ELISA法宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒

來源： 發(fā)布時間：2025-11-03

湖州申科運用免疫磁珠分離技術(shù)（IMBS），搭配 2D 電泳或 LC-MS 技術(shù)評估抗體覆蓋率。IMBS 的主要流程涵蓋：多克隆抗體與磁珠的偶聯(lián)反應、磁珠未結(jié)合位點的封閉處理、HCP 樣本與結(jié)合抗體的磁珠共同孵育反應。該過程中，HCP 抗體會結(jié)合可識別的 HCP，未被識別的 HCP 則通過后續(xù)洗滌步驟去除，隨后借助低 pH 等洗脫條件，收集抗體捕獲的 HCP。此方法具備 AAE（抗體親和提取，Antibody Affinity Extraction）免疫層析柱分離的全部優(yōu)勢，同時免疫磁珠可在懸浮狀態(tài)下與 HCP 樣品充分混勻并結(jié)合，HCP 結(jié)合效果更優(yōu)；且依托磁珠吸附，能減少 HCP 與填料的非特異性吸附，進一步提升實驗準確性。
宿主檢測方法替換需橋接驗證，確保新舊方法結(jié)果一致性與可比性。ELISA法宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒

ELISA法宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

昆蟲細胞桿狀病毒表達系統(tǒng)（IC-BEVS）是一種真核表達系統(tǒng)，以桿狀病毒為外源基因載體，以昆蟲細胞為宿主實現(xiàn)外源蛋白的生產(chǎn)。該系統(tǒng)具備便于規(guī)?；a(chǎn)、培養(yǎng)成本低、生物安全性高等優(yōu)勢，近年已逐步應用于重組蛋白、rAAV 載體、亞單位疫苗（如病毒樣顆粒（VLP）疫苗）等產(chǎn)品的生產(chǎn)，在生物制品重組蛋白表達領(lǐng)域已得到廣泛應用。Sf9 細胞系源自草地夜蛾細胞系（Spodoptera frugiperda cell line，簡稱 Sf），是當前較為常用的昆蟲細胞系之一。SHENTEK® Sf9 HCP 殘留蛋白檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），可對采用 Sf9 細胞系生產(chǎn)的生物制品中宿主細胞蛋白（HCP）殘留進行定量檢測。該試劑盒的抗體覆蓋率分別為 70.4%-96.0%（采用 IMBS-2D 法）和 91.2%（采用 IMBS-MS 法，Unique Peptide ≥2）。
浙江單抗藥物用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒總蛋白檢測差異是 HCP 免疫檢測結(jié)果不同的原因之一。

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宿主細胞蛋白（HCP）ELISA 定制化開發(fā)平臺需具備完善的開發(fā)體系、可靠的技術(shù)平臺與專業(yè)的開發(fā)團隊，以此實現(xiàn)長期穩(wěn)定供應符合法規(guī)要求的試劑盒。其中，校準品作為關(guān)鍵原材料，其良好的穩(wěn)定性與溯源保障對試劑盒生命周期至關(guān)重要。為確保校準品穩(wěn)定，通常采用凍干工藝制備，通過單因素方差分析方法評估其均一性，并依據(jù)法規(guī)規(guī)定的蛋白定量方法為校準品賦值，同時溯源至國家標準品（如有）或 BSA 國家標準品，從源頭保障檢測的準確性與合規(guī)性，為后續(xù)檢測體系的可靠運行奠定基礎。

為何定制化試劑盒是宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測的優(yōu)先選擇？特定工藝來源的抗原與校準品更具代表性，是重要原因之一。不同生物制品的上游生產(chǎn)工藝存在差異，比如培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、收獲時機等不同，都會使產(chǎn)生的 HCP 在蛋白種類、豐度及翻譯修飾上出現(xiàn)區(qū)別，進而導致進入下游純化工藝的 HCP 類型相應改變 —— 尤其是與藥物主成分共同純化的 HCP，會以優(yōu)勢蛋白的形式存在于藥物原液或制劑中。HCP 定制化 ELISA 檢測試劑盒通常選用實際生產(chǎn)工藝中上游發(fā)酵后的樣品制備抗原與校準品，這樣制得的校準品能較充分地體現(xiàn)實際工藝中的 HCP，有效降低因抗原或校準品種類不足引發(fā)的漏檢風險，同時減少定量不準確的問題。
SHENTEK? AutoElisa-4K HCP 檢測自動化系統(tǒng)可減少人為誤差，滿足 21 CFR Part 11 數(shù)據(jù)管理要求。

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宿主細胞蛋白（HCPs）是生物制品生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的重要工藝相關(guān)雜質(zhì)，不僅可能引發(fā)患者不良免疫反應、超敏反應，還可能造成產(chǎn)品蛋白降解等問題，進而影響生物制品的安全性與有效性，因此成為生物制品質(zhì)量控制中的關(guān)鍵指標。目前 HCPs 殘留檢測的常用方法為 ELISA 法，該方法操作簡便、靈敏度高且檢測通量較高，是 HCPs 殘留的日常放行檢測方法，各國藥典均對采用酶聯(lián)免疫法開展 HCPs 殘留檢測作出規(guī)定。不過，采用 ELISA 法檢測 HCPs 殘留仍存在不少挑戰(zhàn)：在實際生產(chǎn)工藝中，宿主細胞來源、生產(chǎn)工藝路線、純化技術(shù)、生產(chǎn)規(guī)模等因素，均可能改變 HCPs 的種類與復雜程度，給檢測帶來不確定性。
湖州申科自主開發(fā)的抗體覆蓋率驗證IMBS平臺經(jīng)完善驗證，結(jié)果可靠，符合法規(guī)要求，可用于申報。浙江單抗藥物用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒

湖州申科建立宿主特異 HCP 數(shù)據(jù)庫，支持高風險蛋白準確鑒定與分析。ELISA法宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測試劑盒

HEK293細胞源自人胚腎細胞，在細胞與基因治療領(lǐng)域應用較廣，例如用于病毒載體生產(chǎn)等。盡管生物制品會經(jīng)過多步純化工藝去除相關(guān)雜質(zhì)，但微量殘留的宿主細胞蛋白（HCP）仍可能引發(fā)機體免疫應答，進而影響產(chǎn)品質(zhì)量與安全性。因此，需對生產(chǎn)工藝中殘留的HEK293 HCP開展定量檢測，確保其符合產(chǎn)品放行標準。湖州申科生物的HEK293 HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），適用于對HEK293及HEK293T來源生物制品（如重組蛋白類、細胞和基因治療類等）中的宿主細胞蛋白進行定量檢測。該試劑盒檢測步驟少、速度快，且具備專一性強、性能穩(wěn)定可靠的特點。
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