低豐度宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測富集試劑

來源： 發(fā)布時間：2025-11-07

SHENTEK®AbunProteoX 是以磁珠為基礎(chǔ)構(gòu)建的親和配體，適用于多種生物制品樣本。其操作流程經(jīng)精心設(shè)計，簡化高效，方便用戶操作。與傳統(tǒng)非變性酶解方法相比，AbunProteoX 能有效提升 HCP 的檢出效果，有效降低質(zhì)譜分析的檢測下限，使低豐度蛋白得以有效檢出，保障了檢測的高靈敏度。即便存在高豐度目標蛋白時，經(jīng) AbunProteoX 處理后，仍能有效分析宿主細胞蛋白（HCPs），為生物制品中宿主細胞蛋白殘留控制提供了簡便、易用且高效的樣品處理工具。
湖州申科宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒校準品凍干保存，穩(wěn)定性超 10 年，保障長期供應(yīng)。低豐度宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測富集試劑

低豐度宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測富集試劑,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

美國藥典（USP）1132 章節(jié)中，推薦的 HCP 抗體純化方式有兩種，分別是 Protein A/Protein G 親和柱層析法與 HCP 抗原親和柱層析法。這兩種方法各有特點與不足，且均滿足監(jiān)管層面的要求。在實際應(yīng)用場景中，針對不同產(chǎn)品，兩種方法可能造成檢測結(jié)果的差異。兩種方法所獲抗體的關(guān)鍵差異，在于 HCP 抗體有效含量的占比不同。其中，HCP 抗原親和柱層析法的有效含量占比明顯更高，但該方法存在部分 HCP 抗體流失的情況，這會使得針對特定樣本的檢測結(jié)果低于前者，因此企業(yè)在實際建立檢測方法時，需開展充分評估。此外，HCP 抗原親和柱層析法對純化工藝的要求更為嚴格，若要確?？贵w的批間一致性，需重點考察 HCP 抗原柱的制備工藝、柱子的使用壽命以及再次制備時的一致性等關(guān)鍵問題。
成都宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測橋接驗證生物制品臨床申報需提交 HCP 抗體覆蓋率數(shù)據(jù)，否則可能面臨監(jiān)管發(fā)補要求。

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大腸埃希氏菌（Escherichiacoli，簡稱E.coli，又稱大腸桿菌）作為模式微生物，在生命科學研究領(lǐng)域應(yīng)用較多。伴隨基因治療產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，它還成為質(zhì)粒DNA（pDNA）生產(chǎn)的主要宿主菌。質(zhì)粒樣品常規(guī)提取工藝中，常使用強堿性溶液進行細胞裂解與蛋白質(zhì)變性，這種處理使其中的宿主細胞蛋白（HCPs）與傳統(tǒng)物理破碎法得到的HCPs差異明顯，進而導致采用免疫學原理的檢測方法時，殘留檢測結(jié)果偏差較大。湖州申科生物的E.coli克隆菌堿裂HCP殘留檢測試劑盒，適用于大腸埃希氏菌（即大腸桿菌）克隆菌株的HCPs檢測，涵蓋DH5α、Top10、JM109等常見菌株。該試劑盒的抗體制備過程中，采用堿裂工藝制備的HCPs免疫動物，得到專屬抗體，可用于經(jīng)堿液裂解工藝處理后的宿主細胞蛋白（HCPs）定量檢測。

湖州申科生物CHO-K1HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），采用固相酶聯(lián)免疫吸附法原理，可對CHO-K1細胞生產(chǎn)的生物制品中宿主殘留蛋白進行定量檢測。檢測時，向預(yù)包被抗CHO-K1HCPs綿羊多抗的酶標板中，加入校準品或待測樣品、HRP標記的抗CHO-K1HCPs綿羊多抗共同孵育。洗滌后加入TMB底物顯色，隨后用終止液終止酶促反應(yīng)；再用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，該吸光度與校準品或待測樣品中HCPs濃度呈正相關(guān)，依據(jù)校準品擬合的劑量-反應(yīng)曲線，即可算出待測樣品中HCPs的濃度。該試劑盒對待測樣品無需特殊處理，通過合適稀釋比例的適用性驗證，即可直接使用。且試劑盒操作步驟少、檢測快速，同時具備專一性強、性能穩(wěn)定可靠的特點。
抗體覆蓋率評估屬于定性分析，要求是穩(wěn)定性好，靈敏度高，與ELISA檢測的原理相似，確保結(jié)果準確可靠。

低豐度宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測富集試劑,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

由于宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒關(guān)鍵組分（校準品、檢測抗體）存在固有且明顯的變異度，不同試劑盒對同一樣本的檢測結(jié)果，不僅可能在數(shù)值上出現(xiàn)較大差距，在特定 HCP（如低豐度或高風險 HCP）的檢出能力上，也可能存在明顯偏差，這對生物制品 HCP 殘留的準確管控構(gòu)成挑戰(zhàn)。因此，為確保檢測結(jié)果能真實反映自身產(chǎn)品的 HCP 殘留狀況，企業(yè)必須結(jié)合自身產(chǎn)品特性（如宿主細胞類型、目標產(chǎn)物屬性）與生產(chǎn)工藝特點，對不同品牌、不同類型的試劑盒開展系統(tǒng)且詳細的平行比對實驗。同時，還需進行針對性的適用性評估，驗證試劑盒對自身產(chǎn)品的檢測準確性、特異性及穩(wěn)定性，再篩選出與自身產(chǎn)品匹配度適合的檢測方案，為生物制品的 HCP 殘留控制提供可靠技術(shù)支撐，保障產(chǎn)品質(zhì)量與用藥安全。
臨床 III 期及商業(yè)化生產(chǎn)階段，法規(guī)推薦用定制化 HCP ELISA 試劑盒保障檢測針對性。上海定制化宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法開發(fā)

宿主細胞蛋白殘留檢測試劑盒的開發(fā)不是一個簡單的過程，是一個對平臺、技術(shù)均有很高要求的整體流程。低豐度宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測富集試劑

湖州申科運用免疫磁珠分離技術(shù)（IMBS），搭配 2D 電泳或 LC-MS 技術(shù)評估抗體覆蓋率。IMBS 的主要流程涵蓋：多克隆抗體與磁珠的偶聯(lián)反應(yīng)、磁珠未結(jié)合位點的封閉處理、HCP 樣本與結(jié)合抗體的磁珠共同孵育反應(yīng)。該過程中，HCP 抗體會結(jié)合可識別的 HCP，未被識別的 HCP 則通過后續(xù)洗滌步驟去除，隨后借助低 pH 等洗脫條件，收集抗體捕獲的 HCP。此方法具備 AAE（抗體親和提取，Antibody Affinity Extraction）免疫層析柱分離的全部優(yōu)勢，同時免疫磁珠可在懸浮狀態(tài)下與 HCP 樣品充分混勻并結(jié)合，HCP 結(jié)合效果更優(yōu)；且依托磁珠吸附，能減少 HCP 與填料的非特異性吸附，進一步提升實驗準確性。
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