吉林宿主細(xì)胞殘留DNA檢測常用知識

來源： 發(fā)布時(shí)間：2025-11-05

宿主細(xì)胞殘留 DNA 檢測的樣品處理環(huán)節(jié)，是決定檢測準(zhǔn)確性的重要步驟，技術(shù)難點(diǎn)貫穿核酸釋放、純化及干擾物去除的全過程。生物制品基質(zhì)復(fù)雜多樣，疫苗、單抗、干細(xì)胞、免疫細(xì)胞類等不同樣品，對處理方法的要求有較大差異：①疫苗樣品常含甲醛等高濃度滅活劑與鋁鹽等佐劑，易造成 DNA 吸附或降解；②單抗樣品中 10-100 mg/mL 的高蛋白濃度，會競爭性結(jié)合磁珠，使提取效率下降；③干細(xì)胞與免疫細(xì)胞類產(chǎn)品可能殘留二甲基亞砜（DMSO），會直接抑制 PCR 反應(yīng)。
控制宿主細(xì)胞殘留 DNA 含量，對保障生物制品安全性具有重要意義。吉林宿主細(xì)胞殘留DNA檢測常用知識

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SHENTEK®CV-1殘留DNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法），可對各類生物制品的中間品、半成品及成品中CV-1宿主細(xì)胞DNA進(jìn)行定量檢測。該試劑盒基于熒光探針法原理，實(shí)現(xiàn)對樣品中CV-1殘留DNA的定量分析，具備檢測快速、專一性強(qiáng)、性能穩(wěn)定可靠的特點(diǎn)，檢測限可達(dá)到fg級別。試劑盒內(nèi)配套有CV-1 DNA定量參考品，且與SHENTEK®宿主細(xì)胞殘留DNA樣本前處理試劑盒搭配使用，可準(zhǔn)確定量樣品中的CV-1殘留DNA。整個(gè)分析系統(tǒng)通過優(yōu)化前處理與檢測步驟的兼容性，能有效提升對CV-1細(xì)胞微量DNA殘留的回收率及定量準(zhǔn)確度。
北京qPCR法宿主細(xì)胞殘留DNA檢測方案對宿主細(xì)胞殘留 DNA 檢測方法性能而言，定量限是重要評價(jià)指標(biāo)。

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SHENTEK® MRC-5 殘留 DNA 檢測試劑盒，可對各類生物制品中間品、半成品及成品中的 MRC-5 宿主細(xì)胞 DNA 進(jìn)行定量檢測。該試劑盒基于熒光探針原理，實(shí)現(xiàn)對樣品中 MRC-5 殘留 DNA 的定量分析，具備檢測速度快、專一性突出、性能穩(wěn)定可靠的優(yōu)勢，檢測限可達(dá)到 fg 級別，且試劑盒內(nèi)配備 MRC-5 DNA 定量參考品。該試劑盒與 SHENTEK® 宿主細(xì)胞殘留 DNA 樣本前處理試劑盒搭配使用，準(zhǔn)確完成樣品中 MRC-5 殘留 DNA 的定量檢測。整個(gè)分析系統(tǒng)通過優(yōu)化前處理與檢測步驟的適配性，提升 MRC-5 細(xì)胞微量 DNA 殘留的回收率及定量準(zhǔn)確度。

SHENTEK® Sf9&AcNPV 殘留 DNA 檢測試劑盒（多重 PCR - 熒光探針法），可對昆蟲細(xì)胞（Sf9）桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)所生產(chǎn)的基因工程疫苗中，殘留的 Sf9 細(xì)胞 DNA 與桿狀病毒（AcNPV）DNA 進(jìn)行定量檢測。該試劑盒依托 Taqman 探針原理，結(jié)合多重 qPCR 技術(shù)實(shí)現(xiàn)對樣品中 Sf9 及 AcNPV 殘留 DNA 的定量，不僅檢測效率高、專一性突出，且性能穩(wěn)定可靠，檢測限可達(dá)到 50 copies / 反應(yīng)，試劑盒還配套提供 Sf9&AcNPV 定量參考品。此試劑盒與 SHENTEK® 宿主細(xì)胞殘留 DNA 樣本前處理試劑盒搭配使用，能夠準(zhǔn)確定量樣品中殘留的 Sf9&AcNPV 微量 DNA，保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。
通過 SHENTEK-96SPCR 儀與湖州申科前處理提取系統(tǒng)的配合，能高效檢測宿主細(xì)胞殘留 DNA。

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更換宿主細(xì)胞殘留DNA（HCD）檢測試劑盒時(shí)，需開展一系列驗(yàn)證相關(guān)考量。首先參照《已上市生物制品藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》，根據(jù)變更對生物制品安全性、有效性及質(zhì)量可控性的風(fēng)險(xiǎn)影響程度分類，實(shí)施變更前需開展充分研究與驗(yàn)證。其次進(jìn)行全面性能驗(yàn)證，采用藥典方法或已驗(yàn)證的檢測方法，證明變更后分析方法與原方法等效或更優(yōu)。隨后開展樣品檢驗(yàn)，對比試劑盒更換前后的產(chǎn)品質(zhì)量數(shù)據(jù)并綜合評估，結(jié)合穩(wěn)定性研究進(jìn)行穩(wěn)定性可比性分析，檢測細(xì)微差異以評價(jià)變更對產(chǎn)品質(zhì)量的影響。完成上述步驟后，再辦理試劑盒更換備案；若變更后方法與原方法相當(dāng)或更優(yōu)，根據(jù)待檢樣品為原液或制劑，將變更歸為中等或微小變更，微小變更可在中等變更申請中一并說明。
湖州申科生物為宿主細(xì)胞殘留 DNA 檢測提供一站式方案，涵蓋試劑設(shè)備及定制化服務(wù)。北京E.coli宿主細(xì)胞殘留DNA檢測

湖州申科圍繞宿主細(xì)胞殘留 DNA 檢測，專注于多種生物分析方法的研發(fā)優(yōu)化，遵照法規(guī)與指導(dǎo)原則執(zhí)行。吉林宿主細(xì)胞殘留DNA檢測常用知識

疫苗、抗體、重組蛋白、多肽及小分子藥物等產(chǎn)品，多借助連續(xù)傳代細(xì)胞系進(jìn)行表達(dá)生產(chǎn)。即便經(jīng)過多步純化工藝處理，終產(chǎn)品中仍可能殘留源自宿主細(xì)胞的 DNA（即 Host cell DNA，簡稱 HCD）。HCD 中可能含有功能基因，若其中存在顯性致病基因或病毒基因組，未經(jīng)驗(yàn)證、未充分去除或滅活的 HCD 殘留在制品內(nèi)，可能通過基因?qū)用娴碾S機(jī)插入突變，或是誘發(fā)過度 / 異常的免疫原性反應(yīng)，給用藥者造成不可預(yù)測的重大健康風(fēng)險(xiǎn)。由此可見，對宿主細(xì)胞殘留 DNA 開展定量檢測，對于監(jiān)測藥物產(chǎn)品的安全性與質(zhì)量可控性而言，具有重要意義。
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