重組蛋白用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證

來源： 發(fā)布時間：2025-11-04

憑借高分辨質(zhì)譜技術(shù)，湖州申科生物推出宿主細胞蛋白定制化檢測服務(wù)組合，可滿足生物制品殘留蛋白的分析需求。該平臺服務(wù)內(nèi)容包括：1、HCP蛋白檢測定制化服務(wù)：借助ELISA、雙向電泳（2D）與LC-MS/MS技術(shù)，為常規(guī)生物制品檢測、高危及工藝相關(guān)蛋白數(shù)據(jù)庫搭建、特殊生物制品分析提供支持；2、抗體覆蓋率服務(wù)：運用自主研發(fā)的IMBS技術(shù)結(jié)合質(zhì)譜，準確評估ELISA試劑盒對工程細胞HCP的捕獲能力，同時完成校準品表征；3、靶向HCP檢測：專注于高風(fēng)險殘留蛋白的檢測方法開發(fā)；4、蛋白種屬鑒定服務(wù)：利用LC-MS技術(shù)追溯樣品中的物種特異性肽段。該服務(wù)體系以多技術(shù)聯(lián)用和深度定制化策略為支撐，可滿足從基礎(chǔ)篩查到工藝關(guān)鍵雜質(zhì)監(jiān)控的全維度需求。
HCP檢測方法驗證需評估線性范圍、中間精密度、靈敏度等關(guān)鍵參數(shù)。重組蛋白用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證

重組蛋白用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

磷脂酶 B 樣蛋白 2（Phospholipase B-Like 2，PLBL2/PLBD2），憑借強共純化能力、高免疫原性及潛在酶活性，被認定為 CHO 宿主細胞蛋白（HCP）中的關(guān)鍵高風(fēng)險因子之一。當前行業(yè)建議，需針對性開發(fā)特定檢測方法，對這類已知或特定蛋白進行監(jiān)控，以更有效把控其潛在風(fēng)險。SHENTEK® CHO PLBL-2 殘留檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法）由湖州申科生物自主研發(fā)，擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)，是一款 CHO PLBL-2 蛋白通用檢測試劑盒。該試劑盒適用于對 CHO 表達系統(tǒng)生產(chǎn)的生物制品中，CHO HCP 高風(fēng)險蛋白 PLBL-2 進行定量檢測，且操作步驟少、檢測快速，兼具強檢測專一性與穩(wěn)定可靠的性能。
Sf9宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學(xué)驗證部分數(shù)據(jù)表明，定制化HCP檢測試劑盒的檢測準確度比商業(yè)化試劑盒高，更能滿足產(chǎn)品質(zhì)量控制所需。

重組蛋白用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

大腸埃希氏菌（Escherichiacoli，簡稱E.coli，又稱大腸桿菌）作為模式微生物，在生命科學(xué)研究領(lǐng)域應(yīng)用較多。伴隨基因治療產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，它還成為質(zhì)粒DNA（pDNA）生產(chǎn)的主要宿主菌。質(zhì)粒樣品常規(guī)提取工藝中，常使用強堿性溶液進行細胞裂解與蛋白質(zhì)變性，這種處理使其中的宿主細胞蛋白（HCPs）與傳統(tǒng)物理破碎法得到的HCPs差異明顯，進而導(dǎo)致采用免疫學(xué)原理的檢測方法時，殘留檢測結(jié)果偏差較大。湖州申科生物的E.coli克隆菌堿裂HCP殘留檢測試劑盒，適用于大腸埃希氏菌（即大腸桿菌）克隆菌株的HCPs檢測，涵蓋DH5α、Top10、JM109等常見菌株。該試劑盒的抗體制備過程中，采用堿裂工藝制備的HCPs免疫動物，得到專屬抗體，可用于經(jīng)堿液裂解工藝處理后的宿主細胞蛋白（HCPs）定量檢測。

目前利用 Vero 細胞培養(yǎng)的病毒包括狂犬病病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒等，種類多樣，生產(chǎn)工藝也各有不同。湖州申科生物的 Vero 細胞裂解型 HCP 殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），針對工藝中 Vero 細胞裂解后產(chǎn)生的大量不同類型 HCPs，可定量檢測采用 Vero 細胞系生產(chǎn)且經(jīng)細胞裂解工藝收獲的生物制品中宿主細胞蛋白殘留，其抗體和校準品可覆蓋近 3000 種蛋白。該試劑盒操作簡便，能提升實驗人員的時間利用效率。抗體覆蓋率分別為 65.1%-85.1%（IMBS-2D）和 76.9%（IMBS-MS，Unique Peptide≥2）。試劑盒嚴格依據(jù) ISO13485 質(zhì)量體系生產(chǎn)，且按法規(guī)要求完成性能驗證，各項性能均滿足 Vero 宿主細胞蛋白檢測需求。
基于HCP的復(fù)雜性，檢測中常遇到中間品，尤其是原液樣品無法達到稀釋線性，可能與樣品基質(zhì)的干擾有關(guān)。

重組蛋白用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

全球范圍內(nèi)快速增長的抗體、蛋白類等生物藥，均由對應(yīng)的工程細胞生產(chǎn)制備。在生物制品生產(chǎn)流程中，宿主細胞產(chǎn)生的內(nèi)源性蛋白（即宿主細胞蛋白，Host Cell Proteins, HCPs），會隨不同工藝環(huán)節(jié)部分殘留在終產(chǎn)品中。HCPs 作為外源蛋白，可能在不同程度上誘發(fā)機體免疫應(yīng)答，進而引發(fā)過敏反應(yīng)或其他不良反應(yīng)；此外，部分殘留 HCPs 具備蛋白酶或脂酶活性，可能造成蛋白藥物或輔料降解，從而加大藥物質(zhì)量與療效的不穩(wěn)定性?；谏鲜鲲L(fēng)險，對藥物中 HCPs 開展定性與定量檢測至關(guān)重要。全球主要藥典（如美國藥典、歐洲藥典、中國藥典）均針對 HCPs 檢測制定了具體要求與標準。
湖州申科自主研發(fā)IMBS抗體覆蓋率檢測法及低豐度HCP富集技術(shù)，合作完成多項課題并發(fā)表成果。浙江Hi-5宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測供應(yīng)廠家

宿主檢測方法替換需橋接驗證，確保新舊方法結(jié)果一致性與可比性。重組蛋白用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證

宿主細胞蛋白（HCP）ELISA 定制化開發(fā)平臺需具備完善的開發(fā)體系、可靠的技術(shù)平臺與專業(yè)的開發(fā)團隊，以此實現(xiàn)長期穩(wěn)定供應(yīng)符合法規(guī)要求的試劑盒。其中，校準品作為關(guān)鍵原材料，其良好的穩(wěn)定性與溯源保障對試劑盒生命周期至關(guān)重要。為確保校準品穩(wěn)定，通常采用凍干工藝制備，通過單因素方差分析方法評估其均一性，并依據(jù)法規(guī)規(guī)定的蛋白定量方法為校準品賦值，同時溯源至國家標準品（如有）或 BSA 國家標準品，從源頭保障檢測的準確性與合規(guī)性，為后續(xù)檢測體系的可靠運行奠定基礎(chǔ)。
重組蛋白用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體覆蓋率驗證