細胞基因治療產品用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測性能驗證

來源： 發(fā)布時間：2025-10-23

在關鍵物料開發(fā)基礎上，湖州申科生物 HCP ELISA 檢測試劑盒的開發(fā)流程還包含第三大關鍵階段 —— 檢測體系開發(fā)及驗證，這一環(huán)節(jié)直接關系檢測方法的可靠性。公司會開展嚴格的檢測體系開發(fā)與驗證工作，驗證方案完全契合 ICH 指導原則及藥典中關于分析方法驗證的標準要求，確保檢測體系的科學性與合規(guī)性。同時，為進一步保障產品品質，公司在生產全流程中嚴格落實物料質量控制，并全程在潔凈車間環(huán)境中完成生產，從過程管控層面確保試劑盒方法的穩(wěn)健性、重現(xiàn)性與法規(guī)符合性。這套從抗原源頭把控，到關鍵抗體制備，再到檢測體系驗證與潔凈生產的標準化、合規(guī)化全流程開發(fā)模式，并非單一環(huán)節(jié)的質量管控，而是形成了完整的品質保障鏈條，成為湖州申科 宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測產品品質與可靠性的重點支撐。
湖州申科自主研發(fā)IMBS抗體覆蓋率檢測法及低豐度HCP富集技術，合作完成多項課題并發(fā)表成果。細胞基因治療產品用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測性能驗證

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由于 HCPs 屬于復雜的多分析物，為制備覆蓋率盡可能高的抗體（以覆蓋工藝特有的高風險 HCPs），需采用可靠的免疫策略。獲得符合性能要求的抗體后，需借助經過驗證的 2D 或 LC-MS 方法對抗體覆蓋率進行表征，確?？贵w可充分覆蓋各實際工藝下產生的 HCPs。在擁有代表性抗原與優(yōu)良性能抗體的基礎上，開展 ELISA 檢測體系開發(fā)，涵蓋原輔料篩選與制備研究、各組分工藝及反應體系研究、穩(wěn)定性研究等重要內容。檢測體系開發(fā)完成后，需依據 ICH 及藥典要求開展分析方法驗證評估，確保體系的線性、范圍、檢測限、定量限、準確度、精密度、專屬性及耐用性均滿足法規(guī)要求。
生物制品宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證SHENTEK? AutoElisa-4K HCP 檢測自動化系統(tǒng)可減少人為誤差，滿足 21 CFR Part 11 數(shù)據管理要求。

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LC-MS技術作為生物制品宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測的新趨勢，應用時需重點考慮以下五方面：①穩(wěn)定性：需對HCPs的LC-MS檢測流程開展驗證，全流程需實施嚴格QC管控，以保障檢測結果的一致性與穩(wěn)定性。②可重復性：不同類型生物制品中HCPs的提取效率存在差異，且不同人員操作會產生偏差，因此需在上機前通過多種方法評估HCPs提取效率，規(guī)避人為因素導致的結果重復性不佳問題。③準確度：在方法開發(fā)與驗證階段，需設置內標并確定定量算法，通過內標響應回算得出HCPs含量，以此保證定量結果的準確性。④抗干擾能力：高豐度蛋白與特殊基質會干擾質譜檢測，需借助前處理手段去除高豐度蛋白或特殊基質，從而降低其對HCPs肽段質譜檢測的影響。⑤真實性：樣品中除HCPs外的其他物質在質譜分析中也會產生質譜信號，需去除復雜背景噪音以避免假陽性與假陰性情況，同時建立規(guī)范的生信分析流程。在分析流程搭建過程中，同樣需制定嚴格的QC標準，并通過后續(xù)多種方法驗證，明確該標準的真實性。

中國倉鼠卵巢細胞（Chinese Hamster Ovary，CHO）是生物制品生產中常用的動物細胞表達系統(tǒng)，廣泛應用于抗體、重組蛋白、疫苗等產品的制備。采用 CHO 細胞作為宿主進行生產時，難免會引入宿主細胞蛋白（HCP）雜質；即便 HCP 殘留量較低，仍可能存在免疫原性，還會帶來降低產品蛋白穩(wěn)定性等風險。因此，需對生物制品中的 HCP 殘留進行定量分析，從而保障純化工藝的一致性與終產品的安全性。SHENTEK®CHO 宿主細胞蛋白（HCP ）殘留檢測試劑盒實現(xiàn)了關鍵試劑的全國產化，其通過 CHO 細胞（K1&S）補料分批培養(yǎng)工藝制備 HCPs，再以此免疫綿羊獲取抗體，適用于檢測 CHO 細胞系表達的生物制品（如單抗、重組蛋白、疫苗等）中的 HCP 殘留。該試劑盒具有操作步驟少、檢測速度快、專一性強、性能穩(wěn)定可靠的特點。
樣品與抗體的匹配程度對宿主細胞蛋白殘留檢測的結果影響很大。

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宿主細胞蛋白（HCP）殘留監(jiān)測是生物藥物生產中的關鍵質量屬性（Critical Quality Attribute, CQA），需在藥物開發(fā)與生產階段對 HCP 的存在實施嚴格監(jiān)控、管理及記錄。隨著生產流程推進，生物制品目標蛋白純度逐步提升，HCP 含量則相應持續(xù)下降，這導致對單抗、融合蛋白等富含目標蛋白的下游工藝樣品進行 HCP 分析監(jiān)測時，難度明顯增加。在此背景下，高效的 HCP 富集材料與技術顯得尤為重要。SHENTEK®AbunProteoX 是基于磁珠構建的親和配體，能高效識別并結合目標蛋白；借助磁性納米顆粒的獨特特性，它可快速高效捕獲 HCP，大幅提升檢測靈敏度。此外，該親和配體的普遍適用性，讓 AbunProteoX 處理多種生物樣本時表現(xiàn)優(yōu)異，可確保樣品中存在高濃度目標蛋白時，對低濃度 HCP 的質譜、電泳等檢測分析具備準確性與可靠性。
篩選HCP試劑盒需考慮線性稀釋（一步法尤重）抗基質干擾穩(wěn)定檢測值、批間一致性、工藝匹配性等因素。細胞基因治療產品用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測性能驗證

抗體覆蓋率是 HCP 檢測關鍵指標，影響結果可信度，需通過方法驗證。細胞基因治療產品用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測性能驗證

SHENTEK®AbunProteoX 是以磁珠為基礎構建的親和配體，適用于多種生物制品樣本。其操作流程經精心設計，簡化高效，方便用戶操作。與傳統(tǒng)非變性酶解方法相比，AbunProteoX 能有效提升 HCP 的檢出效果，有效降低質譜分析的檢測下限，使低豐度蛋白得以有效檢出，保障了檢測的高靈敏度。即便存在高豐度目標蛋白時，經 AbunProteoX 處理后，仍能有效分析宿主細胞蛋白（HCPs），為生物制品中宿主細胞蛋白殘留控制提供了簡便、易用且高效的樣品處理工具。
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