家兔熱原試驗(yàn)作為熱原檢測(cè)領(lǐng)域的 “法定傳統(tǒng)方法”，被中國藥典（ChP）、美國藥典（USP）、歐洲藥典（EP）均列為法定檢測(cè)項(xiàng)目，其主要優(yōu)勢(shì)在于可通過家兔體溫應(yīng)答篩查所有類型熱原，尤其適用于無法排除非內(nèi)毒素?zé)嵩廴镜母唢L(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)品，如血液制品、放射性質(zhì)藥物及部分生物制劑。然而，家兔熱原試驗(yàn)存在明顯局限：動(dòng)物個(gè)體差異大，需額外投入時(shí)間與成本篩選合格家兔；檢測(cè)周期長(zhǎng)（至少 6 小時(shí)），無法滿足生物制品快速放行需求；靈敏度較低（對(duì) LPS 檢測(cè)限≥5EU/kg），與全球倡導(dǎo)的“動(dòng)物福利3R原則”背道而馳。 熱原進(jìn)入血液后，TLR信號(hào)迅速活化NF-κB通路，驅(qū)動(dòng)單核細(xì)胞釋放IL-1β、IL-6、TNF-...

MAT 法熱原檢測(cè)標(biāo)曲采用非倍比稀釋，而非 1-0.5-0.25 的倍比稀釋，主要優(yōu)勢(shì)在于提升標(biāo)曲準(zhǔn)確性與適用性，避免稀釋誤差影響。一是可密集覆蓋關(guān)鍵濃度區(qū)間：熱原檢測(cè)的重點(diǎn)關(guān)注區(qū)為低濃度拐點(diǎn)（如 0.0125-0.1EU/mL）與高濃度平臺(tái)區(qū)（如 0.5-1EU/mL），非倍比稀釋可在這些區(qū)間設(shè)置更多濃度點(diǎn)（如 0.0125、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1EU/mL），提升曲線擬合精度，而倍比稀釋低濃度點(diǎn)少，易導(dǎo)致低濃度熱原定量不準(zhǔn)。二是降低稀釋誤差累積：倍比稀釋需連續(xù)稀釋（如 1EU/mL→0.5EU/mL→0.25EU/mL），每一步誤差會(huì)累積，導(dǎo)致低濃度點(diǎn)實(shí)際濃...

熱原是指微量即可引發(fā)恒溫動(dòng)物體溫異常升高的物質(zhì)，分為內(nèi)源性（如細(xì)胞因子）與外源性兩類，外源性熱原又涵蓋微生物來源（革蘭氏陰性菌脂多糖 LPS、革蘭氏陽性菌脂磷壁酸 LTA、病毒、真菌等）與非微生物來源（灰塵、橡膠降解產(chǎn)物等）。傳統(tǒng)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法（BET）只能檢測(cè)革蘭氏陰性菌的 LPS，無法覆蓋非內(nèi)毒素?zé)嵩?，而單核?xì)胞活化試驗(yàn)（MAT）可彌補(bǔ)這一缺陷。其原理是：熱原通過活化單核細(xì)胞表面的 Toll 樣受體（TLR，如 TLR4 識(shí)別 LPS、TLR2/TLR6 識(shí)別 LTA），啟動(dòng)先天免疫反應(yīng)，促使細(xì)胞釋放 IL-6、TNF-α 等促炎細(xì)胞因子；隨后采用 ELISA 法檢測(cè) IL-6 濃度...

熱原檢測(cè)技術(shù)自 20 世紀(jì)初問世以來，經(jīng)歷了 “動(dòng)物試驗(yàn)→體外生化檢測(cè)→細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)” 的三次關(guān)鍵變革，每一次變革均推動(dòng)檢測(cè)效率、準(zhǔn)確性與全面性的提升。20 世紀(jì)初至中期，熱原檢測(cè)方法只有家兔熱原試驗(yàn)，通過觀察家兔體溫變化篩查熱原，雖實(shí)現(xiàn)了廣譜檢測(cè)，但存在動(dòng)物成本高、操作繁瑣、靈敏度低、種屬差異大等局限，難以滿足制藥行業(yè)快速發(fā)展需求。20 世紀(jì) 60 年代，鱟試驗(yàn)法（LAL 法）的發(fā)明開啟了熱原檢測(cè)的 “體外生化時(shí)代”，利用鱟血變形細(xì)胞裂解物的凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素，靈敏度提升至 ng 級(jí)，檢測(cè)時(shí)間縮短至 1-2 小時(shí)，迅速成為制藥行業(yè)常規(guī)質(zhì)控方法；但該方法依賴鱟資源，易受 β- 葡...

革蘭氏陽性菌注射劑產(chǎn)品只依賴內(nèi)毒素檢測(cè)存在安全風(fēng)險(xiǎn)，需結(jié)合熱原檢測(cè)特性制定防控方案。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖成分，而革蘭氏陽性菌可產(chǎn)生非內(nèi)毒素?zé)嵩∟EPs），如脂磷壁酸，這類物質(zhì)同樣能引發(fā)人體發(fā)熱反應(yīng)，若只檢測(cè)內(nèi)毒素，可能遺漏 NEPs 污染，導(dǎo)致臨床用藥風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)此，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需重點(diǎn)關(guān)注三點(diǎn)：一是建議開展家兔法與內(nèi)毒素檢測(cè)的一致性實(shí)驗(yàn)，對(duì)比兩種方法的檢測(cè)結(jié)果，排查是否存在內(nèi)毒素未檢出但家兔法陽性的情況；二是采用 MAT 法熱原檢測(cè)，其通過單核細(xì)胞活化機(jī)制，可同時(shí)識(shí)別內(nèi)毒素與 NEPs，若 MAT 法檢測(cè)陽性，需進(jìn)一步追溯 NEPs 來源；三是若無法排除 NEPs 風(fēng)險(xiǎn)，必須按藥典...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒（貨號(hào) 1502100，規(guī)格 96 測(cè)試 / 盒）優(yōu)勢(shì)在于搭載 MAT 特定單核細(xì)胞系，細(xì)胞表面表達(dá)多種 Toll 樣受體（TLR），可響應(yīng)不同類型熱原。該細(xì)胞系來源清晰、可溯源，均一性強(qiáng)且無供體依賴，有效規(guī)避了傳統(tǒng) PBMC 因供體差異導(dǎo)致的結(jié)果波動(dòng)，同時(shí)安全風(fēng)險(xiǎn)低，無需擔(dān)憂外源因子污染。試劑盒采用 “標(biāo)準(zhǔn)化單核細(xì)胞 + ELISA 檢測(cè)” 一體化體系，通過嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量控制（如凍存復(fù)融后活率達(dá)標(biāo)），確保每次檢測(cè)的細(xì)胞狀態(tài)一致；搭配預(yù)包被 IL-6 抗體的酶標(biāo)板與配套試劑，進(jìn)一步減少體系誤差。從標(biāo)曲數(shù)據(jù)來看，其擬合采用 4-Parameter Log...

含消除炎癥成分的樣品可能抑制 IL-6 產(chǎn)生，需通過科學(xué)評(píng)估排除干擾，確保 MAT 法熱原檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。根據(jù)藥典要求，若樣品能抑制單核細(xì)胞促炎癥因子釋放，需通過以下步驟驗(yàn)證適用性：首先，選擇樣品 A、2A、4A 倍稀釋（均不超過上限有效稀釋倍數(shù) MVD），避免高濃度消除炎癥成分過度抑制；其次，進(jìn)行供試品加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，若回收率在 50%-200% 的合格范圍，說明消除炎癥成分未影響熱原檢測(cè)；再對(duì)比 “供試品配制的標(biāo)曲” 與 “稀釋液配制的標(biāo)曲”，若兩者 IL-6 檢測(cè)值相差在 ±20% 以內(nèi)，表明樣品基質(zhì)對(duì)檢測(cè)無系統(tǒng)性干擾。例如，某消除炎癥單抗樣品經(jīng) 2 倍稀釋后，加標(biāo)回收率達(dá) 120%，...

MAT法熱原檢測(cè)中，樣品與細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)需嚴(yán)格控制，以保障炎癥因子分泌量穩(wěn)定。說明書要求共培養(yǎng) 24 小時(shí)，雖未明確允差，但實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證顯示，±30 分鐘的允差對(duì)結(jié)果無明顯影響 —— 細(xì)胞因子（如 IL-6）分泌具有時(shí)間依賴性，24 小時(shí)左右達(dá)到分泌平臺(tái)期，半小時(shí)差異不會(huì)導(dǎo)致分泌量大幅波動(dòng)。若實(shí)驗(yàn)室對(duì)結(jié)果穩(wěn)定性要求極高（如 QC 放行檢測(cè)），建議嚴(yán)格按 24 小時(shí)操作，避免因時(shí)長(zhǎng)差異引入誤差；若為預(yù)實(shí)驗(yàn)（如樣品稀釋倍數(shù)摸索），±30 分鐘允差可接受，但需在記錄中注明實(shí)際培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)。需注意的是，共培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)不可超過 26 小時(shí)或短于 22 小時(shí)：過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活性下降（炎癥因子分泌減少），過短則未達(dá)...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒依據(jù) ICH Q2 (R2)、《中國藥典》（如通則 9301）及歐洲藥典（EP 2.6.30）要求，完成了線性、范圍、定量限、準(zhǔn)確度、精密度、耐用性等全維度性能驗(yàn)證。線性方面，0.0125-1.0EU/mL范圍內(nèi)擬合良好，R2≥0.98；準(zhǔn)確度通過加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，不同樣品基質(zhì)（如生物制品、化學(xué)制藥原料）的回收率均落在 50%-200% 區(qū)間；精密度表現(xiàn)優(yōu)異，批內(nèi)與批間 CV 均≤15%，且無論是 3 復(fù)孔還是 4 復(fù)孔檢測(cè)均能達(dá)標(biāo)。此外，試劑盒使用中國藥典推薦的 MAT 特定標(biāo)準(zhǔn)品，可直接用于國內(nèi)外申報(bào)，契合全球 “3R 原則” 監(jiān)管導(dǎo)向—尤其適配《...

MAT法熱原檢測(cè)中，獲得標(biāo)準(zhǔn) S 型標(biāo)曲需通過顯色時(shí)機(jī)控制與圖形調(diào)整實(shí)現(xiàn)，確保標(biāo)曲擬合準(zhǔn)確。在顯色時(shí)機(jī)控制上，加入 TMB 底物后，孔內(nèi)顏色會(huì)逐漸變藍(lán)，且隨反應(yīng)時(shí)間加深，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度呈現(xiàn)明顯藍(lán)色差異（如高濃度孔深藍(lán)色、低濃度孔淺藍(lán)色）時(shí)，即可加入終止液；若儀器含 600nm 波長(zhǎng)，可在終止前檢測(cè)高濃度標(biāo)準(zhǔn)品的 OD600nm 值，當(dāng)達(dá)到 1.0 左右時(shí)終止，此時(shí)顯色反應(yīng)處于線性期，終止后顏色由藍(lán)變黃，信號(hào)強(qiáng)度約增強(qiáng) 3 倍，易形成 S 型曲線。在圖形調(diào)整上，若標(biāo)曲擬合后未呈現(xiàn)明顯 S 型，可通過調(diào)整坐標(biāo)軸范圍優(yōu)化—如將縱軸（OD 值）范圍設(shè)為 0-2.5，橫軸（熱原濃度）設(shè)為對(duì)數(shù)坐標(biāo)，...

在 MAT 熱原檢測(cè)中，單核細(xì)胞系與 PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）的檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性差異明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)顯示，單核細(xì)胞系的標(biāo)曲 R2 達(dá) 1.000，各濃度點(diǎn) CV 值極低（如 ST1 為 0.92%、ST2 為 1.5%），相對(duì)偏差均在 5% 以內(nèi)；而 PBMC 的標(biāo)曲 R2 為 0.997，部分濃度點(diǎn) CV 值超 20%（如 ST2 為 39.6%、ST6 為 45.5%），相對(duì)偏差高達(dá) 171.43%。這種差異源于兩者對(duì)熱原反應(yīng)的一致性—單核細(xì)胞系能穩(wěn)定釋放 IL-6，PBMC 則因供體差異導(dǎo)致 IL-6 釋放水平波動(dòng)，直接影響熱原檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性，單核細(xì)胞系更適配準(zhǔn)確的熱原定量需求...

家兔熱原試驗(yàn)作為熱原檢測(cè)領(lǐng)域的 “法定傳統(tǒng)方法”，被中國藥典（ChP）、美國藥典（USP）、歐洲藥典（EP）均列為法定檢測(cè)項(xiàng)目，其主要優(yōu)勢(shì)在于可通過家兔體溫應(yīng)答篩查所有類型熱原，尤其適用于無法排除非內(nèi)毒素?zé)嵩廴镜母唢L(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)品，如血液制品、放射性質(zhì)藥物及部分生物制劑。然而，家兔熱原試驗(yàn)存在明顯局限：動(dòng)物個(gè)體差異大，需額外投入時(shí)間與成本篩選合格家兔；檢測(cè)周期長(zhǎng)（至少 6 小時(shí)），無法滿足生物制品快速放行需求；靈敏度較低（對(duì) LPS 檢測(cè)限≥5EU/kg），與全球倡導(dǎo)的“動(dòng)物福利3R原則”背道而馳。 單核細(xì)胞活化試驗(yàn)MAT通過量化人源單核細(xì)胞的免疫應(yīng)答，實(shí)現(xiàn)對(duì)LPS、脂磷壁酸、β-葡聚糖的同步檢...

中國藥典對(duì) MAT 法熱原檢測(cè)要求 4 復(fù)孔，未明確 CV 限值，需結(jié)合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)特性合理解讀與操作。藥典不設(shè) CV 限值的主要原因是：MAT 法基于細(xì)胞反應(yīng)，細(xì)胞活性易受環(huán)境微小變化（如溫度、pH）影響，存在天然不穩(wěn)定性，過嚴(yán)的 CV 要求可能脫離實(shí)際；但實(shí)驗(yàn)室可通過積累多批次數(shù)據(jù)，制定內(nèi)部 CV 控制范圍（如定量上下限 CV≤30%、25%），確保檢測(cè)重復(fù)性。關(guān)于 3 復(fù)孔的適用性：若長(zhǎng)期數(shù)據(jù)顯示 CV 控制良好（如連續(xù) 10 批次 CV<20%），且樣品為中間過程檢測(cè)（非 QC 放行），可嘗試 3 復(fù)孔，但需同步設(shè)置加標(biāo)對(duì)照，驗(yàn)證結(jié)果可靠性；若為 QC 放行檢測(cè)，仍建議按 4 復(fù)孔操作...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒依據(jù) ICH Q2 (R2)、《中國藥典》（如通則 9301）及歐洲藥典（EP 2.6.30）要求，完成了線性、范圍、定量限、準(zhǔn)確度、精密度、耐用性等全維度性能驗(yàn)證。線性方面，0.0125-1.0EU/mL范圍內(nèi)擬合良好，R2≥0.98；準(zhǔn)確度通過加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，不同樣品基質(zhì)（如生物制品、化學(xué)制藥原料）的回收率均落在 50%-200% 區(qū)間；精密度表現(xiàn)優(yōu)異，批內(nèi)與批間 CV 均≤15%，且無論是 3 復(fù)孔還是 4 復(fù)孔檢測(cè)均能達(dá)標(biāo)。此外，試劑盒使用中國藥典推薦的 MAT 特定標(biāo)準(zhǔn)品，可直接用于國內(nèi)外申報(bào)，契合全球 “3R 原則” 監(jiān)管導(dǎo)向—尤其適配《...

基于單核細(xì)胞系的穩(wěn)定性，MAT 熱原檢測(cè)可將復(fù)孔數(shù)從藥典要求的≥4 降至≥3。PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒數(shù)據(jù)顯示，單核細(xì)胞系標(biāo)曲的 4 復(fù)孔與 3 復(fù)孔，各濃度點(diǎn)（0.0125-1.0EU/mL）的準(zhǔn)確度（相對(duì)偏差）與精密度均在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，無明顯差異。這一調(diào)整的主要依據(jù)是單核細(xì)胞系消除了 PBMC 的異質(zhì)性，無需依賴多復(fù)孔抵消波動(dòng)，既能滿足熱原檢測(cè)的穩(wěn)定性與統(tǒng)計(jì)學(xué)合理性要求，又能減少試劑與耗材消耗，降低檢測(cè)成本，同時(shí)提升實(shí)驗(yàn)效率。因此樣品預(yù)測(cè)試時(shí)可選擇3復(fù)孔進(jìn)行初步檢測(cè)，產(chǎn)品放行還需按照藥典要求進(jìn)行4復(fù)孔測(cè)試。 MAT 熱原檢測(cè)中細(xì)胞活性影響巨大，活率需達(dá)一定標(biāo)準(zhǔn)保證檢測(cè)效果。...

相較于傳統(tǒng)家兔法，熱原檢測(cè)MAT法在動(dòng)物福利、檢測(cè)性能、適用范圍等方面具有明顯優(yōu)勢(shì)。從動(dòng)物福利看，MAT法使用分離培養(yǎng)的單核細(xì)胞系（如湖州申科 HL-60 細(xì)胞系），無需動(dòng)物，完全符合 “減少、替代、優(yōu)化” 的 3R 原則，規(guī)避家兔法的倫理爭(zhēng)議與飼養(yǎng)成本。檢測(cè)性能上，家兔法只能定性且靈敏度低（檢測(cè)限≥5EU/kg），結(jié)果受動(dòng)物個(gè)體差異、環(huán)境溫度影響大；MAT 法可定量檢測(cè)，標(biāo)曲線性范圍 0.0125-1.0EU/mL，檢測(cè)限（LOD）達(dá) 0.0125EU/mL，批間 CV≤25%，重復(fù)性更優(yōu)。適用范圍方面，家兔法不適用于放射性質(zhì)藥物、基因療法制劑等可能影響動(dòng)物體溫的產(chǎn)品；MAT法適配疫苗、...

傳統(tǒng)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法（BET）只能檢測(cè)革蘭氏陰性菌的 LPS，無法識(shí)別革蘭氏陽性菌 LTA、真菌酵母多糖、病毒鞭毛蛋白等非內(nèi)毒素?zé)嵩嬖诼z風(fēng)險(xiǎn)；同時(shí)，部分樣品（如脂質(zhì)體、表面活性劑制劑）會(huì)因內(nèi)毒素吸附導(dǎo)致低內(nèi)毒素回收（LER），BET法難以準(zhǔn)確定量。MAT 法通過單核細(xì)胞表面的多種 TLR 受體（TLR1-TLR10），可識(shí)別不同類型熱原：TLR4 識(shí)別 LPS、TLR2/TLR6 識(shí)別 LTA 與酵母多糖、TLR5 識(shí)別鞭毛蛋白、TLR3 識(shí)別病毒 dsRNA 等，實(shí)現(xiàn) “全熱原覆蓋”。湖州申科生物熱原檢測(cè)試劑盒（MAT法）的驗(yàn)證數(shù)據(jù)顯示，其對(duì)不同濃度非內(nèi)毒素?zé)嵩许憫?yīng)：如 0.1...

湖州申科生物熱原檢測(cè)試劑盒（MAT 法，貨號(hào) 1502100）包含完整的檢測(cè)體系，組分按功能可分為細(xì)胞培養(yǎng)類、ELISA 檢測(cè)類與輔助類，且儲(chǔ)存條件明確。細(xì)胞培養(yǎng)類組分包括：2-8℃儲(chǔ)存的培養(yǎng)液（25mL×2 瓶）、96 孔細(xì)胞孵育板，-18℃儲(chǔ)存的培養(yǎng)液添加劑（1.5mL×1 管）、細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，以及需液氮保存的 MAT 細(xì)胞（2 支），確保細(xì)胞活性與穩(wěn)定性。ELISA 檢測(cè)類組分涵蓋：2-8℃儲(chǔ)存的生物素偶聯(lián)抗 IL-6 抗體（200×，60μL）、鏈霉親和素 HRP 復(fù)合物（100×，140μL）、TMB 顯色液（12mL）、終止液（6mL），以及抗 IL-6 預(yù)包被酶標(biāo)板（...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒依據(jù) ICH Q2 (R2)、《中國藥典》（如通則 9301）及歐洲藥典（EP 2.6.30）要求，完成了線性、范圍、定量限、準(zhǔn)確度、精密度、耐用性等全維度性能驗(yàn)證。線性方面，0.0125-1.0EU/mL范圍內(nèi)擬合良好，R2≥0.98；準(zhǔn)確度通過加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，不同樣品基質(zhì)（如生物制品、化學(xué)制藥原料）的回收率均落在 50%-200% 區(qū)間；精密度表現(xiàn)優(yōu)異，批內(nèi)與批間 CV 均≤15%，且無論是 3 復(fù)孔還是 4 復(fù)孔檢測(cè)均能達(dá)標(biāo)。此外，試劑盒使用中國藥典推薦的 MAT 特定標(biāo)準(zhǔn)品，可直接用于國內(nèi)外申報(bào)，契合全球 “3R 原則” 監(jiān)管導(dǎo)向—尤其適配《...

MAT法（單核細(xì)胞活化反應(yīng)測(cè)定）熱原檢測(cè)基于人體免疫反應(yīng)機(jī)制設(shè)計(jì)，原理是：內(nèi)毒素（革蘭氏陰性菌來源）與非內(nèi)毒素?zé)嵩ǜ锾m氏陽性菌、霉菌、病毒等來源）進(jìn)入人體后，會(huì)活化單核細(xì)胞或單核細(xì)胞系，使其釋放 IL-6、IL-1、IL-1β、TNF-α 等促炎細(xì)胞因子。檢測(cè)時(shí)將供試品與單核細(xì)胞 / 單核細(xì)胞系共孵育，再通過 ELISA 定量檢測(cè)釋放的 IL-6 含量，結(jié)合內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)曲，即可判斷供試品中熱原含量是否符合規(guī)定，實(shí)現(xiàn)內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素?zé)嵩娜采w檢測(cè)。 一旦熱原涌入人體循環(huán)系統(tǒng)，致熱因子直抵下丘腦體溫中樞，導(dǎo)致調(diào)定點(diǎn)上移、產(chǎn)熱升散熱降，體溫隨之飆升。北京血液制品熱原檢測(cè)結(jié)果判定 熱...

基于單核細(xì)胞系的穩(wěn)定性，MAT 熱原檢測(cè)可將復(fù)孔數(shù)從藥典要求的≥4 降至≥3。PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒數(shù)據(jù)顯示，單核細(xì)胞系標(biāo)曲的 4 復(fù)孔與 3 復(fù)孔，各濃度點(diǎn)（0.0125-1.0EU/mL）的準(zhǔn)確度（相對(duì)偏差）與精密度均在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，無明顯差異。這一調(diào)整的主要依據(jù)是單核細(xì)胞系消除了 PBMC 的異質(zhì)性，無需依賴多復(fù)孔抵消波動(dòng)，既能滿足熱原檢測(cè)的穩(wěn)定性與統(tǒng)計(jì)學(xué)合理性要求，又能減少試劑與耗材消耗，降低檢測(cè)成本，同時(shí)提升實(shí)驗(yàn)效率。因此樣品預(yù)測(cè)試時(shí)可選擇3復(fù)孔進(jìn)行初步檢測(cè)，產(chǎn)品放行還需按照藥典要求進(jìn)行4復(fù)孔測(cè)試。 MAT 法通過熱原活化單核細(xì)胞 TLR 受體，釋放 IL-6 等細(xì)...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒突破傳統(tǒng)檢測(cè)方法局限，不僅能檢測(cè)革蘭氏陰性菌來源的內(nèi)毒素，還可準(zhǔn)確識(shí)別革蘭氏陽性菌（脂磷壁酸 LTA）、病毒、真菌等產(chǎn)生的非內(nèi)毒素?zé)嵩∟EP），契合熱原檢測(cè) “全風(fēng)險(xiǎn)覆蓋” 的法規(guī)需求。其定量限低至 0.025EU/mL，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，對(duì) Flagellin、LTA、Resiquimod、Poly-IC 等多種 NEP 均能有效檢出，且加標(biāo)回收率穩(wěn)定在 50%-200% 合格范圍（如貝伐珠單抗注射液中 LTA 加標(biāo)回收率 66.8%、Zysoman 加標(biāo)回收率 113%）。此外，試劑盒聯(lián)合了國內(nèi)相關(guān)機(jī)構(gòu)完成室間驗(yàn)證，與傳統(tǒng)家兔熱原試驗(yàn)（RPT）橋接結(jié)...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒以 “簡(jiǎn)化流程、提升效率” 為設(shè)計(jì)理念，采用即用型細(xì)胞，凍存細(xì)胞無需離心復(fù)蘇培養(yǎng)，復(fù)融后可直接與供試品混合共孵育，大幅節(jié)省傳統(tǒng)細(xì)胞預(yù)處理（如調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)、鋪板培養(yǎng)）的時(shí)間成本。實(shí)驗(yàn)流程清晰可控：只需按要求制備待測(cè)供試品與內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，各取對(duì)應(yīng)體積加入細(xì)胞懸液（每孔加樣量明確），經(jīng) 37℃、5% CO?孵育 24 小時(shí)后，離心收集上清并通過 ELISA 法檢測(cè) IL-6 含量，全程可在 24 小時(shí)內(nèi)獲得穩(wěn)定可靠的檢測(cè)結(jié)果。這種便捷性尤其適配實(shí)驗(yàn)室高通量檢測(cè)需求，減少人員操作步驟的同時(shí)，降低了因復(fù)雜操作引入的誤差風(fēng)險(xiǎn)，兼顧效率與準(zhǔn)確性。 家兔法熱原試驗(yàn)...

熱原檢測(cè)MAT法的法規(guī)地位持續(xù)提升，已成為多國藥典認(rèn)可的熱原檢測(cè)替代方法。歐洲藥典（EP）是推動(dòng) MAT 應(yīng)用的關(guān)鍵力量：通則 2.6.30 明確 MAT 可替代家兔熱原試驗(yàn)（RPT），且能同時(shí)檢測(cè)內(nèi)毒素與非內(nèi)毒素?zé)嵩?024 年歐洲藥典委員會(huì)批準(zhǔn)刪除所有條款中的家兔法，修訂文本將于 2025 年7月1日生效，強(qiáng)制鼓勵(lì)使用 MAT 等體外替代方法。美國藥典（USP）<151> 規(guī)定，經(jīng)驗(yàn)證的體外熱原試驗(yàn)（如 MAT）可替代家兔法，且需依據(jù) USP<1225>開展驗(yàn)證；FDA 行業(yè)指南進(jìn)一步明確 MAT 的合規(guī)性。中國藥典 2020 年版通則 9301 將 MAT 列為熱原檢查的補(bǔ)充方法，...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒以 “簡(jiǎn)化流程、提升效率” 為設(shè)計(jì)理念，采用即用型細(xì)胞，凍存細(xì)胞無需離心復(fù)蘇培養(yǎng)，復(fù)融后可直接與供試品混合共孵育，大幅節(jié)省傳統(tǒng)細(xì)胞預(yù)處理（如調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)、鋪板培養(yǎng)）的時(shí)間成本。實(shí)驗(yàn)流程清晰可控：只需按要求制備待測(cè)供試品與內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，各取對(duì)應(yīng)體積加入細(xì)胞懸液（每孔加樣量明確），經(jīng) 37℃、5% CO?孵育 24 小時(shí)后，離心收集上清并通過 ELISA 法檢測(cè) IL-6 含量，全程可在 24 小時(shí)內(nèi)獲得穩(wěn)定可靠的檢測(cè)結(jié)果。這種便捷性尤其適配實(shí)驗(yàn)室高通量檢測(cè)需求，減少人員操作步驟的同時(shí)，降低了因復(fù)雜操作引入的誤差風(fēng)險(xiǎn)，兼顧效率與準(zhǔn)確性。 無論是注射劑、...

MAT法熱原檢測(cè)中，標(biāo)曲信號(hào)值偏低或線性不佳是常見問題，需按細(xì)胞、標(biāo)準(zhǔn)品、ELISA 檢測(cè)三環(huán)節(jié)排查解決。細(xì)胞相關(guān)問題中，細(xì)胞復(fù)蘇后若未充分混勻?qū)е陆Y(jié)團(tuán)，種板后細(xì)胞分布不均，會(huì)使局部信號(hào)弱，需振蕩細(xì)胞懸液后再種板；細(xì)胞活性差或處理時(shí)間超半小時(shí)，會(huì)降低炎癥因子分泌，需嚴(yán)格按說明書操作并縮短處理時(shí)間；孵育未達(dá) 37℃、5% CO?條件，細(xì)胞活化不足，需確保培養(yǎng)箱參數(shù)穩(wěn)定；細(xì)胞懸液若接觸外源熱原，會(huì)引發(fā)非特異性反應(yīng)，操作時(shí)需遠(yuǎn)離熱原污染源。標(biāo)準(zhǔn)品問題方面，配制稀釋錯(cuò)誤會(huì)直接導(dǎo)致濃度不準(zhǔn)，需核對(duì)稀釋步驟；振蕩時(shí)間不足（未按說明書要求）會(huì)使內(nèi)毒素分散不均，需確保振蕩充分且 4 小時(shí)內(nèi)使用；標(biāo)準(zhǔn)品降解...

MAT 試劑盒熱原檢測(cè)配套細(xì)胞的質(zhì)量控制，是保障檢測(cè)結(jié)果可靠的重要環(huán)節(jié)，需從功能、安全性、穩(wěn)定性三方面建立體系。在功能鑒定上，按歐洲 MAT 法要求，需檢測(cè)細(xì)胞的 Toll 樣受體（TLR1-TLR9）表達(dá)情況—確保細(xì)胞能響應(yīng)不同類型熱原（如 TLR4 響應(yīng) LPS、TLR2/6 響應(yīng)脂磷壁酸）；同時(shí)考察細(xì)胞倍增時(shí)間（確?；钚苑€(wěn)定）、熱原反應(yīng)性（對(duì)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素和非內(nèi)毒素?zé)嵩男盘?hào)強(qiáng)度），確保細(xì)胞具備熱原識(shí)別與炎癥因子分泌能力。在安全性檢測(cè)上，需驗(yàn)證細(xì)胞無菌（無細(xì)菌、真菌污染）、無支原體、無外源病毒因子（如 HIV、HBV）及分枝桿菌，避免外源污染影響檢測(cè)結(jié)果。在穩(wěn)定性考察上，需監(jiān)測(cè)不同代次細(xì)...

湖州申科生物熱原檢測(cè)（MAT法） 試劑盒在靈敏度、穩(wěn)定性與適用性上表現(xiàn)突出，關(guān)鍵性能參數(shù)符合藥典要求：標(biāo)曲線性范圍 0.0125-1.0EU/mL，相關(guān)系數(shù) R2≥0.98，定量限 0.025EU/mL，檢測(cè)限（LOD）0.0125EU/mL，批間精密度 CV≤25%，可準(zhǔn)確捕捉微量熱原。其優(yōu)勢(shì)在于特定的單核細(xì)胞系 —— 與依賴供體血液的 PBMC 細(xì)胞不同，申科 MAT 細(xì)胞系來源清晰可溯源，無需倫理審批與血站合作，規(guī)避供體差異導(dǎo)致的檢測(cè)波動(dòng)。對(duì)比同類型產(chǎn)品（如國外廠家 PBMC 細(xì)胞），申科細(xì)胞系的標(biāo)曲各濃度點(diǎn) CV 更低（ 低至3.6%）、相對(duì)偏差更?。?12.31%），線性 R2 ...

湖州申科生物熱原檢測(cè)試劑盒（MAT 法，貨號(hào) 1502100）包含完整的檢測(cè)體系，組分按功能可分為細(xì)胞培養(yǎng)類、ELISA 檢測(cè)類與輔助類，且儲(chǔ)存條件明確。細(xì)胞培養(yǎng)類組分包括：2-8℃儲(chǔ)存的培養(yǎng)液（25mL×2 瓶）、96 孔細(xì)胞孵育板，-18℃儲(chǔ)存的培養(yǎng)液添加劑（1.5mL×1 管）、細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，以及需液氮保存的 MAT 細(xì)胞（2 支），確保細(xì)胞活性與穩(wěn)定性。ELISA 檢測(cè)類組分涵蓋：2-8℃儲(chǔ)存的生物素偶聯(lián)抗 IL-6 抗體（200×，60μL）、鏈霉親和素 HRP 復(fù)合物（100×，140μL）、TMB 顯色液（12mL）、終止液（6mL），以及抗 IL-6 預(yù)包被酶標(biāo)板（...

PyroSHENTEK?熱原檢測(cè)試劑盒（貨號(hào) 1502100，規(guī)格 96 測(cè)試 / 盒）優(yōu)勢(shì)在于搭載 MAT 特定單核細(xì)胞系，細(xì)胞表面表達(dá)多種 Toll 樣受體（TLR），可響應(yīng)不同類型熱原。該細(xì)胞系來源清晰、可溯源，均一性強(qiáng)且無供體依賴，有效規(guī)避了傳統(tǒng) PBMC 因供體差異導(dǎo)致的結(jié)果波動(dòng)，同時(shí)安全風(fēng)險(xiǎn)低，無需擔(dān)憂外源因子污染。試劑盒采用 “標(biāo)準(zhǔn)化單核細(xì)胞 + ELISA 檢測(cè)” 一體化體系，通過嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量控制（如凍存復(fù)融后活率達(dá)標(biāo)），確保每次檢測(cè)的細(xì)胞狀態(tài)一致；搭配預(yù)包被 IL-6 抗體的酶標(biāo)板與配套試劑，進(jìn)一步減少體系誤差。從標(biāo)曲數(shù)據(jù)來看，其擬合采用 4-Parameter Log...