上海通用型宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)方法對(duì)比

來源： 發(fā)布時(shí)間：2025-12-04

HEK293細(xì)胞源自人胚腎細(xì)胞，在細(xì)胞與基因治療領(lǐng)域應(yīng)用較廣，例如用于病毒載體生產(chǎn)等。盡管生物制品會(huì)經(jīng)過多步純化工藝去除相關(guān)雜質(zhì)，但微量殘留的宿主細(xì)胞蛋白（HCP）仍可能引發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答，進(jìn)而影響產(chǎn)品質(zhì)量與安全性。因此，需對(duì)生產(chǎn)工藝中殘留的HEK293 HCP開展定量檢測(cè)，確保其符合產(chǎn)品放行標(biāo)準(zhǔn)。湖州申科生物的HEK293 HCP殘留檢測(cè)試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），適用于對(duì)HEK293及HEK293T來源生物制品（如重組蛋白類、細(xì)胞和基因治療類等）中的宿主細(xì)胞蛋白進(jìn)行定量檢測(cè)。該試劑盒檢測(cè)步驟少、速度快，且具備專一性強(qiáng)、性能穩(wěn)定可靠的特點(diǎn)。
宿主細(xì)胞蛋白殘留檢測(cè)試劑盒的開發(fā)不是一個(gè)簡(jiǎn)單的過程，是一個(gè)對(duì)平臺(tái)、技術(shù)均有很高要求的整體流程。上海通用型宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)方法對(duì)比

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方法選擇是影響宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)結(jié)果的因素之一。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）與液相色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS），是當(dāng)前 HCP 檢測(cè)領(lǐng)域的兩類常用方法。據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)，當(dāng)前在總 HCP 定量檢測(cè)中，ELISA 仍為主流技術(shù)；而 MS 法可用于特定蛋白（如高風(fēng)險(xiǎn)蛋白）的鑒定與定量，已成為重要的互補(bǔ)手段。此外，檢測(cè)過程中所用試劑與耗材的質(zhì)量，會(huì)直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。質(zhì)量不達(dá)標(biāo)的試劑，可能引發(fā)檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽性或假陰性。舉例來說，若抗體的特異性與親和力不足，可能在 ELISA 檢測(cè)中產(chǎn)生交叉反應(yīng)；若抗原代表性不足或抗體覆蓋率偏低，則可能造成漏檢；而稀釋液抗干擾能力較弱時(shí)，也會(huì)對(duì)檢測(cè)準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。相關(guān)案例研究顯示，采用定制化方法替代原有商業(yè)化試劑盒后，抗原代表性與抗體覆蓋率明顯提升，HCP 檢測(cè)值也呈現(xiàn)整體升高的趨勢(shì)。
MRC-5宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)試劑盒在生物制品質(zhì)控領(lǐng)域需要基于產(chǎn)品特性與風(fēng)險(xiǎn)分析，聚焦關(guān)鍵質(zhì)控點(diǎn)開發(fā)宿主蛋白殘留檢測(cè)方法。

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各國法規(guī)要求對(duì)生物藥品開展分析與純化處理，以將宿主細(xì)胞蛋白（HCP）降至可接受水平；即便終產(chǎn)品中痕量 HCP 進(jìn)入患者體內(nèi)，目前仍不明確特定殘留蛋白質(zhì)雜質(zhì)是否會(huì)對(duì)藥物的穩(wěn)定性或免疫原性產(chǎn)生影響。在 HCP 限量標(biāo)準(zhǔn)方面，美國藥典推薦終產(chǎn)品 HCP 水平為 1-100 ng/mg；中國藥典各論則明確，大腸桿菌（E.coli）菌體 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.10%（即 1000 ng/mg），CHO 細(xì)胞 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.05%（即 500 ng/mg），假單胞菌 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.02%（即 200 ng/mg）。

美國藥典（USP）1132 章節(jié)中，推薦的 HCP 抗體純化方式有兩種，分別是 Protein A/Protein G 親和柱層析法與 HCP 抗原親和柱層析法。這兩種方法各有特點(diǎn)與不足，且均滿足監(jiān)管層面的要求。在實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景中，針對(duì)不同產(chǎn)品，兩種方法可能造成檢測(cè)結(jié)果的差異。兩種方法所獲抗體的關(guān)鍵差異，在于 HCP 抗體有效含量的占比不同。其中，HCP 抗原親和柱層析法的有效含量占比明顯更高，但該方法存在部分 HCP 抗體流失的情況，這會(huì)使得針對(duì)特定樣本的檢測(cè)結(jié)果低于前者，因此企業(yè)在實(shí)際建立檢測(cè)方法時(shí)，需開展充分評(píng)估。此外，HCP 抗原親和柱層析法對(duì)純化工藝的要求更為嚴(yán)格，若要確保抗體的批間一致性，需重點(diǎn)考察 HCP 抗原柱的制備工藝、柱子的使用壽命以及再次制備時(shí)的一致性等關(guān)鍵問題。
宿主檢測(cè)方法替換需橋接驗(yàn)證，確保新舊方法結(jié)果一致性與可比性。

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HCP 是宿主細(xì)胞（多為哺乳動(dòng)物細(xì)胞或微生物）所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，這類蛋白質(zhì)存在潛在風(fēng)險(xiǎn)，可能對(duì)藥物的安全性與有效性產(chǎn)生影響。因此，宿主細(xì)胞蛋白（HCP ）殘留量成為生物藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性，需在藥物開發(fā)與生產(chǎn)階段，對(duì) HCP 的存在進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控、管理并做好記錄。隨著生產(chǎn)流程推進(jìn)，生物制品純度逐步提升，但 HCP 的總量與種類也在不斷減少，這無疑增加了 HCP 分析與監(jiān)測(cè)工作的難度。在此背景下，開發(fā)高效的 HCP 富集材料及技術(shù)便顯得尤為重要。低豐度宿主殘留蛋白富集試劑盒，專為富集生物制品（如單抗、融合蛋白等）中的 HCP 并去除高豐度蛋白而設(shè)計(jì)，其通過磁珠法構(gòu)建多樣化且復(fù)雜的親和配體庫，以實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白的高效識(shí)別與結(jié)合。該試劑盒的設(shè)計(jì)不僅覆蓋傳統(tǒng)單一蛋白，還可適配融合蛋白、單克隆抗體等多種生物樣本類型，體現(xiàn)出較強(qiáng)的適用性與靈活性。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，定制化 HCP 檢測(cè)試劑盒檢測(cè)值高于商業(yè)化產(chǎn)品，更契合產(chǎn)品質(zhì)量控制需求。廣東定制化宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)抗體覆蓋率驗(yàn)證

湖州申科開發(fā)多種宿主 HCP 檢測(cè)試劑盒，提供抗體覆蓋率驗(yàn)證服務(wù)。上海通用型宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)方法對(duì)比

美國藥典 USP 通則 <1132.1>《質(zhì)譜法測(cè)定生物藥中殘留宿主細(xì)胞蛋白》（Residual Host Cell Protein Measurement in Biopharmaceuticals by Mass Spectrometry），主要內(nèi)容是介紹 LC-MS 技術(shù)在宿主細(xì)胞殘留蛋白檢測(cè)中的應(yīng)用。該通則圍繞樣品制備、質(zhì)譜測(cè)試條件建立、數(shù)據(jù)分析、質(zhì)譜方法驗(yàn)證等維度，詳細(xì)說明質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用于 HCPs 檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)及需注意的事項(xiàng)。作為先進(jìn)的分析技術(shù)平臺(tái)，質(zhì)譜技術(shù)在 HCPs 分析中的應(yīng)用，無論是單獨(dú)使用，還是與 ELISA 及其他分析方法聯(lián)合使用，都能幫助生產(chǎn)企業(yè)在產(chǎn)品全生命周期中更清晰地理解并建立 HCPs 檢測(cè)方法，進(jìn)而保障產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。
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