天津熱原檢測商業(yè)化試劑盒

來源： 發(fā)布時間：2025-10-05

中國藥典對 MAT 法熱原檢測要求 4 復孔，未明確 CV 限值，需結合細胞實驗特性合理解讀與操作。藥典不設 CV 限值的主要原因是：MAT 法基于細胞反應，細胞活性易受環(huán)境微小變化（如溫度、pH）影響，存在天然不穩(wěn)定性，過嚴的 CV 要求可能脫離實際；但實驗室可通過積累多批次數(shù)據(jù)，制定內(nèi)部 CV 控制范圍（如定量上下限 CV≤30%、25%），確保檢測重復性。關于 3 復孔的適用性：若長期數(shù)據(jù)顯示 CV 控制良好（如連續(xù) 10 批次 CV<20%），且樣品為中間過程檢測（非 QC 放行），可嘗試 3 復孔，但需同步設置加標對照，驗證結果可靠性；若為 QC 放行檢測，仍建議按 4 復孔操作，符合藥典下限要求。對于異常點處理，可采用狄克遜準則（Q 檢驗）等統(tǒng)計學方法 —— 如某復孔 IL-6 檢測值偏離平均值 30% 以上，且無明顯操作誤差（如加樣錯誤），可判定為異常點并剔除，但需在原始記錄中詳細說明原因，確保數(shù)據(jù)可追溯，避免隨意剔除導致結果失真。
熱作為一種能引起人體溫異常升高的物質(zhì)，一旦存在于藥品、醫(yī)療器械等產(chǎn)品中，將給患者帶來嚴重的健康風險。天津熱原檢測商業(yè)化試劑盒

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熱原檢測MAT法的法規(guī)地位持續(xù)提升，已成為多國藥典認可的熱原檢測替代方法。歐洲藥典（EP）是推動 MAT 應用的關鍵力量：通則 2.6.30 明確 MAT 可替代家兔熱原試驗（RPT），且能同時檢測內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素熱原；2024 年歐洲藥典委員會批準刪除所有條款中的家兔法，修訂文本將于 2025 年7月1日生效，強制鼓勵使用 MAT 等體外替代方法。美國藥典（USP）<151> 規(guī)定，經(jīng)驗證的體外熱原試驗（如 MAT）可替代家兔法，且需依據(jù) USP<1225>開展驗證；FDA 行業(yè)指南進一步明確 MAT 的合規(guī)性。中國藥典 2020 年版通則 9301 將 MAT 列為熱原檢查的補充方法，雖暫未替代家兔法，但明確其適用于復雜基質(zhì)樣品的全熱原篩查。此外，ISO 10993-1、ICCVAM 等國際標準也優(yōu)先推薦體外熱原檢測模型，全球法規(guī)協(xié)同推動 MAT 成為熱原檢測的主流技術。
江蘇血液制品熱原檢測技術升級湖州申科 MAT法熱原檢測試劑盒細胞復融后可直接使用，無需離心復蘇，24 小時內(nèi)出檢測結果。

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含消除炎癥成分的樣品可能抑制 IL-6 產(chǎn)生，需通過科學評估排除干擾，確保 MAT 法熱原檢測結果準確。根據(jù)藥典要求，若樣品能抑制單核細胞促炎癥因子釋放，需通過以下步驟驗證適用性：首先，選擇樣品 A、2A、4A 倍稀釋（均不超過上限有效稀釋倍數(shù) MVD），避免高濃度消除炎癥成分過度抑制；其次，進行供試品加標回收率實驗，若回收率在 50%-200% 的合格范圍，說明消除炎癥成分未影響熱原檢測；再對比 “供試品配制的標曲” 與 “稀釋液配制的標曲”，若兩者 IL-6 檢測值相差在 ±20% 以內(nèi)，表明樣品基質(zhì)對檢測無系統(tǒng)性干擾。例如，某消除炎癥單抗樣品經(jīng) 2 倍稀釋后，加標回收率達 120%，兩種標曲 IL-6 值相差 15%，判定可適用 MAT 法。若出現(xiàn)回收率偏低（<50%），可嘗試增加稀釋倍數(shù)（如 8A 倍）或采用熱滅活（若樣品耐熱）去除消除炎癥活性；若仍無法排除干擾，需結合家兔法進行對比驗證，避免因消除炎癥成分導致假陰性。

PyroSHENTEK®熱原檢測試劑盒（貨號 1502100，規(guī)格 96 測試 / 盒）優(yōu)勢在于搭載 MAT 特定單核細胞系，細胞表面表達多種 Toll 樣受體（TLR），可響應不同類型熱原。該細胞系來源清晰、可溯源，均一性強且無供體依賴，有效規(guī)避了傳統(tǒng) PBMC 因供體差異導致的結果波動，同時安全風險低，無需擔憂外源因子污染。試劑盒采用 “標準化單核細胞 + ELISA 檢測” 一體化體系，通過嚴格的細胞質(zhì)量控制（如凍存復融后活率達標），確保每次檢測的細胞狀態(tài)一致；搭配預包被 IL-6 抗體的酶標板與配套試劑，進一步減少體系誤差。從標曲數(shù)據(jù)來看，其擬合采用 4-Parameter Logistic 模型，R2 達 1.000，EC50 為 0.119EU/mL，參數(shù)置信區(qū)間穩(wěn)定，復孔結果重復性優(yōu)異，能為熱原定量提供準確如一的數(shù)據(jù)支撐，避免因體系不穩(wěn)定導致的檢測偏差。
MAT熱原檢測通過熱原活化單核細胞釋放促炎細胞因子，再經(jīng)ELISA定量 IL-6判斷供試品是否合格。

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PBMC（外周血單個核細胞）的復雜制備流程嚴重制約熱原檢測效率。首先，血源獲取受獻血者數(shù)量、時間及采集血液政策限制，無法按需即時獲取；其次，需嚴格執(zhí)行 EP2.6.30 規(guī)定的標志物檢測，增加前期準備時間；再進行采集血液、分離單核細胞、凍存等環(huán)節(jié)需全程無菌操作，步驟繁瑣且易引入污染風險。相比之下，單核細胞系可工業(yè)化培養(yǎng)，制備流程簡單可控，能快速提供合格細胞，避免因 PBMC 制備延誤熱原檢測進度，更適配批量樣品的高效質(zhì)控。PyroSHENTEK 熱原檢測（MAT）試劑盒的單核細胞系無需供體，避免PBMC血源供應受限及標志物檢測環(huán)節(jié)。江蘇血液制品熱原檢測技術升級

保持細胞活性穩(wěn)定，是實現(xiàn)準確熱原檢測的基礎條件。天津熱原檢測商業(yè)化試劑盒

隨著發(fā)熱反應分子機制研究的不斷深化，單核細胞活化試驗（MAT）作為一種體外熱原檢測技術，愈發(fā)受到醫(yī)藥與醫(yī)療器械行業(yè)的關注并逐步推廣應用。該方法的原理是：讓人體全血與待檢樣品中的熱原充分接觸后，通過檢測體系中產(chǎn)生的 IL-1β、IL-6（因穩(wěn)定性強、重復性優(yōu)，常作為關鍵檢測指標）、TNF 等促炎細胞因子含量，實現(xiàn)對熱原污染程度的評估，整個過程能高度模擬人體先天免疫系統(tǒng)對熱原的應答反應。相較于傳統(tǒng)熱原檢測手段，MAT 的優(yōu)勢更為突出：不僅可檢出各類熱原污染物，包括尚未明確性質(zhì)的未知熱原，以及革蘭氏陽性菌（脂磷壁酸）、真菌、病毒等產(chǎn)生的非內(nèi)毒素熱原，填補了傳統(tǒng)內(nèi)毒素檢測（如鱟試劑法）的覆蓋空白。此外，MAT 無需使用實驗動物，契合全球 “替代、減少、優(yōu)化”（3R 原則）的監(jiān)管導向，目前已被《歐洲藥典》等法規(guī)列為家兔熱原試驗的替代方法，進一步提升了其在合規(guī)檢測中的適用性。
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