河南復雜基質(zhì)支原體檢測可比性驗證

來源： 發(fā)布時間：2025-12-04

湖州申科推出的 MycoSHENTEK® 支原體驗證菌株，符合全球藥典要求，目前已提供口腔支原體、肺炎支原體、豬鼻支原體三種菌株，后續(xù)將逐步擴充其他驗證用菌株。該系列菌株溯源至全球保藏機構(gòu)并獲得正式授權(quán)，經(jīng)培養(yǎng)法測定 CFU（菌落形成單位）與 dPCR 法測定 GC（基因組拷貝數(shù)），實現(xiàn)準確定量標定，濃度涵蓋 10CFU 和 100CFU 兩種規(guī)格，每盒含 3 管，完全滿足支原體檢測方法驗證需求。菌株經(jīng)滅活處理，無風險，使用時只需加入相應(yīng)體積樣品基質(zhì)即可開展驗證，操作便捷，同時通過雙重定量檢測確保質(zhì)量可控，為 NAT 方法驗證提供可靠的標準物質(zhì)支撐。
EP 新規(guī)明確支原體驗證菌株 GC/CFU 比值＜10，需在指數(shù)階段收獲以保障活性與分散性。河南復雜基質(zhì)支原體檢測可比性驗證

河南復雜基質(zhì)支原體檢測可比性驗證,支原體檢測

全球主流藥典對支原體 NAT 檢測的標準菌株選擇形成了明確共識，中國、歐洲、美國、日本四國藥典一致推薦優(yōu)先使用豬鼻支原體、口腔支原體、肺炎支原體三種菌株，用于 NAT 方法檢測限的驗證，這一選擇基于支原體的污染發(fā)生頻率與進化關(guān)系。不同地區(qū)法規(guī)的驗證范圍略有差異：EP、USP、ChP 要求覆蓋特異性、檢測限、耐受性，WHO 還需包含半定量與定性實驗；部分地區(qū)如歐洲藥典額外納入萊氏無膽甾原體、滑液支原體等菌株，針對昆蟲和植物來源物料生產(chǎn)場景則需關(guān)注螺原體等特殊菌株。合規(guī)的標準菌株是 NAT 檢測方法驗證的前提，其溯源性與授權(quán)資質(zhì)直接影響檢測結(jié)果的認可度。
江蘇生物制品支原體檢測使用性驗證高濃度質(zhì)粒樣品在進行支原體檢測時，需通過濃縮離心預處理，提升支原體檢出率。

河南復雜基質(zhì)支原體檢測可比性驗證,支原體檢測

支原體 NAT 檢測的準確性與可靠性受多重因素綜合影響，需從人員、方法、設(shè)備、試劑耗材、實驗室環(huán)境五方面嚴格把控。人員需接受專業(yè)培訓，熟練掌握 PCR 技術(shù)理論與實操流程，積累足夠經(jīng)驗并具備責任心，確保操作規(guī)范性。方法建立需遵循合理流程并完成充分驗證，避免因方法缺陷導致結(jié)果偏差。設(shè)備方面，PCR 儀與前處理設(shè)備的性能、精度、穩(wěn)定性及定期校準至關(guān)重要，直接影響檢測數(shù)據(jù)的重復性。試劑耗材需滿足要求：前處理試劑能應(yīng)對復雜樣本基質(zhì)、耐受常見干擾，檢測試劑經(jīng)性能驗證且批間穩(wěn)定性良好，同時需選用質(zhì)量合格的耗材。實驗室需合理布局，建立完善的管理規(guī)范與污染防控措施，為檢測提供潔凈、可控的環(huán)境，避免外部因素干擾。

湖州申科構(gòu)建了具有完備資質(zhì)的支原體技術(shù)服務(wù)平臺，為企業(yè)提供多元化支持。平臺擁有 BSL-2/P2 微生物實驗室備案資質(zhì)，遵循 GMP-like 質(zhì)量體系，具備支原體培養(yǎng)法、指示細胞法與 qPCR 法的檢測及驗證能力，配備符合藥典要求的支原體標準菌株庫與高靈敏度培養(yǎng)基（含液體、固體、半流體）。企業(yè)已通過 ISO13485:2016 質(zhì)量管理體系認證（證書號 MD 709873），檢測中心獲得 CNAS 認證（注冊號 CNAS L21942），符合 ISO/IEC 17025:2017 標準，具備國際互認資質(zhì)。平臺可提供多元化技術(shù)服務(wù)，包括支原體 qPCR 法檢測能力建立、實驗員能力考核、質(zhì)量體系與流程搭建、實驗室設(shè)計方案優(yōu)化，以及樣品檢測（三種方法）、樣品適用性驗證、方法學驗證、傳統(tǒng)法與 qPCR 法比對、特殊菌株定制生產(chǎn)等，申報階段可配合客戶與監(jiān)管機構(gòu)完成現(xiàn)場審計。
支原體檢測過程中，每批次培養(yǎng)基需做靈敏度測試，確保檢測有效。

河南復雜基質(zhì)支原體檢測可比性驗證,支原體檢測

湖州申科圍繞支原體檢測構(gòu)建了完整的產(chǎn)品體系，為企業(yè)提供一站式解決方案。主要產(chǎn)品包括 AdvSHENTEK 外源因子全自動核酸檢測分析系統(tǒng)（貨號 1603101）、一體化支原體檢測卡盒（貨號 1509100），以及溯源性強的支原體驗證菌株（口腔支原體 1501501、肺炎支原體 1501503、豬鼻支原體 1501505），驗證菌株均配套 DNA 稀釋液，滿足方法驗證需求。整套方案整合了快速、簡單、準確、合規(guī)四大優(yōu)勢，既解決了傳統(tǒng)檢測周期長、污染風險高、操作復雜的痛點，又能滿足生物藥生產(chǎn)全流程的支原體篩查需求。應(yīng)用中，可幫助企業(yè)提升產(chǎn)品放行速度、降低質(zhì)量風險，同時減少人力與場地投入，為細胞療法、疫苗、抗體藥物等生物制品的質(zhì)量控制提供安全保障。
支原體檢測取樣需按產(chǎn)品體積設(shè)計，10-1000mL 樣品取總體積 1%，保障結(jié)果代表性。陜西細胞療法產(chǎn)品支原體檢測使用性驗證

支原體污染會改變細胞生理特性，導致生長緩慢、基因表達異常，需嚴格防控。河南復雜基質(zhì)支原體檢測可比性驗證

支原體 NAT 檢測的樣本結(jié)果需結(jié)合 FAM 信號與 VIC 信號的表現(xiàn)綜合判定，同時警惕抑制現(xiàn)象對結(jié)果的影響。若 FAM 信號 2 復孔有 1 孔以上 Ct<40 且呈有效 “S” 型擴增，VIC 信號 2 復孔 Ct<40 且呈有效 “S” 型擴增，判定為陽性；若 VIC 信號 2 復孔 Ct≥40 或無明顯擴增曲線，則為陽性但存在抑制。若 FAM 信號 2 復孔 Ct≥40 或無明顯擴增曲線，VIC 信號 2 復孔 Ct<40 且呈有效 “S” 型擴增，判定為陰性；若 VIC 信號同樣 Ct≥40 或無明顯擴增曲線，則陰陽性無法判斷且存在抑制。出現(xiàn)抑制現(xiàn)象需重測，重測仍有抑制時，陽性傾向樣本可適當稀釋，陰性傾向樣本需優(yōu)化提取條件。
河南復雜基質(zhì)支原體檢測可比性驗證