湖州申科生物依據(jù)不同宿主的實際生產(chǎn)工藝，借助高質(zhì)量免疫原與HCP多抗的標(biāo)準(zhǔn)化制備流程，制備出高效價、高覆蓋率的抗體，進(jìn)而開發(fā)出SHENTEK?HCP檢測試劑盒：適配大腸桿菌表達(dá)菌（BL21）生產(chǎn)工藝及克隆菌堿裂法提取質(zhì)粒工藝，以及適配CHO、MDCK、HEK293、Sf9、VERO、畢赤酵母等不同宿主，可用于中間品、原液及終產(chǎn)品的HCP定量監(jiān)測。為保障ELISA法對HCP定量檢測的準(zhǔn)確性，需對HCP抗體覆蓋率開展驗證。湖州申科的抗體覆蓋率平臺，采用2D Clean-up試劑盒去除蛋白樣品中的干擾物（如洗滌劑、鹽、脂質(zhì)、酚類、核酸等離子污染物），同時設(shè)置2D質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品實施嚴(yán)格質(zhì)控，并以陰性抗...

HEK293細(xì)胞源自人胚腎細(xì)胞，在細(xì)胞與基因治療領(lǐng)域應(yīng)用較廣，例如用于病毒載體生產(chǎn)等。盡管生物制品會經(jīng)過多步純化工藝去除相關(guān)雜質(zhì)，但微量殘留的宿主細(xì)胞蛋白（HCP）仍可能引發(fā)機體免疫應(yīng)答，進(jìn)而影響產(chǎn)品質(zhì)量與安全性。因此，需對生產(chǎn)工藝中殘留的HEK293 HCP開展定量檢測，確保其符合產(chǎn)品放行標(biāo)準(zhǔn)。湖州申科生物的HEK293 HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），適用于對HEK293及HEK293T來源生物制品（如重組蛋白類、細(xì)胞和基因治療類等）中的宿主細(xì)胞蛋白進(jìn)行定量檢測。該試劑盒檢測步驟少、速度快，且具備專一性強、性能穩(wěn)定可靠的特點。 湖州申科宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒校...

MDCK（Madin-DarbyCanineKidney，馬丁達(dá)比犬腎上皮細(xì)胞）細(xì)胞系是源于犬腎的持續(xù)性細(xì)胞系，廣泛應(yīng)用于流感病毒增殖純化、流感疫苗生產(chǎn)等過程，作為細(xì)胞基質(zhì)使用。憑借高病毒產(chǎn)量與滴度、無適應(yīng)性突變、易馴化等優(yōu)勢，MDCK細(xì)胞已成為業(yè)界公認(rèn)的流感病毒毒株分離及流感疫苗生產(chǎn)適配細(xì)胞系。和其他產(chǎn)品雜質(zhì)類似，MDCK宿主殘留蛋白（HCP）可能對生物制品的安全性與有效性產(chǎn)生不良影響，因此在生產(chǎn)監(jiān)測、產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)，需對其開展定量研究并實施嚴(yán)格控制。SHENTEK?MDCK HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），是湖州申科生物自主研發(fā)、擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)且關(guān)鍵試劑實現(xiàn)全國產(chǎn)化的...

湖州申科生物憑借自主可控的供應(yīng)鏈與經(jīng)嚴(yán)格驗證的技術(shù)性能，確保 HCP 檢測試劑盒的長期穩(wěn)定供應(yīng)及出色分析能力。一方面，公司實現(xiàn)關(guān)鍵物料自研自產(chǎn)：校準(zhǔn)品通過凍干工藝大規(guī)模生產(chǎn)，能穩(wěn)定儲存 10 年以上；抗體經(jīng)大動物免疫制備，產(chǎn)量可支撐≥10,000 盒試劑盒生產(chǎn)，確保同批次抗體連續(xù)供應(yīng)超 10 年；試劑盒經(jīng)多批次驗證，批內(nèi)與批間一致性表現(xiàn)良好。另一方面，所有產(chǎn)品均參照 ICH Q2（R2）及 ICH M10 法規(guī)要求完成驗證：以大腸桿菌（E.coli）HCP 產(chǎn)品為例，其線性范圍（1-243 ng/mL）的 R2>0.999，各濃度點回收率偏差≤5%；準(zhǔn)確度處于 81.2%-111.6% 區(qū)...

湖州申科生物通過自主可控的供應(yīng)鏈體系與嚴(yán)格驗證的技術(shù)性能，確保HCP檢測試劑盒的長期穩(wěn)定供應(yīng)與優(yōu)異的分析能力。一方面，公司實現(xiàn)了關(guān)鍵物料的自研自產(chǎn)：校準(zhǔn)品采用凍干工藝大規(guī)模制備，可穩(wěn)定保存10年以上；抗體通過大動物免疫獲得，產(chǎn)量可滿足≥10,000盒試劑盒的生產(chǎn)需求，保障同批次抗體持續(xù)供應(yīng)超過10年；試劑盒經(jīng)多批次驗證顯示良好的批內(nèi)與批間一致性。另一方面，所有產(chǎn)品參考ICH Q2（R2）和ICH M10法規(guī)要求完成驗證：以E.coli HCP產(chǎn)品為例，其線性范圍（243-1 ng/mL）的R2>0.999，各濃度點回收率偏差≤5%；準(zhǔn)確度達(dá)81.2%-111.6%，中間精密度CV值5.7%...

湖州申科在宿主細(xì)胞蛋白（HCP）ELISA 檢測技術(shù)領(lǐng)域具備深厚技術(shù)積累，已成功搭建高質(zhì)量全流程自有開發(fā)平臺，覆蓋 HCP 檢測試劑盒研發(fā)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)：①抗原表征與制備：依托合規(guī)平臺的 HCP Reference/Antigen 制備能力，采用 2D 凝膠電泳等先進(jìn)技術(shù)保障抗原庫的代表性；②動物免疫與抗體制備：憑借自有免疫動物平臺，把控免疫原設(shè)計及動物免疫流程，獲得高特異性、廣覆蓋度的抗體；③體系開發(fā)與驗證：借助成熟技術(shù)經(jīng)驗開發(fā)高靈敏度、高穩(wěn)定性檢測體系，且嚴(yán)格依照 GMP 標(biāo)準(zhǔn)完成方法學(xué)驗證。該平臺通過全流程自主可控的技術(shù)整合，從源頭保障試劑盒性能的一致性與可靠性，降低不同批次試劑盒的檢測...

湖州申科生物參照 USP 通則 <1132.1> 的相關(guān)內(nèi)容，憑借公司在生物制品質(zhì)量控制領(lǐng)域十余年的深耕經(jīng)驗，對 LC-MS 檢測 HCPs 的方法開展評價與優(yōu)化。同時通過為 LC-MS 檢測 HCPs 的整體流程構(gòu)建完整質(zhì)控體系，建立起一套抗干擾能力強、穩(wěn)定性佳、準(zhǔn)確度高且結(jié)果真實可靠的 LC-MS 檢測 HCPs 標(biāo)準(zhǔn)方法。該檢測技術(shù)平臺包含樣品制備、質(zhì)譜檢測、數(shù)據(jù)生信分析及質(zhì)譜結(jié)果方法驗證四個部分，目前利用該 LC-MS 平臺已完成對 293T、不同工藝大腸桿菌（E.coli）、CHO、Vero、MDCK、Sf9 等不同工程細(xì)胞 HCPs 抗體覆蓋率的檢測分析。 湖州申科 HCP檢測...

畢赤酵母（Pichia pastoris）作為第二代酵母表達(dá)系統(tǒng)的代表性菌株，已被美國 FDA 認(rèn)定為 GRAS（一般認(rèn)為安全）級微生物，具備表達(dá)水平高、產(chǎn)物活性優(yōu)、培養(yǎng)成本低、易于擴大至工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢。在生物制藥領(lǐng)域，酶制劑、胰島素、表皮生長因子、膠原蛋白等多款生物制劑，已借助畢赤酵母系統(tǒng)實現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。和其他產(chǎn)品雜質(zhì)類似，畢赤酵母宿主殘留蛋白（HCP）可能對生物制品的安全性與有效性造成不利影響，故而在生產(chǎn)監(jiān)測、產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)中，需對其開展定量研究并實施嚴(yán)格控制。SHENTEK? 畢赤酵母 HCP 殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），是湖州申科生物自主研發(fā)的畢赤酵母 HCP 通用檢測...

宿主細(xì)胞蛋白（HCP）是生物制品中源自細(xì)胞基質(zhì)的殘留雜質(zhì)，異質(zhì)性特征明顯。其復(fù)雜性主要體現(xiàn)在三方面：①理化特性差異：包含胞內(nèi)與分泌蛋白（涉及關(guān)鍵生理功能），等電點（pI 3-11）、分子量（5-250kDa）及疏水性的區(qū)間跨度大；②上游工藝影響：不同發(fā)酵工藝（如細(xì)胞株選擇、培養(yǎng)條件控制）會誘導(dǎo)獨特的翻譯后修飾（PTM），進(jìn)而增加 HCP 的總量與生化復(fù)雜性；③下游工藝與產(chǎn)物特性干擾：抗體、細(xì)胞因子等重組蛋白或病毒類藥物的純化工藝，會選擇性殘留特定 HCP；同時，產(chǎn)物形式（如大腸桿菌的包涵體 / 可溶性表達(dá)）也會直接影響 HCP 的殘留譜。針對特定生產(chǎn)工藝開發(fā)定制化檢測方案，是準(zhǔn)確監(jiān)控 HC...

美國藥典 <1132> 與歐洲藥典 < 2.6.34 > 建議，對即將進(jìn)入商業(yè)化生產(chǎn)（臨床 III 期及后續(xù)階段）或生產(chǎn)工藝已穩(wěn)定的生物制品，采用定制化 ELISA 試劑盒開展宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測，背后原因主要包括四點：①確保檢測方法能充分覆蓋實際工藝產(chǎn)生的 HCPs，防止漏檢關(guān)鍵雜質(zhì)；②為更準(zhǔn)確的免疫原性與安全性評估提供支持；③提供真實的工藝表征數(shù)據(jù)，而非推測性數(shù)據(jù)；④滿足商業(yè)化生產(chǎn)質(zhì)量控制對方法一致性的要求。此外，研究人員對當(dāng)前市場常見的 HCP ELISA 商業(yè)化試劑盒進(jìn)行測試，并將其與 HCP ELISA 定制化試劑盒對比。實驗結(jié)果顯示，不同商業(yè)化試劑盒檢測同一樣品的數(shù)值...

為何定制化試劑盒會成為宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測的優(yōu)先選擇？關(guān)鍵原因與檢測準(zhǔn)確性、藥物安全性緊密關(guān)聯(lián)。HCP ELISA 檢測屬于多分析物檢測技術(shù)，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，高度依賴校準(zhǔn)品品質(zhì)、抗體質(zhì)量及檢測方法的構(gòu)建。定制化 HCP ELISA 檢測試劑盒的主要優(yōu)勢，在于其依托更具代表性的 HCP 抗原對動物進(jìn)行免疫，由此制備的 HCP 抗體針對性更突出。這類針對性抗體可大幅降低 HCP 漏檢風(fēng)險，特別是針對生產(chǎn)工藝中特有的高風(fēng)險 HCP 因子，能呈現(xiàn)更優(yōu)的檢出成效，為藥物的安全性、有效性及質(zhì)量可控性提供堅實保障。 宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測對保障生物制品安全性和有效性至關(guān)重要。北京E...

由于 HCPs 屬于復(fù)雜的多分析物，為制備覆蓋率盡可能高的抗體（以覆蓋工藝特有的高風(fēng)險 HCPs），需采用可靠的免疫策略。獲得符合性能要求的抗體后，需借助經(jīng)過驗證的 2D 或 LC-MS 方法對抗體覆蓋率進(jìn)行表征，確保抗體可充分覆蓋各實際工藝下產(chǎn)生的 HCPs。在擁有代表性抗原與優(yōu)良性能抗體的基礎(chǔ)上，開展 ELISA 檢測體系開發(fā)，涵蓋原輔料篩選與制備研究、各組分工藝及反應(yīng)體系研究、穩(wěn)定性研究等重要內(nèi)容。檢測體系開發(fā)完成后，需依據(jù) ICH 及藥典要求開展分析方法驗證評估，確保體系的線性、范圍、檢測限、定量限、準(zhǔn)確度、精密度、專屬性及耐用性均滿足法規(guī)要求。 定制化宿主細(xì)胞蛋白殘留檢測試劑盒產(chǎn)...

由于宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒關(guān)鍵組分（校準(zhǔn)品、檢測抗體）存在固有且明顯的變異度，不同試劑盒對同一樣本的檢測結(jié)果，不僅可能在數(shù)值上出現(xiàn)較大差距，在特定 HCP（如低豐度或高風(fēng)險 HCP）的檢出能力上，也可能存在明顯偏差，這對生物制品 HCP 殘留的準(zhǔn)確管控構(gòu)成挑戰(zhàn)。因此，為確保檢測結(jié)果能真實反映自身產(chǎn)品的 HCP 殘留狀況，企業(yè)必須結(jié)合自身產(chǎn)品特性（如宿主細(xì)胞類型、目標(biāo)產(chǎn)物屬性）與生產(chǎn)工藝特點，對不同品牌、不同類型的試劑盒開展系統(tǒng)且詳細(xì)的平行比對實驗。同時，還需進(jìn)行針對性的適用性評估，驗證試劑盒對自身產(chǎn)品的檢測準(zhǔn)確性、特異性及穩(wěn)定性，再篩選出與自身產(chǎn)品匹配度適合的檢測方案，為生物...

畢赤酵母（Pichia pastoris）作為第二代酵母表達(dá)系統(tǒng)的代表性菌株，已被美國 FDA 認(rèn)定為 GRAS（一般認(rèn)為安全）級微生物，具備表達(dá)水平高、產(chǎn)物活性優(yōu)、培養(yǎng)成本低、易于擴大至工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢。在生物制藥領(lǐng)域，酶制劑、胰島素、表皮生長因子、膠原蛋白等多款生物制劑，已借助畢赤酵母系統(tǒng)實現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。和其他產(chǎn)品雜質(zhì)類似，畢赤酵母宿主殘留蛋白（HCP）可能對生物制品的安全性與有效性造成不利影響，故而在生產(chǎn)監(jiān)測、產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)中，需對其開展定量研究并實施嚴(yán)格控制。SHENTEK? 畢赤酵母 HCP 殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），是湖州申科生物自主研發(fā)的畢赤酵母 HCP 通用檢測...

宿主細(xì)胞殘留蛋白（HCP）檢測是生物制品質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，當(dāng)前主流技術(shù)為基于抗體的免疫學(xué)方法（如 ELISA）。但實際檢測中，不同試劑盒的結(jié)果常存在明顯偏差，關(guān)鍵問題源于其兩大關(guān)鍵組分 ——HCP 校準(zhǔn)品與檢測抗體 —— 在制備及表征上的高度可變性。作為定量基準(zhǔn)的校準(zhǔn)品，自身復(fù)雜性極高。不同供應(yīng)商制備時，所用細(xì)胞來源、培養(yǎng)及表達(dá)條件存在明顯差異，且宿主蛋白的提取純化工藝（如目標(biāo)產(chǎn)物去除策略）也各不相同，這些差異直接導(dǎo)致校準(zhǔn)品的組成、對實際樣品的代表性及儲存穩(wěn)定性千差萬別。檢測抗體（尤其是多克隆抗體）需通過免疫動物獲得，其特異性與 HCP 覆蓋度受多重因素影響：免疫原的選擇、動物個體免疫應(yīng)...

畢赤酵母（Pichia pastoris）作為第二代酵母表達(dá)系統(tǒng)的代表性菌株，已被美國 FDA 認(rèn)定為 GRAS（一般認(rèn)為安全）級微生物，具備表達(dá)水平高、產(chǎn)物活性優(yōu)、培養(yǎng)成本低、易于擴大至工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢。在生物制藥領(lǐng)域，酶制劑、胰島素、表皮生長因子、膠原蛋白等多款生物制劑，已借助畢赤酵母系統(tǒng)實現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。和其他產(chǎn)品雜質(zhì)類似，畢赤酵母宿主殘留蛋白（HCP）可能對生物制品的安全性與有效性造成不利影響，故而在生產(chǎn)監(jiān)測、產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)中，需對其開展定量研究并實施嚴(yán)格控制。SHENTEK? 畢赤酵母 HCP 殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），是湖州申科生物自主研發(fā)的畢赤酵母 HCP 通用檢測...

中國倉鼠卵巢細(xì)胞（Chinese Hamster Ovary，CHO）是生物制品生產(chǎn)中常用的動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，廣泛應(yīng)用于抗體、重組蛋白、疫苗等產(chǎn)品的制備。采用 CHO 細(xì)胞作為宿主進(jìn)行生產(chǎn)時，難免會引入宿主細(xì)胞蛋白（HCP）雜質(zhì)；即便 HCP 殘留量較低，仍可能存在免疫原性，還會帶來降低產(chǎn)品蛋白穩(wěn)定性等風(fēng)險。因此，需對生物制品中的 HCP 殘留進(jìn)行定量分析，從而保障純化工藝的一致性與終產(chǎn)品的安全性。SHENTEK?CHO 宿主細(xì)胞蛋白（HCP ）殘留檢測試劑盒實現(xiàn)了關(guān)鍵試劑的全國產(chǎn)化，其通過 CHO 細(xì)胞（K1&S）補料分批培養(yǎng)工藝制備 HCPs，再以此免疫綿羊獲取抗體，適用于檢測 CHO...

為何定制化試劑盒會成為宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測的優(yōu)先選擇？關(guān)鍵原因與檢測準(zhǔn)確性、藥物安全性緊密關(guān)聯(lián)。HCP ELISA 檢測屬于多分析物檢測技術(shù)，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，高度依賴校準(zhǔn)品品質(zhì)、抗體質(zhì)量及檢測方法的構(gòu)建。定制化 HCP ELISA 檢測試劑盒的主要優(yōu)勢，在于其依托更具代表性的 HCP 抗原對動物進(jìn)行免疫，由此制備的 HCP 抗體針對性更突出。這類針對性抗體可大幅降低 HCP 漏檢風(fēng)險，特別是針對生產(chǎn)工藝中特有的高風(fēng)險 HCP 因子，能呈現(xiàn)更優(yōu)的檢出成效，為藥物的安全性、有效性及質(zhì)量可控性提供堅實保障。 湖州申科構(gòu)建 HCP ELISA 檢測全流程平臺，確保試劑盒性能可靠。工藝...

畢赤酵母（Pichia pastoris）作為第二代酵母表達(dá)系統(tǒng)的代表性菌株，已被美國 FDA 認(rèn)定為 GRAS（一般認(rèn)為安全）級微生物，具備表達(dá)水平高、產(chǎn)物活性優(yōu)、培養(yǎng)成本低、易于擴大至工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢。在生物制藥領(lǐng)域，酶制劑、胰島素、表皮生長因子、膠原蛋白等多款生物制劑，已借助畢赤酵母系統(tǒng)實現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。和其他產(chǎn)品雜質(zhì)類似，畢赤酵母宿主殘留蛋白（HCP）可能對生物制品的安全性與有效性造成不利影響，故而在生產(chǎn)監(jiān)測、產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)中，需對其開展定量研究并實施嚴(yán)格控制。SHENTEK? 畢赤酵母 HCP 殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），是湖州申科生物自主研發(fā)的畢赤酵母 HCP 通用檢測...

宿主細(xì)胞殘留蛋白（HCP）檢測是生物制品質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，當(dāng)前主流技術(shù)為基于抗體的免疫學(xué)方法（如 ELISA）。但實際檢測中，不同試劑盒的結(jié)果常存在明顯偏差，關(guān)鍵問題源于其兩大關(guān)鍵組分 ——HCP 校準(zhǔn)品與檢測抗體 —— 在制備及表征上的高度可變性。作為定量基準(zhǔn)的校準(zhǔn)品，自身復(fù)雜性極高。不同供應(yīng)商制備時，所用細(xì)胞來源、培養(yǎng)及表達(dá)條件存在明顯差異，且宿主蛋白的提取純化工藝（如目標(biāo)產(chǎn)物去除策略）也各不相同，這些差異直接導(dǎo)致校準(zhǔn)品的組成、對實際樣品的代表性及儲存穩(wěn)定性千差萬別。檢測抗體（尤其是多克隆抗體）需通過免疫動物獲得，其特異性與 HCP 覆蓋度受多重因素影響：免疫原的選擇、動物個體免疫應(yīng)...

湖州申科生物專注于提供契合嚴(yán)苛法規(guī)要求的宿主細(xì)胞蛋白（HCP）ELISA 檢測試劑盒，主要目標(biāo)是滿足抗體藥、疫苗等生物制品在 IND/BLA 申報階段的監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)。為實現(xiàn)這一目標(biāo)，公司搭建了全流程依規(guī)開發(fā)的質(zhì)量管控體系 —— 整個開發(fā)過程嚴(yán)格遵循 ISO 13485 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，同時能充分滿足用戶審計需求，從體系層面保障產(chǎn)品合規(guī)性。其開發(fā)流程包含三大關(guān)鍵階段，前兩大基礎(chǔ)階段聚焦關(guān)鍵物料的品質(zhì)把控：一是 HCP 殘留定量檢測參考品開發(fā)，重點是構(gòu)建可靠的 HCP 抗原參考品，需完成抗原表征、量值溯源與賦值、均一性驗證及穩(wěn)定性考察等工作，為檢測準(zhǔn)確性與樣品代表性奠定基礎(chǔ)；二是高質(zhì)量大批量抗體制備，通...

LC-MS技術(shù)作為生物制品宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測的新趨勢，應(yīng)用時需重點考慮以下五方面：①穩(wěn)定性：需對HCPs的LC-MS檢測流程開展驗證，全流程需實施嚴(yán)格QC管控，以保障檢測結(jié)果的一致性與穩(wěn)定性。②可重復(fù)性：不同類型生物制品中HCPs的提取效率存在差異，且不同人員操作會產(chǎn)生偏差，因此需在上機前通過多種方法評估HCPs提取效率，規(guī)避人為因素導(dǎo)致的結(jié)果重復(fù)性不佳問題。③準(zhǔn)確度：在方法開發(fā)與驗證階段，需設(shè)置內(nèi)標(biāo)并確定定量算法，通過內(nèi)標(biāo)響應(yīng)回算得出HCPs含量，以此保證定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。④抗干擾能力：高豐度蛋白與特殊基質(zhì)會干擾質(zhì)譜檢測，需借助前處理手段去除高豐度蛋白或特殊基質(zhì)，從而降低其對...

宿主細(xì)胞蛋白殘留檢測抗體覆蓋率評估實驗操作復(fù)雜，需要在建立實驗方法階段對關(guān)鍵步驟進(jìn)行充分的驗證，以證明實驗方法的穩(wěn)健性。湖州申科開發(fā)的基于磁珠捕獲的IMBS方法（immunomagnetic beads separation），在開發(fā)過程中對關(guān)鍵步驟進(jìn)行了充分驗證,相關(guān)結(jié)果經(jīng)過專業(yè)評審，驗證的內(nèi)容如下（部分）：①方法優(yōu)化：針對磁珠與抗體的偶聯(lián)比例、洗滌液體積、洗滌次數(shù)、洗脫次數(shù)等關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化驗證，以保證方法的穩(wěn)健性；②過程質(zhì)控：二維電泳存在實驗步驟多，時間跨度長，中間步驟難以控制等缺陷，因此在等電聚焦實驗部分設(shè)計了熒光標(biāo)記多肽，可快速判斷等電聚焦效果。在SDS-PAGE電泳的兩側(cè)增加4...

HCP 是宿主細(xì)胞（多為哺乳動物細(xì)胞或微生物）所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，這類蛋白質(zhì)存在潛在風(fēng)險，可能對藥物的安全性與有效性產(chǎn)生影響。因此，宿主細(xì)胞蛋白（HCP ）殘留量成為生物藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性，需在藥物開發(fā)與生產(chǎn)階段，對 HCP 的存在進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控、管理并做好記錄。隨著生產(chǎn)流程推進(jìn)，生物制品純度逐步提升，但 HCP 的總量與種類也在不斷減少，這無疑增加了 HCP 分析與監(jiān)測工作的難度。在此背景下，開發(fā)高效的 HCP 富集材料及技術(shù)便顯得尤為重要。低豐度宿主殘留蛋白富集試劑盒，專為富集生物制品（如單抗、融合蛋白等）中的 HCP 并去除高豐度蛋白而設(shè)計，其通過磁珠法構(gòu)建多樣化且復(fù)雜的親和配體庫，以實現(xiàn)對目...

宿主細(xì)胞蛋白（HCPs）是生物制品生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的關(guān)鍵工藝相關(guān)雜質(zhì)之一，可導(dǎo)致患者不良的免疫反應(yīng)、超敏反應(yīng)，另外也存在導(dǎo)致產(chǎn)品蛋白的降解等問題，影響產(chǎn)品的安全性和有效性，是一項關(guān)鍵質(zhì)控指標(biāo)。HCPs殘留檢測應(yīng)用常用的方法是ELISA法，操作簡單、靈敏度高，通量較高，是HCPs殘留檢測的日常放行檢方法，各國藥典規(guī)定了用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行HCPs殘留檢測。然而，ELISA 方法檢測HCP殘留仍面臨諸多挑戰(zhàn)。在實際的工藝生產(chǎn)過程中，宿主來源、生產(chǎn)工藝、純化方式、生產(chǎn)規(guī)模等因素均可能對HCPs的種類及復(fù)雜性產(chǎn)生影響。 抗體覆蓋率評估屬于定性分析，要求是穩(wěn)定性好，靈敏度高，與ELISA檢測的原理相似，確...

湖州申科生物依據(jù)不同宿主的實際生產(chǎn)工藝，借助高質(zhì)量免疫原與HCP多抗的標(biāo)準(zhǔn)化制備流程，制備出高效價、高覆蓋率的抗體，進(jìn)而開發(fā)出SHENTEK?HCP檢測試劑盒：適配大腸桿菌表達(dá)菌（BL21）生產(chǎn)工藝及克隆菌堿裂法提取質(zhì)粒工藝，以及適配CHO、MDCK、HEK293、Sf9、VERO、畢赤酵母等不同宿主，可用于中間品、原液及終產(chǎn)品的HCP定量監(jiān)測。為保障ELISA法對HCP定量檢測的準(zhǔn)確性，需對HCP抗體覆蓋率開展驗證。湖州申科的抗體覆蓋率平臺，采用2D Clean-up試劑盒去除蛋白樣品中的干擾物（如洗滌劑、鹽、脂質(zhì)、酚類、核酸等離子污染物），同時設(shè)置2D質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品實施嚴(yán)格質(zhì)控，并以陰性抗...

各國法規(guī)要求對生物藥品開展分析與純化處理，以將宿主細(xì)胞蛋白（HCP）降至可接受水平；即便終產(chǎn)品中痕量 HCP 進(jìn)入患者體內(nèi)，目前仍不明確特定殘留蛋白質(zhì)雜質(zhì)是否會對藥物的穩(wěn)定性或免疫原性產(chǎn)生影響。在 HCP 限量標(biāo)準(zhǔn)方面，美國藥典推薦終產(chǎn)品 HCP 水平為 1-100 ng/mg；中國藥典各論則明確，大腸桿菌（E.coli）菌體 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.10%（即 1000 ng/mg），CHO 細(xì)胞 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.05%（即 500 ng/mg），假單胞菌 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.02%（即 200 ng/mg）。 在生物制品質(zhì)控領(lǐng)域需要基于產(chǎn)品特性...

由于 HCPs 屬于復(fù)雜的多分析物，為制備覆蓋率盡可能高的抗體（以覆蓋工藝特有的高風(fēng)險 HCPs），需采用可靠的免疫策略。獲得符合性能要求的抗體后，需借助經(jīng)過驗證的 2D 或 LC-MS 方法對抗體覆蓋率進(jìn)行表征，確?？贵w可充分覆蓋各實際工藝下產(chǎn)生的 HCPs。在擁有代表性抗原與優(yōu)良性能抗體的基礎(chǔ)上，開展 ELISA 檢測體系開發(fā)，涵蓋原輔料篩選與制備研究、各組分工藝及反應(yīng)體系研究、穩(wěn)定性研究等重要內(nèi)容。檢測體系開發(fā)完成后，需依據(jù) ICH 及藥典要求開展分析方法驗證評估，確保體系的線性、范圍、檢測限、定量限、準(zhǔn)確度、精密度、專屬性及耐用性均滿足法規(guī)要求。 HCP 檢測試劑盒開發(fā)要兼顧法規(guī)合...

由于 HCPs 屬于復(fù)雜的多分析物，為制備覆蓋率盡可能高的抗體（以覆蓋工藝特有的高風(fēng)險 HCPs），需采用可靠的免疫策略。獲得符合性能要求的抗體后，需借助經(jīng)過驗證的 2D 或 LC-MS 方法對抗體覆蓋率進(jìn)行表征，確?？贵w可充分覆蓋各實際工藝下產(chǎn)生的 HCPs。在擁有代表性抗原與優(yōu)良性能抗體的基礎(chǔ)上，開展 ELISA 檢測體系開發(fā)，涵蓋原輔料篩選與制備研究、各組分工藝及反應(yīng)體系研究、穩(wěn)定性研究等重要內(nèi)容。檢測體系開發(fā)完成后，需依據(jù) ICH 及藥典要求開展分析方法驗證評估，確保體系的線性、范圍、檢測限、定量限、準(zhǔn)確度、精密度、專屬性及耐用性均滿足法規(guī)要求。 HCP抗體能識別工藝中存在的HCP...

目前通過Vero細(xì)胞培養(yǎng)的病毒有狂犬病病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒等，種類繁多，工藝也各有千秋。湖州申科生物Vero細(xì)胞裂解型HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法）針對工藝過程中Vero細(xì)胞裂解后產(chǎn)生的大量不同種類的HCPs，可定量檢測使用Vero細(xì)胞系生產(chǎn)并通過細(xì)胞裂解工藝收獲的生物制品中宿主細(xì)胞蛋白的殘留檢測，抗體與校準(zhǔn)品可覆蓋近3000種蛋白。試劑盒操作簡便，提高實驗人員的時間利用率。試劑盒抗體覆蓋率為65.1%-85.1%（IMBS-2D）和76.9%(IMBS-MS，Unique Peptide≥2）。試劑盒嚴(yán)格遵循ISO13485質(zhì)量體系進(jìn)行生產(chǎn)，并按照法規(guī)要求進(jìn)行了性能驗證，各項...