TET 熒光定量 PCR 儀針對(duì)基因拷貝數(shù)變異(CNV)檢測(cè)的需求,開(kāi)發(fā)了低背景熒光抑制技術(shù),通過(guò)優(yōu)化反應(yīng)體系中的熒光淬滅劑濃度及儀器光學(xué)系統(tǒng)的激發(fā)光強(qiáng)度,可將非特異性熒光信號(hào)降低至檢測(cè)閾值以下(<100 RFU)。其適配的 TET 標(biāo)記引物在與靶標(biāo) DNA 結(jié)合后,可通過(guò)引物延伸過(guò)程釋放熒光信號(hào),避免了探針?lè)ㄖ刑结樤O(shè)計(jì)難度高的問(wèn)題,尤其適合復(fù)雜基因組區(qū)域(如重復(fù)序列區(qū))的 CNV 檢測(cè)。在臨床染色體異常檢測(cè)中,例如 21 三體綜合征(唐氏綜合征)的產(chǎn)前篩查,該儀器可通過(guò)檢測(cè)胎兒游離 DNA 中 21 號(hào)染色體特異性基因的拷貝數(shù),與正常二倍體樣本進(jìn)行對(duì)比,實(shí)現(xiàn)拷貝數(shù)差異的精細(xì)量化。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明...
定量熒光定量 PCR 儀主要支持定量與相對(duì)定量?jī)煞N模式,適配不同實(shí)驗(yàn)需求。定量需先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(如重組質(zhì)粒、體外轉(zhuǎn)錄 RNA),通過(guò)梯度稀釋后進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,生成 “標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù) - Ct 值” 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);檢測(cè)樣本時(shí),將樣本 Ct 值代入曲線(xiàn),即可計(jì)算出靶核酸的拷貝數(shù)(如 “1×10^4 拷貝 /mL”),該模式常用于病毒載量檢測(cè)(如乙肝病毒 DNA 定量)、微生物計(jì)數(shù)等場(chǎng)景,需精細(xì)掌握靶標(biāo)含量。相對(duì)定量則通過(guò)比較處理組與對(duì)照組的靶基因 Ct 值差異,采用 2^(-ΔΔCt) 法計(jì)算基因表達(dá)相對(duì)倍數(shù),無(wú)需制備標(biāo)準(zhǔn)品,操作更簡(jiǎn)便。例如在藥物研發(fā)中,檢測(cè)藥物處理組與對(duì)照組的抑制基因表...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)技術(shù)高度適配臨床中體液、組織活檢等微量樣本場(chǎng)景,解決了傳統(tǒng)檢測(cè)中 “樣本量不足無(wú)法檢測(cè)” 的痛點(diǎn)。臨床中,許多樣本(如腦脊液、胸腔積液、穿刺活檢組織)的獲取量極少(幾十至幾百微升),且難以重復(fù)取樣,微量檢測(cè)技術(shù)可實(shí)現(xiàn) “少量樣本多項(xiàng)目檢測(cè)”:例如 100μL 腦脊液樣本,可分為 3-5 份微量反應(yīng)體系,同時(shí)檢測(cè)病毒(如巨細(xì)胞病毒)、細(xì)菌(如結(jié)核分枝桿菌)與(如隱球菌)。設(shè)備針對(duì)不同臨床樣本的特性還做了專(zhuān)項(xiàng)優(yōu)化:檢測(cè)血液樣本時(shí),加入核酸提取增效劑,提升微量血液中病毒核酸的提取效率;檢測(cè)組織活檢樣本時(shí),優(yōu)化裂解液配方,充分釋放組織中的微量核酸。在神經(jīng)科臨床中,通過(guò)微量...
熒光熒光定量 PCR 儀的高靈敏度源于其優(yōu)化的熒光檢測(cè)系統(tǒng):采用高量子效率的 CCD 檢測(cè)器或光電倍增管,可捕捉單個(gè)熒光分子發(fā)出的信號(hào);同時(shí)通過(guò)窄帶濾光片減少背景光干擾,基線(xiàn)噪聲控制在 0.1 熒光單位以下,確保微弱信號(hào)可被有效識(shí)別。該特性使其比較低檢測(cè)限可達(dá) “單拷貝靶核酸”,能精細(xì)檢測(cè)低豐度樣本 —— 例如循環(huán) DNA(ctDNA)檢測(cè)中,ctDNA 在血液中含量為 1-100 拷貝 /mL,傳統(tǒng)檢測(cè)方法易漏檢,而該儀器可通過(guò)多次循環(huán)擴(kuò)增放大信號(hào),準(zhǔn)確捕捉 ctDNA 熒光信號(hào),為早期診斷提供可能。在病原體早期檢測(cè)中也發(fā)揮關(guān)鍵作用,如病毒(HIV)窗口期,患者體內(nèi)病毒載量極低,儀器可通過(guò)高...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)模塊通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)的精細(xì)設(shè)計(jì),明顯降低非特異性干擾,保障微量樣本檢測(cè)的準(zhǔn)確性。該模塊的重要優(yōu)化包括三方面:一是采用激光聚焦技術(shù),將激發(fā)光精細(xì)聚焦于微量反應(yīng)體系(1-10μL),減少激發(fā)光散射導(dǎo)致的背景噪音;二是配備高特異性濾光片組,允許目標(biāo)熒光波長(zhǎng)通過(guò),屏蔽環(huán)境光與非特異性熒光(如引物二聚體熒光);三是采用光子計(jì)數(shù)技術(shù),對(duì)微弱熒光信號(hào)進(jìn)行精細(xì)計(jì)數(shù),提升信號(hào)檢測(cè)的信噪比。此外,模塊還整合了溫度補(bǔ)償功能,避免微量反應(yīng)體系因溫度波動(dòng)導(dǎo)致的熒光強(qiáng)度漂移。這些設(shè)計(jì)使設(shè)備在檢測(cè)納升級(jí)樣本時(shí),仍能保持優(yōu)異的特異性與重復(fù)性 —— 例如在檢測(cè)腦脊液中的病毒核酸時(shí),可有效排除體液中蛋白...
FAM 熒光定量 PCR 儀以 FAM 熒光染料(激發(fā)波長(zhǎng) 494nm,發(fā)射波長(zhǎng) 518nm)為重要檢測(cè)通道,憑借染料的高熒光效率與設(shè)備的精細(xì)適配,成為臨床病原體篩查的主流選擇。該設(shè)備的光學(xué)系統(tǒng)針對(duì) FAM 染料進(jìn)行專(zhuān)項(xiàng)優(yōu)化,通道靈敏度比通用型設(shè)備提升 2-3 倍,可快速捕獲低豐度靶標(biāo)的熒光信號(hào);同時(shí)采用抗干擾算法,減少樣本中雜質(zhì)(如血紅蛋白、脂質(zhì))對(duì)熒光信號(hào)的淬滅影響。FAM 染料是臨床檢測(cè)中常用的熒光標(biāo)記物,因其光譜特性穩(wěn)定、與探針結(jié)合效率高,較廣用于單一靶標(biāo)檢測(cè)(如乙肝病毒 DNA、丙肝病毒 RNA)及多重檢測(cè)的主通道。在實(shí)際應(yīng)用中,例如呼吸道病原體檢測(cè),F(xiàn)AM 通道常作為 “重要靶標(biāo)通...
熒光定量 PCR 儀的多通道設(shè)計(jì)是實(shí)現(xiàn)高通量靶標(biāo)篩查的重要技術(shù),其硬件基礎(chǔ)是多組光學(xué)檢測(cè)單元,可同時(shí)兼容 4-6 種不同熒光染料(如 FAM、VIC、HEX、JOE、YELLOW 等)。每個(gè)通道配備專(zhuān)屬的激發(fā)光源、濾光片與探測(cè)器,通過(guò)光譜分離技術(shù),確保不同染料的熒光信號(hào)互不干擾,實(shí)現(xiàn) “一管多檢”。多通道設(shè)計(jì)的優(yōu)勢(shì)在于大幅提升檢測(cè)效率:例如在產(chǎn)前診斷中,可同時(shí)檢測(cè) 21 三體、18 三體、13 三體相關(guān)基因(分別用 FAM、VIC、HEX 標(biāo)記),一次反應(yīng)完成三項(xiàng)篩查;在食源性致病菌檢測(cè)中,可同時(shí)檢測(cè)沙門(mén)氏菌、大腸桿菌、李斯特菌等 5-6 種致病菌,縮短檢測(cè)周期。軟件系統(tǒng)還支持通道靈活配置,用...
Texas Red 熒光定量 PCR 儀的特征發(fā)射波長(zhǎng)(585-605nm)與常用 FAM 染料(518nm)的發(fā)射波長(zhǎng)間隔明顯,可有效避免熒光串?dāng)_,實(shí)現(xiàn)雙重?zé)晒鈾z測(cè)。該儀器通過(guò)的光學(xué)濾波系統(tǒng),分別采集兩種染料的熒光信號(hào),無(wú)需進(jìn)行復(fù)雜的熒光補(bǔ)償校正,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程。在病原體共檢場(chǎng)景中,例如流感病毒 A/B 型聯(lián)合檢測(cè),可將 FAM 標(biāo)記流感 A 病毒探針、Texas Red 標(biāo)記流感 B 病毒探針加入同一反應(yīng)體系,通過(guò)該儀器一次檢測(cè)即可同時(shí)區(qū)分兩種病毒,相比傳統(tǒng)單通道 PCR 儀需分兩次檢測(cè)的方式,檢測(cè)效率提升 50% 以上,且節(jié)省了樣本用量(需 2μL 核酸模板)。此外,Texas Re...
YELLOW 熒光定量 PCR 儀專(zhuān)為黃色熒光基團(tuán)設(shè)計(jì),其光學(xué)系統(tǒng)精細(xì)匹配黃色熒光的激發(fā)(580nm)與發(fā)射(605nm)波長(zhǎng),應(yīng)用場(chǎng)景聚焦于細(xì)菌耐藥基因檢測(cè)。黃色熒光基團(tuán)具有熒光信號(hào)強(qiáng)、抗干擾能力強(qiáng)的特點(diǎn),尤其適合檢測(cè)細(xì)菌樣本中高復(fù)雜度的核酸背景(如細(xì)菌基因組 DNA 干擾)。該設(shè)備通過(guò)雙重優(yōu)化提升檢測(cè)性能:一是光學(xué)濾鏡采用窄帶寬設(shè)計(jì),允許黃色熒光信號(hào)通過(guò),屏蔽細(xì)菌自身色素(如綠膿桿菌色素)的熒光干擾;二是擴(kuò)增程序優(yōu)化,針對(duì)耐藥基因(如 β- 內(nèi)酰胺類(lèi)耐藥基因 blaKPC)的序列特性,調(diào)整退火溫度與延伸時(shí)間,提升擴(kuò)增特異性。在臨床應(yīng)用中,例如醫(yī)院控制場(chǎng)景,可快速檢測(cè)患者樣本中是否存在耐藥基...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)技術(shù)不僅依賴(lài)硬件設(shè)計(jì),還通過(guò)緩沖液體系的專(zhuān)項(xiàng)優(yōu)化,解決微量樣本擴(kuò)增穩(wěn)定性不足的問(wèn)題。微量反應(yīng)體系(1-10μL)中,試劑濃度波動(dòng)、酶活性受抑等問(wèn)題更易凸顯,因此緩沖液需滿(mǎn)足三重需求:一是高保真 DNA 聚合酶,可在微量體系中精細(xì)識(shí)別引物結(jié)合位點(diǎn),降低錯(cuò)配率;二是增強(qiáng)型 dNTP 混合物,添加抗降解成分,避免微量 dNTP 因反復(fù)凍融失效;三是滲透壓調(diào)節(jié)劑,維持反應(yīng)體系滲透壓穩(wěn)定,防止微量樣本因蒸發(fā)導(dǎo)致濃度異常。這種優(yōu)化后的緩沖液與設(shè)備硬件形成協(xié)同:例如在檢測(cè)循環(huán) DNA(ctDNA,樣本量常低至納克級(jí))時(shí),可有效避免因樣本量少、擴(kuò)增效率低導(dǎo)致的假陰性,確保檢測(cè)靈敏...
熒光定量 PCR 儀的多通道設(shè)計(jì)是實(shí)現(xiàn)高通量靶標(biāo)篩查的重要技術(shù),其硬件基礎(chǔ)是多組光學(xué)檢測(cè)單元,可同時(shí)兼容 4-6 種不同熒光染料(如 FAM、VIC、HEX、JOE、YELLOW 等)。每個(gè)通道配備專(zhuān)屬的激發(fā)光源、濾光片與探測(cè)器,通過(guò)光譜分離技術(shù),確保不同染料的熒光信號(hào)互不干擾,實(shí)現(xiàn) “一管多檢”。多通道設(shè)計(jì)的優(yōu)勢(shì)在于大幅提升檢測(cè)效率:例如在產(chǎn)前診斷中,可同時(shí)檢測(cè) 21 三體、18 三體、13 三體相關(guān)基因(分別用 FAM、VIC、HEX 標(biāo)記),一次反應(yīng)完成三項(xiàng)篩查;在食源性致病菌檢測(cè)中,可同時(shí)檢測(cè)沙門(mén)氏菌、大腸桿菌、李斯特菌等 5-6 種致病菌,縮短檢測(cè)周期。軟件系統(tǒng)還支持通道靈活配置,用...
熒光定量 PCR 儀作為分子生物學(xué)設(shè)備,其原理是在 PCR 擴(kuò)增過(guò)程中,通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)實(shí)時(shí)捕獲熒光信號(hào)的動(dòng)態(tài)變化。與傳統(tǒng)終點(diǎn) PCR 能判斷靶標(biāo)有無(wú)不同,該設(shè)備可記錄每個(gè)擴(kuò)增循環(huán)的熒光強(qiáng)度,形成特征性擴(kuò)增曲線(xiàn),結(jié)合閾值設(shè)定與數(shù)據(jù)分析算法,實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸靶標(biāo)的精細(xì)定量。其精細(xì)性源于雙重保障:一是熒光信號(hào)與擴(kuò)增產(chǎn)物量的線(xiàn)性關(guān)聯(lián),確保信號(hào)強(qiáng)度真實(shí)反映靶標(biāo)濃度;二是特異性引物與熒光探針的協(xié)同作用,避免非特異性擴(kuò)增干擾。該功能廣泛應(yīng)用于臨床病原體載量檢測(cè)(如、乙肝病毒)、基因表達(dá)量分析、轉(zhuǎn)基因作物定量檢測(cè)等場(chǎng)景,為疾病診斷、科研探索提供量化數(shù)據(jù)支撐,是分子診斷領(lǐng)域不可或缺的工具。能夠準(zhǔn)確檢測(cè)食品中的轉(zhuǎn)基因成分...
熒光定量PCR儀的熔解曲線(xiàn)分析功能可驗(yàn)證擴(kuò)增產(chǎn)物特異性,有效區(qū)分非特異性產(chǎn)物。其原理是在PCR反應(yīng)結(jié)束后,逐步升高反應(yīng)溫度,監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)隨溫度的變化。特異性擴(kuò)增產(chǎn)物具有特定的熔解溫度(Tm值),而非特異性產(chǎn)物(如引物二聚體)的Tm值較低。通過(guò)分析熔解曲線(xiàn),可判斷擴(kuò)增產(chǎn)物是否為單一特異性產(chǎn)物。例如,在基因突變檢測(cè)中,熔解曲線(xiàn)分析可識(shí)別單堿基突變,通過(guò)Tm值差異區(qū)分野生型和突變型基因。某研究利用該技術(shù)檢測(cè)肺相關(guān)基因突變,發(fā)現(xiàn)某突變位點(diǎn)的Tm值與野生型差異明顯,為個(gè)體化提供了科學(xué)依據(jù)。此外,熔解曲線(xiàn)分析無(wú)需開(kāi)蓋操作,避免了氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn),提升了實(shí)驗(yàn)安全性。通過(guò)檢測(cè)孕婦外周血中的胎兒游離 DNA 或羊...
YELLOW 熒光定量 PCR 儀專(zhuān)為黃色熒光基團(tuán)設(shè)計(jì),其光學(xué)系統(tǒng)精細(xì)匹配黃色熒光的激發(fā)(580nm)與發(fā)射(605nm)波長(zhǎng),應(yīng)用場(chǎng)景聚焦于細(xì)菌耐藥基因檢測(cè)。黃色熒光基團(tuán)具有熒光信號(hào)強(qiáng)、抗干擾能力強(qiáng)的特點(diǎn),尤其適合檢測(cè)細(xì)菌樣本中高復(fù)雜度的核酸背景(如細(xì)菌基因組 DNA 干擾)。該設(shè)備通過(guò)雙重優(yōu)化提升檢測(cè)性能:一是光學(xué)濾鏡采用窄帶寬設(shè)計(jì),允許黃色熒光信號(hào)通過(guò),屏蔽細(xì)菌自身色素(如綠膿桿菌色素)的熒光干擾;二是擴(kuò)增程序優(yōu)化,針對(duì)耐藥基因(如 β- 內(nèi)酰胺類(lèi)耐藥基因 blaKPC)的序列特性,調(diào)整退火溫度與延伸時(shí)間,提升擴(kuò)增特異性。在臨床應(yīng)用中,例如醫(yī)院控制場(chǎng)景,可快速檢測(cè)患者樣本中是否存在耐藥基...
Texas Red熒光定量PCR儀通過(guò)580/610nm通道激發(fā)Texas Red標(biāo)記的探針,其高信噪比特性使其在基因突變分析中表現(xiàn)。該儀器采用高亮度LED光源,壽命長(zhǎng)達(dá)10萬(wàn)小時(shí),無(wú)需頻繁更換,降低了使用成本。在遺傳病診斷中,Texas Red通道可檢測(cè)脊髓性肌萎縮癥(SMA)患者的SMN1基因缺失,通過(guò)定量分析SMN1拷貝數(shù),為產(chǎn)前篩查提供可靠依據(jù)。例如,某醫(yī)院利用Texas Red熒光定量PCR儀對(duì)高危孕婦進(jìn)行SMA篩查,成功識(shí)別出多例SMN1基因缺失的胎兒,避免了遺傳病患兒的出生。此外,該儀器還支持熔解曲線(xiàn)分析功能,可驗(yàn)證擴(kuò)增產(chǎn)物特異性,有效區(qū)分非特異性產(chǎn)物,提升檢測(cè)準(zhǔn)確性。而熒光定量...
Texas Red 熒光定量 PCR 儀搭載的快速熱循環(huán)模塊采用半導(dǎo)體控溫技術(shù),升溫速率可達(dá) 6℃/s,降溫速率達(dá) 4℃/s,相比傳統(tǒng)金屬塊控溫(升溫速率 3℃/s),可將單次 PCR 反應(yīng)時(shí)間從 2 小時(shí)縮短至 1 小時(shí)。該模塊通過(guò)多點(diǎn)溫度傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)孔溫度,溫度均一性誤差 <±0.3℃,確保每個(gè)反應(yīng)孔的擴(kuò)增效率一致。結(jié)合 Texas Red 染料優(yōu)異的光穩(wěn)定性(光漂白半衰期> 5 小時(shí)),該儀器在微生物快速鑒定中表現(xiàn)突出,例如在食源性致病菌(如沙門(mén)氏菌、大腸桿菌 O157:H7)檢測(cè)中,可實(shí)現(xiàn) “樣本處理 - 核酸提取 - PCR 檢測(cè)” 全流程 2 小時(shí)內(nèi)完成,滿(mǎn)足食品安全應(yīng)急檢測(cè)...
Texas Red 熒光定量 PCR 儀搭載的快速熱循環(huán)模塊采用半導(dǎo)體控溫技術(shù),升溫速率可達(dá) 6℃/s,降溫速率達(dá) 4℃/s,相比傳統(tǒng)金屬塊控溫(升溫速率 3℃/s),可將單次 PCR 反應(yīng)時(shí)間從 2 小時(shí)縮短至 1 小時(shí)。該模塊通過(guò)多點(diǎn)溫度傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)孔溫度,溫度均一性誤差 <±0.3℃,確保每個(gè)反應(yīng)孔的擴(kuò)增效率一致。結(jié)合 Texas Red 染料優(yōu)異的光穩(wěn)定性(光漂白半衰期> 5 小時(shí)),該儀器在微生物快速鑒定中表現(xiàn)突出,例如在食源性致病菌(如沙門(mén)氏菌、大腸桿菌 O157:H7)檢測(cè)中,可實(shí)現(xiàn) “樣本處理 - 核酸提取 - PCR 檢測(cè)” 全流程 2 小時(shí)內(nèi)完成,滿(mǎn)足食品安全應(yīng)急檢測(cè)...
熒光定量 PCR 儀作為分子生物學(xué)設(shè)備,其原理是在 PCR 擴(kuò)增過(guò)程中,通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)實(shí)時(shí)捕獲熒光信號(hào)的動(dòng)態(tài)變化。與傳統(tǒng)終點(diǎn) PCR 能判斷靶標(biāo)有無(wú)不同,該設(shè)備可記錄每個(gè)擴(kuò)增循環(huán)的熒光強(qiáng)度,形成特征性擴(kuò)增曲線(xiàn),結(jié)合閾值設(shè)定與數(shù)據(jù)分析算法,實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸靶標(biāo)的精細(xì)定量。其精細(xì)性源于雙重保障:一是熒光信號(hào)與擴(kuò)增產(chǎn)物量的線(xiàn)性關(guān)聯(lián),確保信號(hào)強(qiáng)度真實(shí)反映靶標(biāo)濃度;二是特異性引物與熒光探針的協(xié)同作用,避免非特異性擴(kuò)增干擾。該功能廣泛應(yīng)用于臨床病原體載量檢測(cè)(如、乙肝病毒)、基因表達(dá)量分析、轉(zhuǎn)基因作物定量檢測(cè)等場(chǎng)景,為疾病診斷、科研探索提供量化數(shù)據(jù)支撐,是分子診斷領(lǐng)域不可或缺的工具。在多重 PCR 反應(yīng)中對(duì)不同的...
熒光定量 PCR 儀的質(zhì)控模塊是確保檢測(cè)結(jié)果可靠的 “安全閥”,其功能是實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過(guò)程中的關(guān)鍵參數(shù),及時(shí)識(shí)別異常并預(yù)警。該模塊通過(guò)三重質(zhì)控機(jī)制實(shí)現(xiàn):一是內(nèi)控基因監(jiān)測(cè),在反應(yīng)體系中加入內(nèi)控基因(如人源 RNase P 基因),若內(nèi)控基因未出現(xiàn)正常擴(kuò)增曲線(xiàn),提示樣本處理或反應(yīng)體系異常;二是擴(kuò)增效率分析,軟件自動(dòng)計(jì)算每個(gè)樣本的擴(kuò)增效率(理想范圍 1.8-2.2),效率偏離閾值時(shí)觸發(fā)警報(bào),避免因酶活性下降、引物失效導(dǎo)致的定量偏差;三是基線(xiàn)穩(wěn)定性監(jiān)測(cè),實(shí)時(shí)分析擴(kuò)增-15 個(gè)循環(huán)的背景熒光,若基線(xiàn)波動(dòng)超過(guò)閾值,提示環(huán)境光干擾或反應(yīng)管污染。在臨床檢測(cè)中,質(zhì)控模塊可有效避免假陰性 / 假陽(yáng)性結(jié)果:例如乙肝病...
熒光定量 PCR 儀憑借 “快速檢測(cè)” 特性,成為臨床病原體診斷的重要設(shè)備。其速度優(yōu)勢(shì)源于兩方面:一是快速溫控系統(tǒng),通過(guò) Peltier 元件實(shí)現(xiàn)快速升降溫,將傳統(tǒng) PCR 的 2-3 小時(shí)擴(kuò)增時(shí)間縮短至 1 小時(shí)內(nèi);二是自動(dòng)化樣本處理,配套的核酸提取儀可實(shí)現(xiàn) “樣本裂解 - 核酸純化” 自動(dòng)化,與 PCR 儀聯(lián)動(dòng)形成 “樣本進(jìn) - 結(jié)果出” 的一體化流程。在臨床場(chǎng)景中,該儀器可 1-2 小時(shí)內(nèi)完成從樣本處理到結(jié)果輸出的全流程,例如檢測(cè):咽拭子樣本經(jīng) 30 分鐘核酸提取后,PCR 儀通過(guò) 40 個(gè)循環(huán)擴(kuò)增(約 1 小時(shí)),即可通過(guò)熒光信號(hào)判斷是否陽(yáng)性,相比傳統(tǒng)病毒培養(yǎng)法(需 3-5 天)大幅縮...
ROX熒光定量PCR儀配備530/570nm檢測(cè)模塊,兼容ROX染料,其重要優(yōu)勢(shì)在于可校正樣本間熒光信號(hào)差異。在多重PCR實(shí)驗(yàn)中,不同反應(yīng)孔的熒光信號(hào)強(qiáng)度可能因試劑添加量、反應(yīng)體積等因素產(chǎn)生偏差,ROX染料作為被動(dòng)參考染料,其熒光強(qiáng)度與反應(yīng)總體積相關(guān),通過(guò)計(jì)算ROX信號(hào)與靶標(biāo)熒光信號(hào)的比值,可消除樣本間差異,提升定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如,某研究利用ROX熒光定量PCR儀檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV)載量,通過(guò)ROX校正后,不同樣本的檢測(cè)結(jié)果CV值從15%降至5%,明顯提升了實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。此外,ROX通道還可兼容HEX、JOE等黃色熒光標(biāo)記,支持多通道同步檢測(cè),滿(mǎn)足復(fù)雜實(shí)驗(yàn)需求。HEX 熒光定量 PCR...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)技術(shù)是針對(duì)珍貴樣本或微量樣本場(chǎng)景的關(guān)鍵優(yōu)化,其重要優(yōu)勢(shì)在于實(shí)現(xiàn)納升級(jí)(低至 1-10μL)反應(yīng)體系的穩(wěn)定檢測(cè)。該技術(shù)通過(guò)三重設(shè)計(jì)突破微量檢測(cè)瓶頸:光學(xué)系統(tǒng)采用高靈敏度光電倍增管或 CMOS 傳感器,可捕獲微弱熒光信號(hào);反應(yīng)模塊采用精細(xì)溫控技術(shù),確保微量反應(yīng)體系內(nèi)溫度均一性,避免局部擴(kuò)增效率差異;微量反應(yīng)管減少樣本吸附損耗,提升有效反應(yīng)濃度。這種設(shè)計(jì)不僅降低了樣本用量(為傳統(tǒng) PCR 的 1/10-1/5),減少珍貴樣本(如腦脊液、胚胎活檢組織)的損耗,還通過(guò)同步擴(kuò)增多個(gè)微量樣本,大幅提升檢測(cè) throughput。在臨床診斷中,可實(shí)現(xiàn)少量體液樣本的病原體篩查;在科...
Cy5.5 熒光定量 PCR 儀通過(guò)優(yōu)化光學(xué)系統(tǒng)和反應(yīng)體系,將檢測(cè)限降至 10 拷貝 /μL,其重要技術(shù)包括高數(shù)值孔徑(NA=0.8)的物鏡設(shè)計(jì)、低噪聲的制冷 CCD 檢測(cè)器(-20℃)以及高特異性的熱啟動(dòng) Taq 酶(酶活性抑制率 > 99% at 4℃)。在臨床體液樣本(如腦脊液、胸腹水)中微量病原體核酸檢測(cè)中,該儀器可有效檢測(cè)出低濃度的病毒或細(xì)菌核酸,例如在結(jié)核分枝桿菌(MTB)檢測(cè)中,傳統(tǒng) PCR 儀需靶標(biāo)濃度 > 100 拷貝 /μL 才能檢出,而該儀器可檢測(cè)到 10 拷貝 /μL 的 MTB 核酸,顯著提高了結(jié)核病的早期診斷率。此外,該儀器搭配的 Cy5.5 標(biāo)記探針具有莖環(huán)結(jié)構(gòu),...
熒光定量PCR儀通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)積累,可精細(xì)計(jì)算樣本中目標(biāo)核酸的初始濃度。其重要原理是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)或熒光探針,隨著PCR循環(huán)的進(jìn)行,熒光信號(hào)強(qiáng)度與產(chǎn)物量呈正相關(guān)。通過(guò)設(shè)定熒光閾值,儀器可計(jì)算達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)(Ct值),Ct值與樣本中目標(biāo)核酸的初始濃度呈負(fù)相關(guān)。例如,在病原體檢測(cè)中,熒光定量PCR儀可定量分析病毒載量,為疾病診斷和監(jiān)測(cè)提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。某研究利用該技術(shù)檢測(cè)(SARS-CoV-2)載量,發(fā)現(xiàn)高病毒載量患者病情更嚴(yán)重,為臨床分型提供了科學(xué)依據(jù)。此外,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)功能還可動(dòng)態(tài)觀察PCR反應(yīng)進(jìn)程,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。具有準(zhǔn)確的溫度控制系統(tǒng),確保 PCR 反應(yīng)在不同的溫度階段精...
TET 熒光定量 PCR 儀針對(duì)基因拷貝數(shù)變異(CNV)檢測(cè)的需求,開(kāi)發(fā)了低背景熒光抑制技術(shù),通過(guò)優(yōu)化反應(yīng)體系中的熒光淬滅劑濃度及儀器光學(xué)系統(tǒng)的激發(fā)光強(qiáng)度,可將非特異性熒光信號(hào)降低至檢測(cè)閾值以下(<100 RFU)。其適配的 TET 標(biāo)記引物在與靶標(biāo) DNA 結(jié)合后,可通過(guò)引物延伸過(guò)程釋放熒光信號(hào),避免了探針?lè)ㄖ刑结樤O(shè)計(jì)難度高的問(wèn)題,尤其適合復(fù)雜基因組區(qū)域(如重復(fù)序列區(qū))的 CNV 檢測(cè)。在臨床染色體異常檢測(cè)中,例如 21 三體綜合征(唐氏綜合征)的產(chǎn)前篩查,該儀器可通過(guò)檢測(cè)胎兒游離 DNA 中 21 號(hào)染色體特異性基因的拷貝數(shù),與正常二倍體樣本進(jìn)行對(duì)比,實(shí)現(xiàn)拷貝數(shù)差異的精細(xì)量化。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明...
定量熒光定量 PCR 儀主要支持定量與相對(duì)定量?jī)煞N模式,適配不同實(shí)驗(yàn)需求。定量需先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(如重組質(zhì)粒、體外轉(zhuǎn)錄 RNA),通過(guò)梯度稀釋后進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,生成 “標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù) - Ct 值” 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);檢測(cè)樣本時(shí),將樣本 Ct 值代入曲線(xiàn),即可計(jì)算出靶核酸的拷貝數(shù)(如 “1×10^4 拷貝 /mL”),該模式常用于病毒載量檢測(cè)(如乙肝病毒 DNA 定量)、微生物計(jì)數(shù)等場(chǎng)景,需精細(xì)掌握靶標(biāo)含量。相對(duì)定量則通過(guò)比較處理組與對(duì)照組的靶基因 Ct 值差異,采用 2^(-ΔΔCt) 法計(jì)算基因表達(dá)相對(duì)倍數(shù),無(wú)需制備標(biāo)準(zhǔn)品,操作更簡(jiǎn)便。例如在藥物研發(fā)中,檢測(cè)藥物處理組與對(duì)照組的抑制基因表...
熒光定量 PCR 儀檢測(cè)依托實(shí)時(shí)熒光信號(hào)采集技術(shù),打破傳統(tǒng) PCR “終點(diǎn)檢測(cè)” 的局限 —— 在 PCR 擴(kuò)增的變性、退火、延伸循環(huán)中,儀器通過(guò)激發(fā)光激發(fā)反應(yīng)體系中的熒光染料,再由高靈敏度檢測(cè)器動(dòng)態(tài)捕捉熒光信號(hào)變化。其重要邏輯是 “熒光信號(hào)強(qiáng)度與靶核酸擴(kuò)增產(chǎn)物量正相關(guān)”:定性分析通過(guò)判斷 Ct 值(熒光信號(hào)達(dá)閾值時(shí)的循環(huán)數(shù))是否小于設(shè)定閾值,確定樣本中是否存在靶基因;定量分析則通過(guò)將樣本 Ct 值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(橫坐標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù)、縱坐標(biāo)為 Ct 值),計(jì)算靶核酸的精確濃度。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域的基因表達(dá)差異研究,以及臨床中的病原體篩查,如乙肝病毒載量監(jiān)測(cè),相比傳統(tǒng) PCR 不僅實(shí)現(xiàn) ...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)技術(shù)不僅依賴(lài)硬件設(shè)計(jì),還通過(guò)緩沖液體系的專(zhuān)項(xiàng)優(yōu)化,解決微量樣本擴(kuò)增穩(wěn)定性不足的問(wèn)題。微量反應(yīng)體系(1-10μL)中,試劑濃度波動(dòng)、酶活性受抑等問(wèn)題更易凸顯,因此緩沖液需滿(mǎn)足三重需求:一是高保真 DNA 聚合酶,可在微量體系中精細(xì)識(shí)別引物結(jié)合位點(diǎn),降低錯(cuò)配率;二是增強(qiáng)型 dNTP 混合物,添加抗降解成分,避免微量 dNTP 因反復(fù)凍融失效;三是滲透壓調(diào)節(jié)劑,維持反應(yīng)體系滲透壓穩(wěn)定,防止微量樣本因蒸發(fā)導(dǎo)致濃度異常。這種優(yōu)化后的緩沖液與設(shè)備硬件形成協(xié)同:例如在檢測(cè)循環(huán) DNA(ctDNA,樣本量常低至納克級(jí))時(shí),可有效避免因樣本量少、擴(kuò)增效率低導(dǎo)致的假陰性,確保檢測(cè)靈敏...
高通量熒光定量PCR儀可搭載96孔或384孔反應(yīng)板,單次實(shí)驗(yàn)可完成數(shù)百個(gè)樣本的定量分析,明顯提升實(shí)驗(yàn)通量。該儀器采用自動(dòng)化機(jī)械臂聯(lián)用平臺(tái),可實(shí)現(xiàn)樣本加樣、PCR反應(yīng)、數(shù)據(jù)采集的全流程自動(dòng)化,減少人工操作誤差。在基因組學(xué)研究中,高通量熒光定量PCR儀可同時(shí)檢測(cè)數(shù)千個(gè)基因的表達(dá)水平,為基因功能研究提供數(shù)據(jù)支持。例如,某研究利用該技術(shù)分析組織中差異表達(dá)基因,發(fā)現(xiàn)多個(gè)與發(fā)展相關(guān)的關(guān)鍵基因,為靶向提供了新靶點(diǎn)。此外,高通量設(shè)計(jì)還支持大規(guī)模篩查項(xiàng)目,如新生兒遺傳病篩查或傳染病群體監(jiān)測(cè),可快速完成大量樣本的檢測(cè)任務(wù),提升公共衛(wèi)生服務(wù)能力。YELLOW 熒光定量 PCR 儀適配黃色熒光基團(tuán),助力細(xì)菌耐藥基因檢...
定量熒光定量 PCR 儀主要支持定量與相對(duì)定量?jī)煞N模式,適配不同實(shí)驗(yàn)需求。定量需先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(如重組質(zhì)粒、體外轉(zhuǎn)錄 RNA),通過(guò)梯度稀釋后進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,生成 “標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù) - Ct 值” 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);檢測(cè)樣本時(shí),將樣本 Ct 值代入曲線(xiàn),即可計(jì)算出靶核酸的拷貝數(shù)(如 “1×10^4 拷貝 /mL”),該模式常用于病毒載量檢測(cè)(如乙肝病毒 DNA 定量)、微生物計(jì)數(shù)等場(chǎng)景,需精細(xì)掌握靶標(biāo)含量。相對(duì)定量則通過(guò)比較處理組與對(duì)照組的靶基因 Ct 值差異,采用 2^(-ΔΔCt) 法計(jì)算基因表達(dá)相對(duì)倍數(shù),無(wú)需制備標(biāo)準(zhǔn)品,操作更簡(jiǎn)便。例如在藥物研發(fā)中,檢測(cè)藥物處理組與對(duì)照組的抑制基因表...