上海通用型宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比

來源： 發(fā)布時間：2025-11-04

在宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測的分析方法里，ELISA法應(yīng)用較多，也是QC日常放行檢測的主要方式。該方法操作相對簡便、檢測精度較好，便于設(shè)定控制范圍與制定技術(shù)規(guī)范，適用于產(chǎn)品開發(fā)及過程控制；不過，ELISA檢測依賴抗原與抗體的特異性結(jié)合，因此以生物制品中HCP為免疫原制備的抗體質(zhì)量，對檢測結(jié)果影響極大。無論是市售ELISA試劑盒，還是實驗室自制的多克隆抗體，若抗體的特異性與適用性不足，都可能導(dǎo)致HCP漏檢，進而給生物制品質(zhì)量安全埋下隱患。另外，ELISA檢測HCP時采用多克隆抗體，無法針對性反映高風險HCP殘留蛋白的實際存在狀況。
抗體覆蓋率評估分析需要考慮不同方法間存在的差異，以及如何持續(xù)改進和評估方法實驗過程的質(zhì)量控制。上海通用型宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比

上海通用型宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

由于宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒關(guān)鍵組分（校準品、檢測抗體）存在固有且明顯的變異度，不同試劑盒對同一樣本的檢測結(jié)果，不僅可能在數(shù)值上出現(xiàn)較大差距，在特定 HCP（如低豐度或高風險 HCP）的檢出能力上，也可能存在明顯偏差，這對生物制品 HCP 殘留的準確管控構(gòu)成挑戰(zhàn)。因此，為確保檢測結(jié)果能真實反映自身產(chǎn)品的 HCP 殘留狀況，企業(yè)必須結(jié)合自身產(chǎn)品特性（如宿主細胞類型、目標產(chǎn)物屬性）與生產(chǎn)工藝特點，對不同品牌、不同類型的試劑盒開展系統(tǒng)且詳細的平行比對實驗。同時，還需進行針對性的適用性評估，驗證試劑盒對自身產(chǎn)品的檢測準確性、特異性及穩(wěn)定性，再篩選出與自身產(chǎn)品匹配度適合的檢測方案，為生物制品的 HCP 殘留控制提供可靠技術(shù)支撐，保障產(chǎn)品質(zhì)量與用藥安全。
釀酒酵母宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測抗體制備臨床 III 期及商業(yè)化生產(chǎn)階段，法規(guī)推薦用定制化 HCP ELISA 試劑盒保障檢測針對性。

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湖州申科生物依托先進的整合技術(shù)平臺，在 HCP 檢測領(lǐng)域構(gòu)筑優(yōu)勢。公司自主研發(fā)出突破性技術(shù)，包括基于 IMBS 的抗體覆蓋率檢測方法與基于核酸文庫的低豐度 HCP 富集技術(shù)，有效提升 HCP 檢測靈敏度與抗體覆蓋能力，相關(guān)成果已在《中國新藥雜志》《藥物分析雜志》等期刊發(fā)表，且被納入國家科技重大專項。同時，借助前沿的精密分析平臺，湖州申科打造了覆蓋完整 HCP 分析鏈條的 LC-MS 解決方案，涵蓋抗原一致性評價、IMBS 前處理、低豐度蛋白富集、生信分析及專屬數(shù)據(jù)庫構(gòu)建等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，構(gòu)建起從樣品管理到風險分析的閉環(huán)體系。該平臺嚴格遵循法規(guī)要求，所有檢測技術(shù)均通過符合 ICH 及藥典標準的方法學(xué)驗證，確保檢測數(shù)據(jù)可靠，且滿足生物制品申報（如 IND/BLA）的法規(guī)要求。憑借這一技術(shù)整合能力，公司已為國內(nèi)外上百家生物醫(yī)藥企業(yè)提供從工藝開發(fā)到質(zhì)控放行的一站式 HCP 檢測服務(wù)，助力單抗、疫苗等產(chǎn)品提升安全性與合規(guī)性。

宿主細胞蛋白（HCP）ELISA 定制化開發(fā)平臺需具備完善的開發(fā)體系、可靠的技術(shù)平臺與專業(yè)的開發(fā)團隊，以此實現(xiàn)長期穩(wěn)定供應(yīng)符合法規(guī)要求的試劑盒。其中，校準品作為關(guān)鍵原材料，其良好的穩(wěn)定性與溯源保障對試劑盒生命周期至關(guān)重要。為確保校準品穩(wěn)定，通常采用凍干工藝制備，通過單因素方差分析方法評估其均一性，并依據(jù)法規(guī)規(guī)定的蛋白定量方法為校準品賦值，同時溯源至國家標準品（如有）或 BSA 國家標準品，從源頭保障檢測的準確性與合規(guī)性，為后續(xù)檢測體系的可靠運行奠定基礎(chǔ)。
基于HCP的復(fù)雜性，檢測中常遇到中間品，尤其是原液樣品無法達到稀釋線性，可能與樣品基質(zhì)的干擾有關(guān)。

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宿主細胞蛋白（HCP）是生物制品中源自細胞基質(zhì)的殘留雜質(zhì)，異質(zhì)性特征明顯。其復(fù)雜性主要體現(xiàn)在三方面：①理化特性差異：包含胞內(nèi)與分泌蛋白（涉及關(guān)鍵生理功能），等電點（pI 3-11）、分子量（5-250kDa）及疏水性的區(qū)間跨度大；②上游工藝影響：不同發(fā)酵工藝（如細胞株選擇、培養(yǎng)條件控制）會誘導(dǎo)獨特的翻譯后修飾（PTM），進而增加 HCP 的總量與生化復(fù)雜性；③下游工藝與產(chǎn)物特性干擾：抗體、細胞因子等重組蛋白或病毒類藥物的純化工藝，會選擇性殘留特定 HCP；同時，產(chǎn)物形式（如大腸桿菌的包涵體 / 可溶性表達）也會直接影響 HCP 的殘留譜。針對特定生產(chǎn)工藝開發(fā)定制化檢測方案，是準確監(jiān)控 HCP 殘留的關(guān)鍵所在。
HCP具有異質(zhì)性，體現(xiàn)在分子本身的多樣性以及和工藝相關(guān)的變異性。宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測高風險蛋白

定制化宿主細胞蛋白殘留檢測試劑盒產(chǎn)生的HCP抗體特異性更好，能檢出高風險HCP。上海通用型宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比

美國藥典（USP）1132 章節(jié)中，推薦的 HCP 抗體純化方式有兩種，分別是 Protein A/Protein G 親和柱層析法與 HCP 抗原親和柱層析法。這兩種方法各有特點與不足，且均滿足監(jiān)管層面的要求。在實際應(yīng)用場景中，針對不同產(chǎn)品，兩種方法可能造成檢測結(jié)果的差異。兩種方法所獲抗體的關(guān)鍵差異，在于 HCP 抗體有效含量的占比不同。其中，HCP 抗原親和柱層析法的有效含量占比明顯更高，但該方法存在部分 HCP 抗體流失的情況，這會使得針對特定樣本的檢測結(jié)果低于前者，因此企業(yè)在實際建立檢測方法時，需開展充分評估。此外，HCP 抗原親和柱層析法對純化工藝的要求更為嚴格，若要確?？贵w的批間一致性，需重點考察 HCP 抗原柱的制備工藝、柱子的使用壽命以及再次制備時的一致性等關(guān)鍵問題。
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