定量熒光定量 PCR 儀主要支持定量與相對(duì)定量?jī)煞N模式,適配不同實(shí)驗(yàn)需求。定量需先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(如重組質(zhì)粒、體外轉(zhuǎn)錄 RNA),通過(guò)梯度稀釋后進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,生成 “標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù) - Ct 值” 標(biāo)準(zhǔn)曲線;檢測(cè)樣本時(shí),將樣本 Ct 值代入曲線,即可計(jì)算出靶核酸的拷貝數(shù)(如 “1×10^4 拷貝 /mL”),該模式常用于病毒載量檢測(cè)(如乙肝病毒 DNA 定量)、微生物計(jì)數(shù)等場(chǎng)景,需精細(xì)掌握靶標(biāo)含量。相對(duì)定量則通過(guò)比較處理組與對(duì)照組的靶基因 Ct 值差異,采用 2^(-ΔΔCt) 法計(jì)算基因表達(dá)相對(duì)倍數(shù),無(wú)需制備標(biāo)準(zhǔn)品,操作更簡(jiǎn)便。例如在藥物研發(fā)中,檢測(cè)藥物處理組與對(duì)照組的抑制基因表...
FAM 熒光定量 PCR 儀以 FAM(羧基熒光素,發(fā)射波長(zhǎng) 520nm)為重要熒光報(bào)告染料,常與 TaqMan 探針技術(shù)結(jié)合實(shí)現(xiàn)特異性檢測(cè)。其原理為:TaqMan 探針兩端分別標(biāo)記 FAM 報(bào)告染料與淬滅劑(如 TAMRA),未擴(kuò)增時(shí)淬滅劑抑制 FAM 熒光;PCR 擴(kuò)增中,Taq 酶的 5'-3' 外切酶活性切割與靶基因互補(bǔ)結(jié)合的探針,使 FAM 與淬滅劑分離并釋放熒光,熒光強(qiáng)度隨靶基因擴(kuò)增呈指數(shù)增長(zhǎng)。該技術(shù)的重要優(yōu)勢(shì)是 “高特異性”—— 當(dāng)探針與靶基因序列完全互補(bǔ)時(shí)才會(huì)產(chǎn)生熒光,可有效避免引物二聚體等非特異性信號(hào)干擾。在病原體檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用較廣,例如檢測(cè)中,針對(duì) ORF1ab 基因設(shè)計(jì) F...
Texas Red 熒光定量 PCR 儀的特征發(fā)射波長(zhǎng)(585-605nm)與常用 FAM 染料(518nm)的發(fā)射波長(zhǎng)間隔明顯,可有效避免熒光串?dāng)_,實(shí)現(xiàn)雙重?zé)晒鈾z測(cè)。該儀器通過(guò)的光學(xué)濾波系統(tǒng),分別采集兩種染料的熒光信號(hào),無(wú)需進(jìn)行復(fù)雜的熒光補(bǔ)償校正,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程。在病原體共檢場(chǎng)景中,例如流感病毒 A/B 型聯(lián)合檢測(cè),可將 FAM 標(biāo)記流感 A 病毒探針、Texas Red 標(biāo)記流感 B 病毒探針加入同一反應(yīng)體系,通過(guò)該儀器一次檢測(cè)即可同時(shí)區(qū)分兩種病毒,相比傳統(tǒng)單通道 PCR 儀需分兩次檢測(cè)的方式,檢測(cè)效率提升 50% 以上,且節(jié)省了樣本用量(需 2μL 核酸模板)。此外,Texas Re...
定量熒光定量 PCR 儀主要支持定量與相對(duì)定量?jī)煞N模式,適配不同實(shí)驗(yàn)需求。定量需先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(如重組質(zhì)粒、體外轉(zhuǎn)錄 RNA),通過(guò)梯度稀釋后進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,生成 “標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù) - Ct 值” 標(biāo)準(zhǔn)曲線;檢測(cè)樣本時(shí),將樣本 Ct 值代入曲線,即可計(jì)算出靶核酸的拷貝數(shù)(如 “1×10^4 拷貝 /mL”),該模式常用于病毒載量檢測(cè)(如乙肝病毒 DNA 定量)、微生物計(jì)數(shù)等場(chǎng)景,需精細(xì)掌握靶標(biāo)含量。相對(duì)定量則通過(guò)比較處理組與對(duì)照組的靶基因 Ct 值差異,采用 2^(-ΔΔCt) 法計(jì)算基因表達(dá)相對(duì)倍數(shù),無(wú)需制備標(biāo)準(zhǔn)品,操作更簡(jiǎn)便。例如在藥物研發(fā)中,檢測(cè)藥物處理組與對(duì)照組的抑制基因表...
熒光定量 PCR 儀憑借 “快速檢測(cè)” 特性,成為臨床病原體診斷的重要設(shè)備。其速度優(yōu)勢(shì)源于兩方面:一是快速溫控系統(tǒng),通過(guò) Peltier 元件實(shí)現(xiàn)快速升降溫,將傳統(tǒng) PCR 的 2-3 小時(shí)擴(kuò)增時(shí)間縮短至 1 小時(shí)內(nèi);二是自動(dòng)化樣本處理,配套的核酸提取儀可實(shí)現(xiàn) “樣本裂解 - 核酸純化” 自動(dòng)化,與 PCR 儀聯(lián)動(dòng)形成 “樣本進(jìn) - 結(jié)果出” 的一體化流程。在臨床場(chǎng)景中,該儀器可 1-2 小時(shí)內(nèi)完成從樣本處理到結(jié)果輸出的全流程,例如檢測(cè):咽拭子樣本經(jīng) 30 分鐘核酸提取后,PCR 儀通過(guò) 40 個(gè)循環(huán)擴(kuò)增(約 1 小時(shí)),即可通過(guò)熒光信號(hào)判斷是否陽(yáng)性,相比傳統(tǒng)病毒培養(yǎng)法(需 3-5 天)大幅縮...
多通道熒光定量PCR儀支持FAM、SYBR Green I、Cy5等多色熒光標(biāo)記,可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)基因,明顯提升實(shí)驗(yàn)效率。該儀器采用模塊化光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),每個(gè)反應(yīng)孔配備光纖傳輸通道,避免通道間串?dāng)_,確保檢測(cè)準(zhǔn)確性。在基因表達(dá)分析中,多通道熒光定量PCR儀可同時(shí)檢測(cè)內(nèi)參基因和目標(biāo)基因的熒光信號(hào),通過(guò)相對(duì)定量法計(jì)算目標(biāo)基因的表達(dá)水平。例如,某研究利用該技術(shù)分析組織與正常組織中某基因的表達(dá)差異,發(fā)現(xiàn)組織中該基因表達(dá)量明顯上調(diào),為診斷提供了分子標(biāo)志物。此外,多通道設(shè)計(jì)還支持多重PCR實(shí)驗(yàn),可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)病原體或基因突變位點(diǎn),滿足復(fù)雜實(shí)驗(yàn)需求。擁有高靈敏度的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),能夠精確檢測(cè) TET 等熒光染料...
Cy5熒光定量PCR儀采用630/670nm檢測(cè)通道,專(zhuān)為Cy5熒光標(biāo)記的探針設(shè)計(jì),其高靈敏度特性可實(shí)現(xiàn)低至1拷貝的核酸檢測(cè)。該儀器通過(guò)半導(dǎo)體熱電模塊實(shí)現(xiàn)精確控溫,升溫速率達(dá)5.5℃/s,降溫速率4.5℃/s,確保PCR反應(yīng)的高效性。在標(biāo)志物檢測(cè)中,Cy5通道可精細(xì)識(shí)別HER2基因擴(kuò)增,為乳腺的分子分型提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。例如,某研究利用Cy5熒光定量PCR儀檢測(cè)乳腺組織樣本,發(fā)現(xiàn)HER2基因拷貝數(shù)與患者預(yù)后相關(guān),為臨床治療方案的制定提供了科學(xué)依據(jù)。此外,該儀器支持多通道同步檢測(cè),可同時(shí)分析Cy5與其他熒光標(biāo)記的靶標(biāo),提升實(shí)驗(yàn)效率。純度高、量子產(chǎn)率高的染料能產(chǎn)生更強(qiáng)熒光信號(hào);常州EVA-Green熒...
熒光定量 PCR 儀的檢測(cè)下限(低至 10 copies/μL)是實(shí)現(xiàn)病毒載量微量分析的性能指標(biāo),其通過(guò) “高靈敏度光學(xué)系統(tǒng) + 高效擴(kuò)增體系” 的協(xié)同設(shè)計(jì)達(dá)成。光學(xué)系統(tǒng)采用高量子效率的光電二極管(量子效率≥90%),可捕獲單個(gè)熒光分子的信號(hào);信號(hào)放大算法通過(guò)多次采樣平均,將微弱信號(hào)從背景噪音中提取出來(lái),實(shí)現(xiàn) “單分子級(jí)” 信號(hào)檢測(cè)。擴(kuò)增體系方面,采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶與防污染 dUTP/UNG 酶系統(tǒng):熱啟動(dòng)酶可避免低溫下的非特異性擴(kuò)增,提升靶標(biāo)擴(kuò)增效率;UNG 酶可降解殘留的 PCR 產(chǎn)物,防止交叉污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性。這種設(shè)計(jì)使其在病毒載量檢測(cè)中表現(xiàn)優(yōu)異:例如乙肝病毒低載量檢測(cè)(<200...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)模塊通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)的精細(xì)設(shè)計(jì),明顯降低非特異性干擾,保障微量樣本檢測(cè)的準(zhǔn)確性。該模塊的重要優(yōu)化包括三方面:一是采用激光聚焦技術(shù),將激發(fā)光精細(xì)聚焦于微量反應(yīng)體系(1-10μL),減少激發(fā)光散射導(dǎo)致的背景噪音;二是配備高特異性濾光片組,允許目標(biāo)熒光波長(zhǎng)通過(guò),屏蔽環(huán)境光與非特異性熒光(如引物二聚體熒光);三是采用光子計(jì)數(shù)技術(shù),對(duì)微弱熒光信號(hào)進(jìn)行精細(xì)計(jì)數(shù),提升信號(hào)檢測(cè)的信噪比。此外,模塊還整合了溫度補(bǔ)償功能,避免微量反應(yīng)體系因溫度波動(dòng)導(dǎo)致的熒光強(qiáng)度漂移。這些設(shè)計(jì)使設(shè)備在檢測(cè)納升級(jí)樣本時(shí),仍能保持優(yōu)異的特異性與重復(fù)性 —— 例如在檢測(cè)腦脊液中的病毒核酸時(shí),可有效排除體液中蛋白...
熒光熒光定量 PCR 儀的高靈敏度源于其優(yōu)化的熒光檢測(cè)系統(tǒng):采用高量子效率的 CCD 檢測(cè)器或光電倍增管,可捕捉單個(gè)熒光分子發(fā)出的信號(hào);同時(shí)通過(guò)窄帶濾光片減少背景光干擾,基線噪聲控制在 0.1 熒光單位以下,確保微弱信號(hào)可被有效識(shí)別。該特性使其比較低檢測(cè)限可達(dá) “單拷貝靶核酸”,能精細(xì)檢測(cè)低豐度樣本 —— 例如循環(huán) DNA(ctDNA)檢測(cè)中,ctDNA 在血液中含量為 1-100 拷貝 /mL,傳統(tǒng)檢測(cè)方法易漏檢,而該儀器可通過(guò)多次循環(huán)擴(kuò)增放大信號(hào),準(zhǔn)確捕捉 ctDNA 熒光信號(hào),為早期診斷提供可能。在病原體早期檢測(cè)中也發(fā)揮關(guān)鍵作用,如病毒(HIV)窗口期,患者體內(nèi)病毒載量極低,儀器可通過(guò)高...
ROX熒光定量PCR儀配備530/570nm檢測(cè)模塊,兼容ROX染料,其重要優(yōu)勢(shì)在于可校正樣本間熒光信號(hào)差異。在多重PCR實(shí)驗(yàn)中,不同反應(yīng)孔的熒光信號(hào)強(qiáng)度可能因試劑添加量、反應(yīng)體積等因素產(chǎn)生偏差,ROX染料作為被動(dòng)參考染料,其熒光強(qiáng)度與反應(yīng)總體積相關(guān),通過(guò)計(jì)算ROX信號(hào)與靶標(biāo)熒光信號(hào)的比值,可消除樣本間差異,提升定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如,某研究利用ROX熒光定量PCR儀檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV)載量,通過(guò)ROX校正后,不同樣本的檢測(cè)結(jié)果CV值從15%降至5%,明顯提升了實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。此外,ROX通道還可兼容HEX、JOE等黃色熒光標(biāo)記,支持多通道同步檢測(cè),滿足復(fù)雜實(shí)驗(yàn)需求。染料的純度、熒光量子產(chǎn)率...
TET 熒光定量 PCR 儀針對(duì)基因組 DNA 甲基化檢測(cè)的特殊性,開(kāi)發(fā)了支持 TET 標(biāo)記甲基化特異性探針的檢測(cè)系統(tǒng),其重要原理是通過(guò)亞硫酸氫鹽處理將未甲基化的胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)化為尿嘧啶(U),而甲基化的 C 保持不變,再利用 TET 標(biāo)記的特異性探針(結(jié)合甲基化 C 位點(diǎn))檢測(cè)靶標(biāo)區(qū)域。該儀器通過(guò)熒光信號(hào)差值分析(處理后樣本與未處理樣本的熒光信號(hào)差),可精細(xì)量化甲基化水平(0-100%),解決了傳統(tǒng)甲基化檢測(cè)中定性或半定量的局限性。在表觀遺傳學(xué)研究中,例如乳腺中 BRCA1 基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化檢測(cè),該儀器可檢測(cè)到低至 5% 的甲基化水平變化,為發(fā)生機(jī)制研究提供精細(xì)數(shù)據(jù)。此外,該儀器配套的甲基...
熒光定量 PCR 儀的自動(dòng)化功能是實(shí)驗(yàn)室高效運(yùn)轉(zhuǎn)的關(guān)鍵支撐,其重要在于整合全流程自動(dòng)化模塊,覆蓋從樣本加載到結(jié)果輸出的全環(huán)節(jié)。硬件上,設(shè)備配備自動(dòng)進(jìn)樣器(可兼容 96 孔 / 384 孔反應(yīng)板),支持批量樣本自動(dòng)裝載,無(wú)需人工逐孔添加;樣本條碼識(shí)別系統(tǒng)可關(guān)聯(lián)樣本信息與檢測(cè)數(shù)據(jù),避免樣本混淆;反應(yīng)結(jié)束后,嵌入式軟件自動(dòng)完成數(shù)據(jù)分析、結(jié)果判讀,并生成標(biāo)準(zhǔn)化報(bào)告,可直接導(dǎo)出至實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)(LIS)。自動(dòng)化設(shè)計(jì)的優(yōu)勢(shì)明顯:一是減少人為操作誤差(如加樣偏差、數(shù)據(jù)記錄錯(cuò)誤),提升結(jié)果重復(fù)性;二是解放人力,單臺(tái)設(shè)備可同時(shí)處理多批次樣本,在大規(guī)模核酸篩查、臨床批量檢測(cè)場(chǎng)景中,能將日均檢測(cè)量提升 3-5 倍;...
ROX熒光定量PCR儀配備530/570nm檢測(cè)模塊,兼容ROX染料,其重要優(yōu)勢(shì)在于可校正樣本間熒光信號(hào)差異。在多重PCR實(shí)驗(yàn)中,不同反應(yīng)孔的熒光信號(hào)強(qiáng)度可能因試劑添加量、反應(yīng)體積等因素產(chǎn)生偏差,ROX染料作為被動(dòng)參考染料,其熒光強(qiáng)度與反應(yīng)總體積相關(guān),通過(guò)計(jì)算ROX信號(hào)與靶標(biāo)熒光信號(hào)的比值,可消除樣本間差異,提升定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如,某研究利用ROX熒光定量PCR儀檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV)載量,通過(guò)ROX校正后,不同樣本的檢測(cè)結(jié)果CV值從15%降至5%,明顯提升了實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。此外,ROX通道還可兼容HEX、JOE等黃色熒光標(biāo)記,支持多通道同步檢測(cè),滿足復(fù)雜實(shí)驗(yàn)需求。如 FAM、ROX 等常...
熒光定量PCR儀的定量功能通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線法,可精確測(cè)定樣本中目標(biāo)核酸的拷貝數(shù)。其原理是利用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,將樣本的Ct值代入曲線方程,計(jì)算樣本中目標(biāo)核酸的初始濃度。在病毒載量檢測(cè)中,定量功能可準(zhǔn)確測(cè)定病毒拷貝數(shù),為疾病診斷和監(jiān)測(cè)提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。例如,某研究利用該技術(shù)檢測(cè)HIV者血漿中的病毒載量,發(fā)現(xiàn)病毒載量與疾病進(jìn)展明顯相關(guān),為抗病毒方案的調(diào)整提供了科學(xué)依據(jù)。此外,定量功能還可用于轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)、微生物群落定量等領(lǐng)域,通過(guò)精確測(cè)定目標(biāo)核酸的拷貝數(shù),為相關(guān)研究提供量化數(shù)據(jù)支持。可快速檢測(cè)食品中的有害微生物,如大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌等。蘇州FAM熒光定量PCR儀功能VIC 熒...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)技術(shù)高度適配臨床中體液、組織活檢等微量樣本場(chǎng)景,解決了傳統(tǒng)檢測(cè)中 “樣本量不足無(wú)法檢測(cè)” 的痛點(diǎn)。臨床中,許多樣本(如腦脊液、胸腔積液、穿刺活檢組織)的獲取量極少(幾十至幾百微升),且難以重復(fù)取樣,微量檢測(cè)技術(shù)可實(shí)現(xiàn) “少量樣本多項(xiàng)目檢測(cè)”:例如 100μL 腦脊液樣本,可分為 3-5 份微量反應(yīng)體系,同時(shí)檢測(cè)病毒(如巨細(xì)胞病毒)、細(xì)菌(如結(jié)核分枝桿菌)與(如隱球菌)。設(shè)備針對(duì)不同臨床樣本的特性還做了專(zhuān)項(xiàng)優(yōu)化:檢測(cè)血液樣本時(shí),加入核酸提取增效劑,提升微量血液中病毒核酸的提取效率;檢測(cè)組織活檢樣本時(shí),優(yōu)化裂解液配方,充分釋放組織中的微量核酸。在神經(jīng)科臨床中,通過(guò)微量...
HEX 熒光定量 PCR 儀是針對(duì) HEX 熒光染料優(yōu)化的設(shè)備,其光學(xué)系統(tǒng)精細(xì)匹配 HEX 染料的激發(fā)波長(zhǎng)(535nm)與發(fā)射波長(zhǎng)(556nm),可高效捕獲特異性熒光信號(hào)。HEX 染料屬于熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)染料,常用于多重 PCR 反應(yīng)中的輔助檢測(cè)通道,與 FAM、VIC 等染料的發(fā)射光譜無(wú)重疊,可實(shí)現(xiàn)多靶標(biāo)同時(shí)檢測(cè)。該設(shè)備的重要優(yōu)勢(shì)在于信號(hào)區(qū)分度高,通過(guò)光學(xué)濾鏡的精細(xì)篩選,避免不同染料間的熒光串?dāng)_,確保每個(gè)靶標(biāo)的信號(hào)采集。在應(yīng)用場(chǎng)景中,常與其他通道聯(lián)合使用:例如在呼吸道病原體篩查中,F(xiàn)AM 通道檢測(cè),HEX 通道檢測(cè)流感病毒,可同時(shí)明確兩種病原體狀態(tài);在遺傳病檢測(cè)中,可同時(shí)檢測(cè)致病...
定量熒光定量 PCR 儀主要支持定量與相對(duì)定量?jī)煞N模式,適配不同實(shí)驗(yàn)需求。定量需先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(如重組質(zhì)粒、體外轉(zhuǎn)錄 RNA),通過(guò)梯度稀釋后進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,生成 “標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù) - Ct 值” 標(biāo)準(zhǔn)曲線;檢測(cè)樣本時(shí),將樣本 Ct 值代入曲線,即可計(jì)算出靶核酸的拷貝數(shù)(如 “1×10^4 拷貝 /mL”),該模式常用于病毒載量檢測(cè)(如乙肝病毒 DNA 定量)、微生物計(jì)數(shù)等場(chǎng)景,需精細(xì)掌握靶標(biāo)含量。相對(duì)定量則通過(guò)比較處理組與對(duì)照組的靶基因 Ct 值差異,采用 2^(-ΔΔCt) 法計(jì)算基因表達(dá)相對(duì)倍數(shù),無(wú)需制備標(biāo)準(zhǔn)品,操作更簡(jiǎn)便。例如在藥物研發(fā)中,檢測(cè)藥物處理組與對(duì)照組的抑制基因表...
熒光定量 PCR 儀的質(zhì)控模塊是確保檢測(cè)結(jié)果可靠的 “安全閥”,其功能是實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過(guò)程中的關(guān)鍵參數(shù),及時(shí)識(shí)別異常并預(yù)警。該模塊通過(guò)三重質(zhì)控機(jī)制實(shí)現(xiàn):一是內(nèi)控基因監(jiān)測(cè),在反應(yīng)體系中加入內(nèi)控基因(如人源 RNase P 基因),若內(nèi)控基因未出現(xiàn)正常擴(kuò)增曲線,提示樣本處理或反應(yīng)體系異常;二是擴(kuò)增效率分析,軟件自動(dòng)計(jì)算每個(gè)樣本的擴(kuò)增效率(理想范圍 1.8-2.2),效率偏離閾值時(shí)觸發(fā)警報(bào),避免因酶活性下降、引物失效導(dǎo)致的定量偏差;三是基線穩(wěn)定性監(jiān)測(cè),實(shí)時(shí)分析擴(kuò)增-15 個(gè)循環(huán)的背景熒光,若基線波動(dòng)超過(guò)閾值,提示環(huán)境光干擾或反應(yīng)管污染。在臨床檢測(cè)中,質(zhì)控模塊可有效避免假陰性 / 假陽(yáng)性結(jié)果:例如乙肝病...
熒光定量 PCR 儀的重要功能由三大模塊協(xié)同支撐:其一,精細(xì)溫控模塊采用 Peltier 半導(dǎo)體元件,可實(shí)現(xiàn) 5℃/s 的升降溫速率,溫控精度達(dá) ±0.1℃,能?chē)?yán)格把控 PCR 各階段溫度(如 95℃變性、55-65℃退火、72℃延伸),避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增;其二,多通道熒光檢測(cè)系統(tǒng)配備 4-5 組特定波長(zhǎng)濾光片,可匹配不同熒光染料(如 FAM、VIC),滿足單管多靶標(biāo)檢測(cè)需求;其三,內(nèi)置數(shù)據(jù)分析軟件具備基線自動(dòng)校正、閾值智能設(shè)定、標(biāo)準(zhǔn)曲線生成等功能,還支持導(dǎo)出包含 Ct 值、熔解曲線、定量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)化報(bào)告。這些功能的協(xié)同作用,既能滿足科研中 “多基因同步檢測(cè)” 的需求,也能適配臨床...
Cy5熒光定量PCR儀采用630/670nm檢測(cè)通道,專(zhuān)為Cy5熒光標(biāo)記的探針設(shè)計(jì),其高靈敏度特性可實(shí)現(xiàn)低至1拷貝的核酸檢測(cè)。該儀器通過(guò)半導(dǎo)體熱電模塊實(shí)現(xiàn)精確控溫,升溫速率達(dá)5.5℃/s,降溫速率4.5℃/s,確保PCR反應(yīng)的高效性。在標(biāo)志物檢測(cè)中,Cy5通道可精細(xì)識(shí)別HER2基因擴(kuò)增,為乳腺的分子分型提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。例如,某研究利用Cy5熒光定量PCR儀檢測(cè)乳腺組織樣本,發(fā)現(xiàn)HER2基因拷貝數(shù)與患者預(yù)后相關(guān),為臨床治療方案的制定提供了科學(xué)依據(jù)。此外,該儀器支持多通道同步檢測(cè),可同時(shí)分析Cy5與其他熒光標(biāo)記的靶標(biāo),提升實(shí)驗(yàn)效率。核酸濃度和純度:核酸濃度過(guò)低會(huì)使檢測(cè)難度增加;徐州EVA-Green...
HEX 熒光定量 PCR 儀在信號(hào)采集效率上具備明顯優(yōu)勢(shì),其光學(xué)檢測(cè)模塊采用高速信號(hào)采集芯片,可實(shí)現(xiàn)每循環(huán) 0.1 秒內(nèi)完成 HEX 熒光信號(hào)的捕獲與轉(zhuǎn)換,同時(shí)同步輸出擴(kuò)增曲線與實(shí)時(shí)熒光強(qiáng)度數(shù)據(jù)。這種快速采集設(shè)計(jì)的重要價(jià)值在于:一是縮短整體檢測(cè)時(shí)間,例如在 96 孔板檢測(cè)中,單輪擴(kuò)增(40 個(gè)循環(huán))的信號(hào)采集總耗時(shí)可減少 5-8 分鐘,提升實(shí)驗(yàn)室 throughput;二是捕捉瞬時(shí)熒光變化,在擴(kuò)增早期( 個(gè)循環(huán)),靶標(biāo)濃度低、熒光信號(hào)弱,快速采集可避免信號(hào)遺漏,提升低豐度靶標(biāo)的檢出率;三是數(shù)據(jù)實(shí)時(shí)同步,擴(kuò)增曲線與熒光數(shù)據(jù)同步傳輸至軟件,用戶(hù)可實(shí)時(shí)觀察擴(kuò)增趨勢(shì),及時(shí)發(fā)現(xiàn)異常(如擴(kuò)增停滯、信號(hào)驟降...
熒光定量 PCR 儀的梯度溫控功能是提升實(shí)驗(yàn)可靠性的關(guān)鍵設(shè)計(jì):儀器加熱模塊分為 8-12 個(gè)溫控區(qū)域,每個(gè)區(qū)域可設(shè)置 1-10℃的溫度梯度(如 55℃-65℃,間隔 1℃),可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)退火溫度的 PCR 擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。該功能的重要價(jià)值是 “優(yōu)化引物退火溫度”—— 引物退火溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致引物無(wú)法與模板結(jié)合,擴(kuò)增效率驟降;溫度過(guò)低則會(huì)引發(fā)引物非特異性結(jié)合,產(chǎn)生雜帶。通過(guò)梯度溫控,可一次性篩選出比較好退火溫度:選擇 Ct 值小、熔解曲線單一(無(wú)雜峰)的溫度作為比較好條件,后續(xù)實(shí)驗(yàn)采用該溫度可比較大化擴(kuò)增效率,減少非特異性產(chǎn)物。例如在新引物驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中,若直接使用預(yù)估的退火溫度,可能出現(xiàn) “無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物”...
Texas Red 熒光定量 PCR 儀的特征發(fā)射波長(zhǎng)(585-605nm)與常用 FAM 染料(518nm)的發(fā)射波長(zhǎng)間隔明顯,可有效避免熒光串?dāng)_,實(shí)現(xiàn)雙重?zé)晒鈾z測(cè)。該儀器通過(guò)的光學(xué)濾波系統(tǒng),分別采集兩種染料的熒光信號(hào),無(wú)需進(jìn)行復(fù)雜的熒光補(bǔ)償校正,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程。在病原體共檢場(chǎng)景中,例如流感病毒 A/B 型聯(lián)合檢測(cè),可將 FAM 標(biāo)記流感 A 病毒探針、Texas Red 標(biāo)記流感 B 病毒探針加入同一反應(yīng)體系,通過(guò)該儀器一次檢測(cè)即可同時(shí)區(qū)分兩種病毒,相比傳統(tǒng)單通道 PCR 儀需分兩次檢測(cè)的方式,檢測(cè)效率提升 50% 以上,且節(jié)省了樣本用量(需 2μL 核酸模板)。此外,Texas Re...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)技術(shù)高度適配臨床中體液、組織活檢等微量樣本場(chǎng)景,解決了傳統(tǒng)檢測(cè)中 “樣本量不足無(wú)法檢測(cè)” 的痛點(diǎn)。臨床中,許多樣本(如腦脊液、胸腔積液、穿刺活檢組織)的獲取量極少(幾十至幾百微升),且難以重復(fù)取樣,微量檢測(cè)技術(shù)可實(shí)現(xiàn) “少量樣本多項(xiàng)目檢測(cè)”:例如 100μL 腦脊液樣本,可分為 3-5 份微量反應(yīng)體系,同時(shí)檢測(cè)病毒(如巨細(xì)胞病毒)、細(xì)菌(如結(jié)核分枝桿菌)與(如隱球菌)。設(shè)備針對(duì)不同臨床樣本的特性還做了專(zhuān)項(xiàng)優(yōu)化:檢測(cè)血液樣本時(shí),加入核酸提取增效劑,提升微量血液中病毒核酸的提取效率;檢測(cè)組織活檢樣本時(shí),優(yōu)化裂解液配方,充分釋放組織中的微量核酸。在神經(jīng)科臨床中,通過(guò)微量...
熒光定量 PCR 儀的微量檢測(cè)技術(shù)是針對(duì)珍貴樣本或微量樣本場(chǎng)景的關(guān)鍵優(yōu)化,其重要優(yōu)勢(shì)在于實(shí)現(xiàn)納升級(jí)(低至 1-10μL)反應(yīng)體系的穩(wěn)定檢測(cè)。該技術(shù)通過(guò)三重設(shè)計(jì)突破微量檢測(cè)瓶頸:光學(xué)系統(tǒng)采用高靈敏度光電倍增管或 CMOS 傳感器,可捕獲微弱熒光信號(hào);反應(yīng)模塊采用精細(xì)溫控技術(shù),確保微量反應(yīng)體系內(nèi)溫度均一性,避免局部擴(kuò)增效率差異;微量反應(yīng)管減少樣本吸附損耗,提升有效反應(yīng)濃度。這種設(shè)計(jì)不僅降低了樣本用量(為傳統(tǒng) PCR 的 1/10-1/5),減少珍貴樣本(如腦脊液、胚胎活檢組織)的損耗,還通過(guò)同步擴(kuò)增多個(gè)微量樣本,大幅提升檢測(cè) throughput。在臨床診斷中,可實(shí)現(xiàn)少量體液樣本的病原體篩查;在科...
熒光熒光定量 PCR 儀的高靈敏度源于其優(yōu)化的熒光檢測(cè)系統(tǒng):采用高量子效率的 CCD 檢測(cè)器或光電倍增管,可捕捉單個(gè)熒光分子發(fā)出的信號(hào);同時(shí)通過(guò)窄帶濾光片減少背景光干擾,基線噪聲控制在 0.1 熒光單位以下,確保微弱信號(hào)可被有效識(shí)別。該特性使其比較低檢測(cè)限可達(dá) “單拷貝靶核酸”,能精細(xì)檢測(cè)低豐度樣本 —— 例如循環(huán) DNA(ctDNA)檢測(cè)中,ctDNA 在血液中含量為 1-100 拷貝 /mL,傳統(tǒng)檢測(cè)方法易漏檢,而該儀器可通過(guò)多次循環(huán)擴(kuò)增放大信號(hào),準(zhǔn)確捕捉 ctDNA 熒光信號(hào),為早期診斷提供可能。在病原體早期檢測(cè)中也發(fā)揮關(guān)鍵作用,如病毒(HIV)窗口期,患者體內(nèi)病毒載量極低,儀器可通過(guò)高...
定量熒光定量 PCR 儀主要支持定量與相對(duì)定量?jī)煞N模式,適配不同實(shí)驗(yàn)需求。定量需先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(如重組質(zhì)粒、體外轉(zhuǎn)錄 RNA),通過(guò)梯度稀釋后進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,生成 “標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù) - Ct 值” 標(biāo)準(zhǔn)曲線;檢測(cè)樣本時(shí),將樣本 Ct 值代入曲線,即可計(jì)算出靶核酸的拷貝數(shù)(如 “1×10^4 拷貝 /mL”),該模式常用于病毒載量檢測(cè)(如乙肝病毒 DNA 定量)、微生物計(jì)數(shù)等場(chǎng)景,需精細(xì)掌握靶標(biāo)含量。相對(duì)定量則通過(guò)比較處理組與對(duì)照組的靶基因 Ct 值差異,采用 2^(-ΔΔCt) 法計(jì)算基因表達(dá)相對(duì)倍數(shù),無(wú)需制備標(biāo)準(zhǔn)品,操作更簡(jiǎn)便。例如在藥物研發(fā)中,檢測(cè)藥物處理組與對(duì)照組的抑制基因表...
JOE 熒光定量 PCR 儀以 548nm 為特征發(fā)射波長(zhǎng),該波長(zhǎng)可避開(kāi)植物樣本中葉綠素(主要吸收 400-500nm 藍(lán)光)和類(lèi)胡蘿卜素(吸收 450-550nm 綠光)的熒光干擾峰,解決了傳統(tǒng) PCR 儀在植物樣本檢測(cè)中背景信號(hào)過(guò)高的問(wèn)題。其適配的植物病毒檢測(cè) JOE 探針,針對(duì)植物病毒基因組的保守區(qū)域設(shè)計(jì),具有高特異性,可有效區(qū)分同源性高達(dá) 95% 的不同病毒株系。例如在番茄黃化曲葉病毒(TYLCV)檢測(cè)中,該儀器可通過(guò)檢測(cè)番茄葉片提取的核酸樣本,在含有大量葉綠素的情況下,仍能精細(xì)捕捉到 JOE 探針的熒光信號(hào),檢測(cè)靈敏度可達(dá) 100 拷貝 /μL,且無(wú)假陽(yáng)性結(jié)果。此外,該儀器針對(duì)植物樣...
熒光熒光定量 PCR 儀的多通道設(shè)計(jì)(通常為 4-5 通道)可同時(shí)檢測(cè)多種熒光染料,實(shí)現(xiàn)單管多重檢測(cè),大幅提升實(shí)驗(yàn)效率。每個(gè)通道對(duì)應(yīng)特定激發(fā)與發(fā)射波長(zhǎng),例如通道 1(FAM:激發(fā) 488nm / 發(fā)射 520nm)、通道 2(VIC:激發(fā) 532nm / 發(fā)射 550nm)、通道 3(ROX:激發(fā) 575nm / 發(fā)射 602nm),各通道信號(hào)互不干擾,可同時(shí)采集不同熒光信號(hào)。單管多重檢測(cè)的重要優(yōu)勢(shì)包括:一是減少樣本用量,例如在標(biāo)志物檢測(cè)中,需 10μL 血清樣本即可同時(shí)檢測(cè) 3-4 個(gè)相關(guān)基因,避免樣本量不足導(dǎo)致的檢測(cè)局限;二是降低實(shí)驗(yàn)成本,單管檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)可減少試劑消耗(如酶、引物、探針)...