在現(xiàn)代替物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AgeI 便是其中一位“精細(xì)切割大師”。它以其高度的特異性和精細(xì)的切割能力,在基因工程、分子生物學(xué)研究以及生物制藥等領(lǐng)域發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。AgeI 的識(shí)別序列為“AC^CGGT”,這種獨(dú)特的序列使得它能夠在復(fù)雜的 DNA 分子中精細(xì)定位并切割。當(dāng) AgeI 識(shí)別到這一特定序列時(shí),它會(huì)在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得 AgeI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AgeI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家們可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,就像從一座巨大的寶藏中找到那顆比較好珍貴的寶石。隨后,通過 DNA 連接酶,將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這一過程不僅需要精細(xì)的切割,還需要切割后的片段能夠完美匹配,而 AgeI 的黏性末端特性正好滿足了這一需求。AgeI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AgeI 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。這些研究不僅推動(dòng)了植物基因組學(xué)的發(fā)展,還為其他復(fù)雜基因組的研究提供了新的思路和技術(shù)支持。Recombinant Mouse TREML2/TLT-2 Protein,His Tag
Semaphorin 4A(Sema4A)是Ⅳ類膜結(jié)合信號(hào)素,既以軸突導(dǎo)向分子身份調(diào)控神經(jīng)投射,又以共刺激配體角色驅(qū)動(dòng)Th1/Treg平衡,在多發(fā)性硬化、腫瘤免疫逃逸及視網(wǎng)膜血管病變中均呈高表達(dá)。本品采用HEK293懸浮表達(dá),完整覆蓋胞外Sema-PSI-IPT結(jié)構(gòu)域(aa 1-683),經(jīng)TEV酶切除信號(hào)肽后于C端引入6×His標(biāo)簽,兩步Ni-NTA與分子篩純化,SEC-MALS驗(yàn)證二聚體分子量≈160 kDa,純度≥98%;內(nèi)素<0.05 EU/μg,支持小鼠體內(nèi)研究。SPR測(cè)定其與受體PlexinD1親和力KD=5.4 nM,100 ng/mL即可誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞回縮并抑制管腔形成;在OT-I小鼠模型中,腹腔注射15 μg重組Sema4A可將CD8? T細(xì)胞IFN-γ分泌提升2.1倍,同時(shí)降低Treg比例,明顯延緩B16-OVA病生長。His標(biāo)簽兼容ELISA、流式及免疫共沉淀,可用于篩選中和抗體或檢測(cè)Sema4A-受體復(fù)合物。該蛋白為解析神經(jīng)-免疫-血管三方對(duì)話、開發(fā)雙靶點(diǎn)免疫療法提供高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究工具。
在現(xiàn)代替物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AscI 便是其中一位“稀有切割手”。它以其獨(dú)特的識(shí)別序列和精細(xì)的切割能力,在基因工程、分子生物學(xué)研究以及遺傳學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。AscI 的識(shí)別序列是“GG^CGCGCC”,這一序列在基因組中極為罕見,使得 AscI 的切割位點(diǎn)相對(duì)稀少。這種稀有性使得 AscI 在處理復(fù)雜基因組時(shí)具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),能夠避免過度切割導(dǎo)致的片段過小或信息丟失。AscI 會(huì)在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端,這種黏性末端的特性使得 AscI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AscI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割能力使得 AscI 成為處理大型基因組或復(fù)雜基因片段時(shí)的理想選擇。AscI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AscI 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。
重組人整合素αVβ8(ITGAV&ITGB8)異源二聚體蛋白(His-Avi標(biāo)簽)是一種重要的細(xì)胞表面受體,廣參與細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的相互作用,在組織發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)及發(fā)生等生理和病理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。整合素αVβ8由αV(ITGAV)和β8(ITGB8)兩個(gè)亞基組成,主要在神經(jīng)組織、上皮細(xì)胞及某些免疫細(xì)胞中表達(dá),具有獨(dú)特的配體結(jié)合特性,尤其與潛伏性TGF-β啟動(dòng)密切相關(guān)。該重組蛋白通過哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端融合了His標(biāo)簽,便于通過金屬螯合親和層析進(jìn)行高效純化;同時(shí)帶有Avi標(biāo)簽,可在體內(nèi)或體外通過生物素連接酶實(shí)現(xiàn)特異性生物素化,極大提高了其在ELISA、表面等離子共振(SPR)及細(xì)胞功能檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用靈活性。αVβ8異源二聚體蛋白在神經(jīng)發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)及微環(huán)境研究中具有重要價(jià)值,尤其適用于研究其與TGF-β的相互作用機(jī)制。其高純度、高穩(wěn)定性和良好的批間一致性,使其成為藥物篩選、抗體開發(fā)及基礎(chǔ)研究的理想工具,為深入探索整合素介導(dǎo)的生物學(xué)過程提供了可靠平臺(tái)。FnCas12a的雙鏈或單鏈DNA靶標(biāo)都能激發(fā)其反式剪切活性,即在形成三元復(fù)合物后,針對(duì)非特異序列ssDNA的剪切。
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來,科學(xué)家們通過對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。在某些遺傳病的研究中,AflII可以用來檢測(cè)基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。Recombinant Human CD47 Protein,hFc Tag
Endo H 的活性受 pH 值的強(qiáng)烈影響,通常在酸性條件下表現(xiàn)出好的活性,一般合適 pH 范圍在 5.0-6.0 左右。Recombinant Mouse TREML2/TLT-2 Protein,His Tag
重組人KIR2DL1蛋白(Recombinant Human KIR2DL1 Protein, His-Avi Tag)是一種重要的免疫調(diào)節(jié)蛋白,屬于殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(Killer-cell Immunoglobulin-like Receptor, KIR)家族成員,主要表達(dá)于自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)和部分T細(xì)胞表面。KIR2DL1通過識(shí)別并結(jié)合靶細(xì)胞表面的HLA-C分子,傳遞抑制性信號(hào),從而調(diào)控NK細(xì)胞的殺傷活性,在免疫耐受、抗病毒免疫及病免疫監(jiān)視中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該重組蛋白采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其正確的折疊與糖基化修飾,保留了天然蛋白的生物活性。其N端融合了His標(biāo)簽,便于通過Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化;同時(shí)帶有Avi標(biāo)簽,可在體內(nèi)或體外通過生物素連接酶實(shí)現(xiàn)特異性生物素化,極大提高了其在ELISA、表面等離子共振(SPR)及流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用靈活性。KIR2DL1在免疫治研究中具有重要意義,尤其在NK細(xì)胞功能調(diào)控、病免疫逃逸機(jī)制及個(gè)體化免疫治策略開發(fā)中受到廣關(guān)注。重組人KIR2DL1蛋白為研究NK細(xì)胞與靶細(xì)胞相互作用、篩選KIR-HLA阻斷劑及開發(fā)新型免疫檢查點(diǎn)抑制劑提供了可靠工具,具有重要的科研與臨床轉(zhuǎn)化價(jià)值。Recombinant Mouse TREML2/TLT-2 Protein,His Tag