仙?,確定滴定終點。相較于傳統(tǒng)目視滴定,分光光度計可通過吸光度突變準確判斷終點,避免人為視覺誤差。檢...