細胞基因治療產(chǎn)品用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測供應廠家

來源： 發(fā)布時間：2025-11-26

昆蟲細胞桿狀病毒表達系統(tǒng)（IC-BEVS）是一種真核表達系統(tǒng)，以桿狀病毒為外源基因載體，以昆蟲細胞為宿主實現(xiàn)外源蛋白的生產(chǎn)。該系統(tǒng)具備便于規(guī)?；a(chǎn)、培養(yǎng)成本低、生物安全性高等優(yōu)勢，近年已逐步應用于重組蛋白、rAAV 載體、亞單位疫苗（如病毒樣顆粒（VLP）疫苗）等產(chǎn)品的生產(chǎn)，在生物制品重組蛋白表達領域已得到廣泛應用。Sf9 細胞系源自草地夜蛾細胞系（Spodoptera frugiperda cell line，簡稱 Sf），是當前較為常用的昆蟲細胞系之一。SHENTEK® Sf9 HCP 殘留蛋白檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），可對采用 Sf9 細胞系生產(chǎn)的生物制品中宿主細胞蛋白（HCP）殘留進行定量檢測。該試劑盒的抗體覆蓋率分別為 70.4%-96.0%（采用 IMBS-2D 法）和 91.2%（采用 IMBS-MS 法，Unique Peptide ≥2）。
深入分析宿主細胞蛋白殘留檢測的數(shù)據(jù)，能為生產(chǎn)工藝的優(yōu)化調(diào)整提供明確方向。細胞基因治療產(chǎn)品用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測供應廠家

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在宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方面，工藝特異型檢測試劑盒（upstream-process）專門針對特定生產(chǎn)工藝設計，其關鍵特征是依托產(chǎn)物的實際宿主細胞開展開發(fā)及驗證，通過模擬真實生產(chǎn)流程制備廣譜 HCP 抗原，且要求抗血清具備高覆蓋率以適配工藝變動，從而保障對特定生產(chǎn)流程中 HCP 殘留的高度準確監(jiān)控。平臺型檢測試劑盒（platform）則由生產(chǎn)商圍繞特定表達宿主細胞及相近工藝自主開發(fā)，優(yōu)勢體現(xiàn)在能借助相同參考標準品與試劑，統(tǒng)一監(jiān)測基于該宿主細胞生產(chǎn)的不同產(chǎn)品，適用于上游工藝足夠相似的產(chǎn)品線。通用型檢測試劑盒（commercial）屬于市售廣譜檢測方案，適合相似宿主細胞的常規(guī) HCP 檢測；但由于其制備過程未必能完全模擬目標產(chǎn)物的實際生產(chǎn)場景，因此需嚴格評估多克隆抗體對特定產(chǎn)品 HCP 的覆蓋率，以此確保檢測結果的可靠性。這三類試劑盒覆蓋了從深度定制到通用篩查的各類 HCP 檢測需求。
上海Sf9宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率評估需兼顧不同方法差異，同步推進方法實驗過程質(zhì)控的持續(xù)優(yōu)化與評估。

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在關鍵物料開發(fā)基礎上，湖州申科生物 HCP ELISA 檢測試劑盒的開發(fā)流程還包含第三大關鍵階段 —— 檢測體系開發(fā)及驗證，這一環(huán)節(jié)直接關系檢測方法的可靠性。公司會開展嚴格的檢測體系開發(fā)與驗證工作，驗證方案完全契合 ICH 指導原則及藥典中關于分析方法驗證的標準要求，確保檢測體系的科學性與合規(guī)性。同時，為進一步保障產(chǎn)品品質(zhì)，公司在生產(chǎn)全流程中嚴格落實物料質(zhì)量控制，并全程在潔凈車間環(huán)境中完成生產(chǎn)，從過程管控層面確保試劑盒方法的穩(wěn)健性、重現(xiàn)性與法規(guī)符合性。這套從抗原源頭把控，到關鍵抗體制備，再到檢測體系驗證與潔凈生產(chǎn)的標準化、合規(guī)化全流程開發(fā)模式，并非單一環(huán)節(jié)的質(zhì)量管控，而是形成了完整的品質(zhì)保障鏈條，成為湖州申科 宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測產(chǎn)品品質(zhì)與可靠性的重點支撐。

樣品質(zhì)量是影響宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測結果的因素之一。HCP 檢測覆蓋生物制品生產(chǎn)全流程，包含收獲、純化、制備等多個環(huán)節(jié)，不同樣品基質(zhì)會導致 HCP 檢測結果存在明顯差異。以含佐劑的疫苗為例，佐劑會產(chǎn)生干擾，導致成品中難以檢測 HCP，因此通常在吸附工藝前的原液階段開展檢測。此外，樣品的收集、處理及保存方式也對檢測結果有重要影響。處理方式不當可能造成蛋白降解或變性，進而影響檢測結果。比如將歷史批樣品用作內(nèi)部質(zhì)控品時，需結合其穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，合理設定保存條件與保存期限，以此保障檢測方法的準確性和穩(wěn)定性。
聚焦特定生產(chǎn)流程，工藝特異型試劑盒準確監(jiān)測 HCP 殘留，適配各類工藝變動。

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宿主細胞蛋白殘留檢測中，抗體覆蓋率評估實驗的操作難度較高，需在實驗方法建立階段對關鍵步驟開展充分驗證，以確保實驗方法具備穩(wěn)健性。湖州申科研發(fā)的磁珠捕獲式 IMBS 技術（immunomagnetic beads separation，免疫磁珠分離），在開發(fā)過程中已對關鍵步驟進行充分驗證，相關驗證結果已通過專業(yè)評審，具體驗證內(nèi)容（部分）如下：① 方法優(yōu)化：圍繞磁珠與抗體的偶聯(lián)比例、洗滌液體積、洗滌次數(shù)、洗脫次數(shù)等關鍵參數(shù)開展優(yōu)化驗證，確保方法穩(wěn)健性；② 過程質(zhì)控：二維電泳存在實驗步驟繁瑣、時間跨度大、中間環(huán)節(jié)難把控等問題，因此在等電聚焦實驗環(huán)節(jié)引入熒光標記多肽，可快速判定等電聚焦效果；同時在 SDS-PAGE 電泳兩側增設 40 ng 銀染質(zhì)控樣品，用于控制銀染顯色過程；③ 方法重復性：針對 2D 分析與 LC-MS 分析開展重復性驗證，其中 2D 分析方法的重復性可達 80% 以上，LC-MS 分析方法的重復性可達 90% 以上；④ 上樣量優(yōu)化：針對 2D 分析與 LC-MS 分析實施上樣量驗證，規(guī)避上樣量差異對檢測結果的影響；⑤ 假陽性排查：排查樣品與陰性抗體間是否存在非特異性結合，確認 IMBS 實驗設定的步驟與參數(shù)是否會導致假陽性結果。
宿主檢測方法替換需橋接驗證，確保新舊方法結果一致性與可比性。MRC-5宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比

湖州申科自主研發(fā)IMBS抗體覆蓋率檢測法及低豐度HCP富集技術，合作完成多項課題并發(fā)表成果。細胞基因治療產(chǎn)品用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測供應廠家

在宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測的分析方法里，ELISA法應用較多，也是QC日常放行檢測的主要方式。該方法操作相對簡便、檢測精度較好，便于設定控制范圍與制定技術規(guī)范，適用于產(chǎn)品開發(fā)及過程控制；不過，ELISA檢測依賴抗原與抗體的特異性結合，因此以生物制品中HCP為免疫原制備的抗體質(zhì)量，對檢測結果影響極大。無論是市售ELISA試劑盒，還是實驗室自制的多克隆抗體，若抗體的特異性與適用性不足，都可能導致HCP漏檢，進而給生物制品質(zhì)量安全埋下隱患。另外，ELISA檢測HCP時采用多克隆抗體，無法針對性反映高風險HCP殘留蛋白的實際存在狀況。
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