HE染色常見問題:成片的染色模糊不清,灰染答:(1)組織未及時(shí)固定,部分自溶;或固定不佳,深部組織未處理到。這種只能重新固定了。(2)盡管乙醇也是一種固定液,但盡量少用或不用,因?yàn)槠鋾?huì)導(dǎo)致組織發(fā)硬變脆,染色效果不好。(3)包埋時(shí)蠟的溫度過高,或切片后烤片時(shí)間和溫度過久過高都不好,可能會(huì)導(dǎo)致無法染色。(4)脫蠟不徹底;染料有問題;分化過度導(dǎo)致的顏色變淡,鏡下組織界限不清;染完后的脫水和透明不佳,水霧殘留在組織上。(5)通風(fēng)窗中(防止空氣中的水霧),戴口罩操作封片(減少哈氣帶來的水霧)。什么是HE染色,HE染色實(shí)驗(yàn)的目的。湖北病理HE染色報(bào)告
HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法,是**基本的病理學(xué)染色技術(shù)。由于組織或細(xì)胞的不同成分對(duì)蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來。質(zhì)量好的HE具備條件1.細(xì)胞核與細(xì)胞漿藍(lán)紅相映,鮮艷亮麗;2.胞核鮮明、核膜、核染色質(zhì)顆粒均清晰可見;3.組織或一般結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及假物質(zhì)成分均能顯示出來。湖南推薦的HE染色價(jià)格HE染色,即是蘇木精-伊紅染色法,是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法。
HE染色細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深。
HE染色實(shí)驗(yàn)步驟:(1)樣品制備:對(duì)于貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞,胰酶消化,調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后,取出細(xì)胞爬片,用PBS洗滌3次。(2)樣品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次,每次1min。(3)染核:蘇木素染液染色2-3min,自來水洗滌。(4)分色:鏡下觀察,若細(xì)胞核染色過深,用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,自來水洗滌。(5)染胞質(zhì):浸入伊紅染液染色1min,自來水洗滌。(6)吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后,中性樹膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定,則染色時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng),蘇木素染色12-15min,伊紅5min即可常規(guī)HE染色和特殊染色服務(wù)。
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,對(duì)組織細(xì)胞的各種成分都可著色,便于***觀察組織構(gòu)造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長(zhǎng)期保存。經(jīng)過HE染色,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色??梢杂^察細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等。首先切片組織是否完整,組織有無損傷;然后看切片有無刀痕;***細(xì)胞核是否清晰可見,胞核與包漿要對(duì)比鮮明。海馬組織HE染色如何觀察。福建專業(yè)的HE染色公司
HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟。湖北病理HE染色報(bào)告
HE染色伊紅著色淡分析及應(yīng)對(duì)原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5;(2)藍(lán)化液殘留過多;(3)切片太?。唬?)切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時(shí)間過長(zhǎng)。對(duì)策:檢查伊紅染液的pH值,如果必要的話,用乙酸將其調(diào)節(jié)在4~5之間,從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍(lán)化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時(shí)不要讓切片在低濃度乙醇停留時(shí)間過長(zhǎng),因?yàn)楹嗟牡蜐舛纫掖紩?huì)將伊紅的顏色分化掉。湖北病理HE染色報(bào)告